中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
第一章 绪论 | 第21-39页 |
1.1 虫草素概述 | 第21-29页 |
1.1.1 虫草素简介 | 第21-23页 |
1.1.2 虫草素抗癌进展 | 第23-24页 |
1.1.3 虫草素抗癌机制 | 第24-28页 |
1.1.4 虫草素代谢特点 | 第28-29页 |
1.2 靶向传递系统 | 第29-33页 |
1.2.1 脂质体 | 第30-32页 |
1.2.2 聚合物胶束 | 第32-33页 |
1.2.3 聚合物纳米粒 | 第33页 |
1.3 肝癌概述 | 第33-34页 |
1.4 乳腺癌概述 | 第34-35页 |
1.5 转铁蛋白 | 第35-39页 |
第二章 虫草素抗肝癌活性评价 | 第39-55页 |
2.1 引言 | 第39页 |
2.2 仪器与材料 | 第39-42页 |
2.2.1 主要仪器和设备 | 第39-40页 |
2.2.2 主要试剂 | 第40-41页 |
2.2.3 溶液配制 | 第41页 |
2.2.4 细胞株 | 第41页 |
2.2.5 实验动物 | 第41-42页 |
2.3 实验方法 | 第42-44页 |
2.3.1 细胞活力分析 | 第42页 |
2.3.2 结晶紫实验 | 第42页 |
2.3.3 流式细胞术分析 | 第42-43页 |
2.3.4 活性氧的测定 | 第43页 |
2.3.5 线粒体膜电位测定 | 第43页 |
2.3.6 Western blot实验 | 第43-44页 |
2.3.7 裸鼠体内实验 | 第44页 |
2.3.8 统计方法学分析 | 第44页 |
2.4 实验结果和讨论 | 第44-53页 |
2.4.1 细胞活力分析的结果 | 第44-45页 |
2.4.2 结晶紫实验 | 第45页 |
2.4.3 流式细胞术的结果 | 第45-46页 |
2.4.4 ROS测定的结果 | 第46-47页 |
2.4.5 线粒体膜电位变化结果 | 第47-48页 |
2.4.6 Western blot分析 | 第48-51页 |
2.4.7 虫草素对HepG2异位肿瘤模型裸鼠的影响 | 第51-53页 |
2.5 本章小结 | 第53-55页 |
第三章 虫草素抗乳腺癌活性评价 | 第55-73页 |
3.0 引言 | 第55-56页 |
3.1 仪器与材料 | 第56-58页 |
3.1.1 主要仪器和设备 | 第56页 |
3.1.2 主要试剂 | 第56-57页 |
3.1.3 溶液配制 | 第57页 |
3.1.4 主要检测试剂盒 | 第57-58页 |
3.1.5 细胞株 | 第58页 |
3.1.6 实验动物 | 第58页 |
3.2 实验方法 | 第58-61页 |
3.2.1 细胞活力分析 | 第58页 |
3.2.2 结晶紫实验 | 第58-59页 |
3.2.3 LDH活性测定 | 第59页 |
3.2.4 细胞核形态分析 | 第59页 |
3.2.5 活性氧的测定 | 第59页 |
3.2.6 线粒体膜电位测定 | 第59-60页 |
3.2.7 Western blot实验 | 第60页 |
3.2.8 裸鼠体内实验 | 第60-61页 |
3.2.9 统计方法学分析 | 第61页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第61-70页 |
3.3.1 细胞活力检测结果 | 第61页 |
3.3.2 增殖抑制试验结果 | 第61-62页 |
3.3.3 LDH活性测定结果 | 第62-63页 |
3.3.4 细胞核形态分析结果 | 第63页 |
3.3.5 活性氧检测结果 | 第63-65页 |
3.3.6 线粒体膜电位变化结果 | 第65-66页 |
3.3.7 Western blot分析结果 | 第66-68页 |
3.3.8 虫草素对MCF-7 异位肿瘤模型裸鼠的影响 | 第68-70页 |
3.4 本章小结 | 第70-73页 |
第四章 虫草素脂质体制备、表征及药代动力学研究 | 第73-91页 |
4.1 引言 | 第73-74页 |
4.2 仪器与材料 | 第74-75页 |
4.2.1 主要仪器和设备 | 第74-75页 |
4.2.2 主要试剂 | 第75页 |
4.2.3 实验动物 | 第75页 |
4.3 实验方法 | 第75-81页 |
4.3.1 虫草素的体外扫描波长的选择 | 第75页 |
4.3.2 色谱条件 | 第75-76页 |
4.3.3 方法学考察 | 第76页 |
4.3.3.1 标准曲线的制备 | 第76页 |
4.3.3.2 精密度试验 | 第76页 |
4.3.3.3 稳定性试验 | 第76页 |
4.3.4 脂质体制备 | 第76-77页 |
4.3.4.1 脂质体制备 | 第76-77页 |
4.3.4.2 转铁蛋白脂质体(Tf-LPs-cordycepin)制备 | 第77页 |
4.3.4.3 荧光标记脂质体 | 第77页 |
4.3.5 脂质体的表征 | 第77页 |
4.3.5.1 形态学考察 | 第77页 |
4.3.5.2 粒径分布考察和电位考察 | 第77页 |
4.3.6 包封率考察 | 第77-78页 |
4.3.6.1 供试品溶液的制备 | 第77-78页 |
4.3.6.2 虫草素脂质体稳定性考察 | 第78页 |
4.3.7 载药脂质体体外释放 | 第78页 |
4.3.8 血浆样品配置 | 第78-79页 |
4.3.9 分析条件 | 第79页 |
4.3.9.1 质谱条件 | 第79页 |
4.3.9.2 液相条件 | 第79页 |
4.3.9.3 血浆样品处理 | 第79页 |
4.3.10 方法学验证 | 第79-80页 |
4.3.10.1 标准曲线的制备 | 第79页 |
4.3.10.2 专属性 | 第79-80页 |
4.3.10.3 定量下限 | 第80页 |
4.3.10.4 精密度、精密度试验 | 第80页 |
4.3.10.5 基质效应、回收率 | 第80页 |
4.3.10.6 稳定性试验 | 第80页 |
4.3.11 大鼠体内药代动力学研究 | 第80-81页 |
4.4 实验结果 | 第81-90页 |
4.4.1 标准曲线绘制结果 | 第81页 |
4.4.2 精密度试验结果 | 第81-82页 |
4.4.3 稳定性试验 | 第82页 |
4.4.4 转铁蛋白虫草素脂质体表征 | 第82-83页 |
4.4.5 包封率测定结果 | 第83-84页 |
4.4.6 载药脂质体体外释放 | 第84页 |
4.4.7 方法学结果 | 第84-88页 |
4.4.7.1 质谱条件优化 | 第84-85页 |
4.4.7.2 标准曲线 | 第85-86页 |
4.4.7.3 专属性、定量下限 | 第86页 |
4.4.7.4 准确度精密度 | 第86-87页 |
4.4.7.5 基质效应、回收率 | 第87-88页 |
4.4.7.6 稳定性试验结果 | 第88页 |
4.4.8 大鼠体内药代动力学研究 | 第88-90页 |
4.4.8.1 大鼠体内血药浓度 | 第88-90页 |
4.5 本章小结 | 第90-91页 |
第五章 虫草素脂质体及转铁蛋白脂质体抗肝癌活性评价 | 第91-121页 |
5.1 引言 | 第91页 |
5.2 仪器与材料 | 第91-94页 |
5.2.1 主要仪器和设备 | 第91-92页 |
5.2.2 主要试剂 | 第92-93页 |
5.2.3 细胞 | 第93页 |
5.2.4 实验动物 | 第93页 |
5.2.5 溶液配制 | 第93-94页 |
5.3 实验方法 | 第94-99页 |
5.3.1 体外评价 | 第94-98页 |
5.3.1.1 细胞培养 | 第94页 |
5.3.1.2 细胞活力检测 | 第94-95页 |
5.3.1.3 细胞内ROS的水平检测 | 第95-96页 |
5.3.1.4 线粒体膜电位检测 | 第96页 |
5.3.1.5 蛋白质印迹法 | 第96-97页 |
5.3.1.6 细胞摄取 | 第97-98页 |
5.3.1.6.1 激光共聚焦显微镜观察转染效果 | 第97页 |
5.3.1.6.2 细胞摄取能力检测 | 第97-98页 |
5.3.2 体内评价 | 第98-99页 |
5.3.2.1 裸鼠异位移植瘤模型建立及实验分组 | 第98页 |
5.3.2.2 体重记录及肿瘤体积测定 | 第98页 |
5.3.2.3 组织切片的制备及观察 | 第98-99页 |
5.3.3 统计方法学分析 | 第99页 |
5.4 实验结果与讨论 | 第99-119页 |
5.4.1 体外评价 | 第99-114页 |
5.4.1.1 细胞活力检测结果 | 第99-100页 |
5.4.1.2 细胞内ROS的水平检测结果 | 第100-103页 |
5.4.1.3 线粒体膜电位检测结果 | 第103-105页 |
5.4.1.4 凋亡及氧化应激相关蛋白表达结果 | 第105-110页 |
5.4.1.5 激光共聚焦显微镜观察转染效果结果 | 第110-111页 |
5.4.1.6 细胞摄取能力检测结果 | 第111-114页 |
5.4.2 体内评价 | 第114-119页 |
5.4.2.1 体重记录结果 | 第114-115页 |
5.4.2.2 肿瘤体积测量结果 | 第115-116页 |
5.4.2.3 小鼠肝脏和脾脏病理组织学观察结果 | 第116-119页 |
5.5 本章小结 | 第119-121页 |
第六章 虫草素脂质体及转铁蛋白脂质体抗乳腺癌活性评价 | 第121-145页 |
6.1 引言 | 第121页 |
6.2 仪器与试剂 | 第121-123页 |
6.2.1 仪器 | 第121-122页 |
6.2.2 材料与试剂 | 第122-123页 |
6.2.3 实验细胞株 | 第123页 |
6.2.4 实验动物 | 第123页 |
6.3 实验方法 | 第123-126页 |
6.3.1 体外评价 | 第123-125页 |
6.3.1.1 细胞活力检测实验 | 第123-124页 |
6.3.1.2 细胞内ROS水平 | 第124页 |
6.3.1.3 线粒体膜电位 | 第124页 |
6.3.1.4 Western blot实验 | 第124-125页 |
6.3.1.5 细胞摄取 | 第125页 |
6.3.2 体内评价 | 第125-126页 |
6.4 结果与讨论 | 第126-143页 |
6.4.1 体外评价 | 第126-138页 |
6.4.1.1 细胞活力检测结果 | 第126-127页 |
6.4.1.2 细胞内ROS水平 | 第127-130页 |
6.4.1.3 线粒体膜电位 | 第130页 |
6.4.1.4 Western blot分析 | 第130-134页 |
6.4.1.5 细胞摄取 | 第134-138页 |
6.4.2 体内评价 | 第138-143页 |
6.4.2.1 体重记录结果 | 第138-139页 |
6.4.2.2 肿瘤体积测定结果 | 第139-143页 |
6.5 本章小结 | 第143-145页 |
第七章 结论与展望 | 第145-149页 |
7.1 结论 | 第145-146页 |
7.2 展望 | 第146-149页 |
参考文献 | 第149-165页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第165-168页 |
致谢 | 第168页 |