针对人肠道病毒的广谱检测单抗及新型通用中和检测方法的研究
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
缩略词 | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第14-35页 |
1 肠道病毒的生物学特性 | 第14-21页 |
1.1 肠道病毒的分型 | 第14-16页 |
1.2 肠道病毒结构及理化性质 | 第16-17页 |
1.3 肠道病毒的基因组结构及功能 | 第17-21页 |
2 肠道病毒的致病机制及治疗 | 第21-28页 |
2.1 肠道病毒致病机制 | 第21-23页 |
2.2 肠道病毒的临床症状 | 第23-25页 |
2.3 肠道病毒的流行性 | 第25页 |
2.4 肠道病毒的检测 | 第25-27页 |
2.5 肠道病毒的治疗 | 第27-28页 |
3 肠道病毒疫苗前沿概况 | 第28-31页 |
3.1 脊髓灰质炎疫苗 | 第29-30页 |
3.2 EV71疫苗 | 第30-31页 |
3.3 CVA16疫苗 | 第31页 |
4 中和实验方法 | 第31-34页 |
4.1 传统TCID_(50)方法 | 第31-32页 |
4.2 酶联免疫斑点法 | 第32-34页 |
5 本论文研究的思路、目的和意义 | 第34-35页 |
第二章 材料与方法 | 第35-57页 |
1 材料 | 第35-40页 |
1.1 主要仪器 | 第35-36页 |
1.2 细胞株和病毒株 | 第36-37页 |
1.3 试剂 | 第37-38页 |
1.4 常用溶液剂培养基配置 | 第38-40页 |
2 方法 | 第40-57页 |
2.1 分子生物学实验方法 | 第40-44页 |
2.2 细胞生物学实验方法 | 第44-45页 |
2.3 肠道病毒实验方法 | 第45-47页 |
2.4 免疫组化相关操作 | 第47-50页 |
2.5 单抗的筛选、生产与纯化 | 第50-54页 |
2.6 单抗的HRP标记 | 第54-55页 |
2.7 血清中和实验 | 第55-57页 |
第三章 结果与分析 | 第57-75页 |
第一部分 肠道病毒广谱单抗的筛选与鉴定 | 第57-70页 |
1 氨基酸序列同源性分析 | 第57-59页 |
2 重组蛋白颗粒的表达 | 第59-63页 |
2.1 重组蛋白克隆构建 | 第59-61页 |
2.2 蛋白表达及纯化 | 第61-63页 |
3 多抗血清筛选 | 第63-64页 |
4 单抗筛选 | 第64-67页 |
4.1 Elispot鉴定 | 第65-66页 |
4.2 单抗与2C多肽结合活性的鉴定 | 第66页 |
4.3 免疫荧光鉴定 | 第66-67页 |
5 单抗性质鉴定 | 第67-70页 |
5.1 单抗型别鉴定及不同单抗间的相互阻断 | 第67-68页 |
5.2 单抗对不同时段免疫荧光的检测 | 第68-69页 |
5.3 单抗的免疫组化检测 | 第69-70页 |
第二部分 肠道病毒广谱中和实验方法的建立 | 第70-75页 |
1 广谱酶联免疫斑点方法的建立 | 第70-71页 |
2 广谱酶联免疫斑点方法的评价 | 第71-75页 |
讨论 | 第75-78页 |
小结与展望 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-88页 |
致谢 | 第88页 |