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带有GFP标记的马铃薯大丽轮枝菌的获得及其在马铃薯中侵染过程研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 引言第11-20页
    1.1 马铃薯黄萎病发生与危害第11页
    1.2 发病症状第11页
    1.3 马铃薯黄萎病的病原菌及生理特性第11-13页
    1.4 黄萎病的发生条件第13-14页
    1.5 大丽轮枝菌的致病机理第14-15页
        1.5.1 堵塞学说第14页
        1.5.2 毒素学说第14-15页
    1.6 大丽轮枝菌侵染过程第15-17页
        1.6.1 病原菌侵入阶段第15-16页
        1.6.2 病原菌在寄主体内的扩展蔓延第16-17页
        1.6.3 病原菌侵染后症状的形成第17页
        1.6.4 寄主的抗病反应第17页
    1.7 丝状真菌遗传转化研究进展第17-18页
        1.7.1 丝状真菌遗传转化的发展历程第17-18页
        1.7.2 根瘤农杆菌介导的遗传转化法第18页
    1.8 绿色荧光蛋白在植物病原真菌研究的应用状况第18-19页
    1.9 研究的内容和意义第19-20页
2 马铃薯黄萎病病菌的分离与鉴定第20-30页
    2.1 病原菌的分离鉴定第20-24页
        2.1.1 材料第20页
        2.1.2 实验方法第20-22页
        2.1.3 实验结果第22-24页
    2.2 病原菌的回接鉴定第24-25页
        2.2.1 实验材料第24页
        2.2.2 实验方法第24页
        2.2.3 实验结果第24-25页
    2.3 大丽轮枝菌的再分离和鉴定第25-27页
        2.3.1 实验材料第25页
        2.3.2 方法第25页
        2.3.3 结果第25-27页
    2.4 不同马铃薯品种抗黄萎病鉴定第27-29页
        2.4.1 实验材料第27页
        2.4.2 试验方法第27-28页
        2.4.3 实验结果第28-29页
    2.5 结论与讨论第29-30页
3 GFP标记的马铃薯大丽轮枝菌生物学特性研究第30-39页
    3.1 材料第30-31页
        3.1.1 马铃薯品种第30页
        3.1.2 菌株和质粒第30页
        3.1.3 主要试剂第30页
        3.1.4 培养基的配制第30-31页
    3.2 实验方法第31-33页
        3.2.1 农杆菌介导的大丽轮枝菌的遗传转化第31页
        3.2.2 大丽轮枝菌转化子的稳定性检测和单孢分离第31页
        3.2.3 马铃薯大丽轮枝菌阳性转化子的分子鉴定第31-32页
        3.2.4 大丽轮枝菌转化子的菌落形态观察和生长速度的测定第32页
        3.2.5 大丽轮枝菌转化子的产孢量和萌发率的测定第32页
        3.2.6 大丽轮枝菌转化子粗毒素含量测定第32页
        3.2.7 大丽轮枝菌转化子致病力的测定第32-33页
    3.3 结果第33-37页
        3.3.1 阳性转化子的筛选第33页
        3.3.2 大丽轮枝菌转化子的分子鉴定及GFP荧光观察第33-34页
        3.3.3 大丽轮枝菌转化子的菌落形态和生长速度第34-35页
        3.3.4 大丽轮枝菌转化子的产孢量和萌发率的测定第35-36页
        3.3.5 大丽轮枝菌阳性转化子粗毒素含量和致病力的测定第36-37页
    3.4 讨论第37-39页
4 GFP标记大丽轮枝菌对马铃薯侵染过程的观察第39-48页
    4.1 材料第39页
        4.1.1 供试材料与菌株第39页
        4.1.2 主要试剂第39页
    4.2 方法第39-40页
        4.2.1 接种方法第39页
        4.2.2 制片及荧光观察第39页
        4.2.3 植株DNA提取及分子鉴定第39-40页
    4.3 实验结果第40-46页
        4.3.1 根部侵染第40-41页
        4.3.2 茎部侵染第41-42页
        4.3.3 叶柄的侵染第42-43页
        4.3.4 块茎的侵染第43-44页
        4.3.5 分子测定第44-45页
        4.3.6 症状扩展第45-46页
    4.4 讨论第46-48页
5 全文结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-56页
作者简介第56页

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