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沙棘果肉和种子油脂合成积累及转录表达差异研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
1 绪论第16-32页
    1.1 课题背景第16页
    1.2 沙棘及其油脂相关研究进展第16-20页
        1.2.1 沙棘研究概况第16-17页
        1.2.2 沙棘的生物学特性第17页
        1.2.3 沙棘油脂及其他生物活性成分第17-20页
    1.3 分子标记在沙棘种质资源中的应用第20-21页
        1.3.1 亲缘关系及遗传多样性分析第20页
        1.3.2 应用分子标记方法的标记-性状连锁分析第20-21页
    1.4 植物油脂的研究进展第21-27页
        1.4.1 植物油脂概述第21-22页
        1.4.2 油脂和脂肪酸的作用和意义第22-24页
        1.4.3 油脂和脂肪酸的生物合成途径及相关基因第24-27页
    1.5 基于HiSeq平台的转录组测序第27-30页
        1.5.1 转录组测序第28-29页
        1.5.2 小RNA测序第29-30页
    1.6 整合组学鉴定生物合成的分子机制第30-31页
    1.7 研究的主要内容和目的意义第31-32页
2 沙棘种质含油量及品质性状分析第32-40页
    2.1 材料与方法第32-34页
        2.1.1 试验材料第32页
        2.1.2 试验方法第32-34页
    2.2 结果与分析第34-38页
        2.2.1 沙棘果肉和种子含油量分析第34-36页
        2.2.2 其他性状指标分析第36-38页
    2.3 讨论第38-39页
    2.4 本章小结第39-40页
3 沙棘种质亲缘关系ISSR分析及性状连锁标记鉴定第40-51页
    3.1 材料与方法第40-42页
        3.1.1 试验材料第40页
        3.1.2 试验方法第40-42页
    3.2 结果与分析第42-48页
        3.2.1 沙棘种质遗传关系的ISSR分析第42-43页
        3.2.2 聚类分析和多维尺度分析第43-45页
        3.2.3 ISSR标记与含油量性状连锁分析第45-48页
    3.3 讨论第48-50页
        3.3.1 蒙古沙棘亚种与其杂交种的遗传关系第48-49页
        3.3.2 与沙棘含油量性状连锁的ISSR标记第49-50页
    3.4 本章小结第50-51页
4 沙棘果实发育过程中含油量及脂肪酸组分的动态变化第51-69页
    4.1 材料与方法第51-53页
        4.1.1 试验材料第51页
        4.1.2 试验方法第51-53页
    4.2 结果与分析第53-65页
        4.2.1 沙棘果实发育过程中油脂积累的动态变化第53-55页
        4.2.2 沙棘果实发育过程中脂肪酸组分的动态变化第55-62页
        4.2.3 沙棘果实发育过程中含油量及脂肪酸组分相关性分析第62-65页
    4.3 讨论第65-68页
        4.3.1 果肉和种子油脂合成积累模式第65-66页
        4.3.2 果肉和种子脂肪酸组分的合成积累模式第66-67页
        4.3.3 油脂和脂肪酸组分相关性分析第67-68页
    4.4 本章小结第68-69页
5 沙棘不同组织转录组测序及油脂合成相关差异表达基因分析第69-86页
    5.1 材料与方法第69-72页
        5.1.1 植物材料第69页
        5.1.2 总RNA提取第69-70页
        5.1.3 转录组测序及分析第70-72页
    5.2 结果与分析第72-84页
        5.2.1 沙棘总RNA质量评价第72页
        5.2.2 沙棘转录组de novo测序数据分析第72-78页
        5.2.3 沙棘不同组织部位的差异表达基因分析第78-81页
        5.2.4 与沙棘油脂合成相关的差异表达基因第81-84页
    5.3 讨论第84-85页
    5.4 本章小结第85-86页
6 沙棘油脂和脂肪酸合成相关基因的qRT-PCR分析第86-104页
    6.1 材料与方法第86-93页
        6.1.1 试验材料第86页
        6.1.2 试剂及仪器第86页
        6.1.3 试验方法第86-93页
    6.2 结果与分析第93-100页
        6.2.1 沙棘油脂和脂肪酸合成相关的unigene的获得第93-94页
        6.2.2 沙棘油脂合成相关基因片段的克隆第94页
        6.2.3 沙棘油脂和脂肪酸合成相关基因的表达分析第94-100页
    6.3 讨论第100-103页
        6.3.1 果肉油脂和脂肪酸合成相关基因的表达模式第100-101页
        6.3.2 种子油脂和脂肪酸合成相关基因的表达模式第101-102页
        6.3.3 果肉和种子油脂合成基因表达模式差异第102-103页
    6.4 本章小结第103-104页
7 基于不同时期的果肉和种子RNA-Seq挖掘油脂合成关键基因第104-122页
    7.1 材料与方法第104-106页
        7.1.1 试验材料第104页
        7.1.2 总RNA样品及检测第104-105页
        7.1.3 cDNA文库构建、纯化及测序第105页
        7.1.4 数据处理及生物信息学分析第105页
        7.1.5 实时定量PCR验证第105-106页
    7.2 结果与分析第106-119页
        7.2.1 RNA质量与评价第106-107页
        7.2.2 测序数据质量评估第107-109页
        7.2.3 转录组de novo组装及基因功能注释第109-112页
        7.2.4 不同生育期沙棘果肉和种子差异表达基因筛选第112-114页
        7.2.5 与沙棘油脂和脂肪酸合成相关的差异表达基因第114-115页
        7.2.6 差异基因的表达模式分析第115-119页
        7.2.7 新发现的油脂合成相关基因qRT-PCR验证第119页
    7.3 讨论第119-121页
    7.4 本章小结第121-122页
结论第122-124页
参考文献第124-144页
附录A 沙棘果肉和种子脂肪酸组分的动态变化第144-147页
附录B 5种沙棘组织中与脂类代谢途径相关的差异表达基因和pathway富集结果第147-148页
附录C 果肉vs.种子差异表达基因GO功能分类图第148-149页
附录D GPD1、KAS Ⅱ、Δ9D和SAD基因同源蛋白序列比对第149-153页
附录E 不同生育期果肉和种子转录组测序碱基质量统计图第153-154页
附录F 沙棘果肉和种子中甘油酯代谢通路(ko00561)第154-155页
附录G 沙棘果肉和种子中甘油磷脂代谢通路(ko00564)第155-156页
附录H 沙棘果肉和种子中脂肪酸合成途径(ko00061)第156-157页
攻读学位期间发表的学术论文第157-158页
致谢第158-159页

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