| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-32页 |
| 1.1 miRNA及其在骨骼肌和脂肪形成中的作用 | 第15-19页 |
| 1.1.1 miRNA概述 | 第15-16页 |
| 1.1.2 miRNA在骨骼肌和脂肪分化中的作用 | 第16-19页 |
| 1.2 骨骼肌分化的调控 | 第19-27页 |
| 1.2.1 骨骼肌的组成与结构 | 第19-21页 |
| 1.2.2 肌纤维的类型与特点 | 第21-23页 |
| 1.2.3 骨骼肌的分化与调控 | 第23-27页 |
| 1.3 脂肪细胞分化的调控 | 第27-30页 |
| 1.3.1 脂肪的种类与组成 | 第27-28页 |
| 1.3.2 脂肪的分化与调控 | 第28-30页 |
| 1.4 肉牛肌内脂肪 | 第30-32页 |
| 第二章 牛胎儿骨骼肌来源成肌细胞和前体脂肪细胞的分离与诱导 | 第32-47页 |
| 2.1 材料和方法 | 第32-38页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第32页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.1.3 主要试剂及配制方法 | 第33-35页 |
| 2.1.4 细胞分离 | 第35-36页 |
| 2.1.5 细胞培养 | 第36页 |
| 2.1.6 成肌细胞的成肌诱导分化 | 第36页 |
| 2.1.7 前体脂肪细胞的成脂诱导分化 | 第36页 |
| 2.1.8 采用BMP4开展前体脂肪细胞的成脂诱导 | 第36页 |
| 2.1.9 油红O染色 | 第36-37页 |
| 2.1.10 免疫荧光染色 | 第37页 |
| 2.1.11 总RNA提取 | 第37页 |
| 2.1.12 反转录 | 第37页 |
| 2.1.13 定量PCR反应 | 第37-38页 |
| 2.1.14 qPCR数据统计 | 第38页 |
| 2.2 结果 | 第38-45页 |
| 2.2.1 间充质干细胞的分离和培养 | 第38-39页 |
| 2.2.2 CD140a阳性/阴性细胞的成肌诱导分化和免疫荧光鉴定 | 第39-41页 |
| 2.2.3 CD140a阳性/阴性细胞的成脂诱导分化和油红O染色 | 第41-42页 |
| 2.2.4 CD140a阳性/阴性细胞分选对成肌相关基因的表达的影响 | 第42-43页 |
| 2.2.5 CD140a阳性/阴性细胞分选对成脂相关基因的表达的影响 | 第43-44页 |
| 2.2.6 利用BMP4诱导前体脂肪细胞的油红O染色鉴定结果 | 第44-45页 |
| 2.2.7 利用BMP4诱导前体脂肪细胞对成脂相关基因的表达的影响 | 第45页 |
| 2.3 讨论 | 第45-47页 |
| 2.3.1 利用CD140a分选纯化牛胎儿骨骼肌来源成肌细胞 | 第45-46页 |
| 2.3.2 利用CD140a分选纯化牛胎儿骨骼肌来源前体脂肪细胞 | 第46页 |
| 2.3.3 利用BMP4诱导前体脂肪细胞 | 第46-47页 |
| 第三章 成肌细胞分化中差异miRNAs的鉴定 | 第47-61页 |
| 3.1 材料和方法 | 第47-49页 |
| 3.1.1 主要仪器设备 | 第47页 |
| 3.1.2 主要试剂及配制方法 | 第47-48页 |
| 3.1.3 文库构建 | 第48页 |
| 3.1.4 small RNA测序原始数据质控 | 第48页 |
| 3.1.5 参考序列比对 | 第48页 |
| 3.1.6 差异表达miRNAs筛选 | 第48-49页 |
| 3.1.7 靶基因预测 | 第49页 |
| 3.1.8 miRNA靶基因GO分析和KEGG通路分析 | 第49页 |
| 3.2 结果 | 第49-59页 |
| 3.2.1 测序数据质量控制 | 第49-51页 |
| 3.2.2 sRNA长度筛选 | 第51-52页 |
| 3.2.3 成肌分化差异miRNA筛选 | 第52-58页 |
| 3.2.4 靶基因预测结果 | 第58页 |
| 3.2.5 成肌分化靶基因的GO分析和KEGG通路分析 | 第58-59页 |
| 3.3 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 前体脂肪细胞分化中差异miRNAs的鉴定 | 第61-73页 |
| 4.1 材料和方法 | 第61-62页 |
| 4.1.1 主要仪器设备 | 第61页 |
| 4.1.2 主要试剂及配制方法 | 第61页 |
| 4.1.3 miRNA stem-loop qPCR验证 | 第61-62页 |
| 4.2 结果 | 第62-71页 |
| 4.2.1 测序数据质量控制 | 第62-63页 |
| 4.2.2 sRNA长度筛选 | 第63-64页 |
| 4.2.3 成脂分化差异miRNAs筛选 | 第64-69页 |
| 4.2.4 靶基因预测结果 | 第69-70页 |
| 4.2.5 成脂分化靶基因的GO分析和KEGG通路分析 | 第70页 |
| 4.2.6 差异表达miRNA的qPCR验证 | 第70-71页 |
| 4.3 讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 成脂分化中miR-23a的调控机制研究 | 第73-84页 |
| 5.1 材料和方法 | 第73-77页 |
| 5.1.1 主要仪器设备 | 第73页 |
| 5.1.2 主要试剂及配制方法 | 第73-74页 |
| 5.1.3 反转录 | 第74页 |
| 5.1.4 定量PCR反应 | 第74页 |
| 5.1.5 油红O染色 | 第74页 |
| 5.1.6 Western blot | 第74-76页 |
| 5.1.7 靶基因预测 | 第76页 |
| 5.1.8 双荧光素酶报告载体构建 | 第76-77页 |
| 5.1.9 细胞转染 | 第77页 |
| 5.2 结果 | 第77-82页 |
| 5.2.1 转染miR-23a模拟物对牛胎儿骨骼肌来源前体脂肪细胞分化的影响 | 第77-78页 |
| 5.2.2 敲低内源miR-23a对牛胎儿骨骼肌来源前体脂肪细胞分化的影响 | 第78-79页 |
| 5.2.3 bta-miR-23a的靶基因预测及其调控机制研究 | 第79-82页 |
| 5.3 讨论 | 第82-84页 |
| 第六章 全文结论 | 第84-85页 |
| 6.1 研究结论 | 第84页 |
| 6.2 研究创新点 | 第84页 |
| 6.3 下一步研究建议 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 作者简历 | 第99页 |
