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用VIGS技术研究若干豌豆花同源异型基因的功能

致谢第1-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-7页
目录第7-9页
1 文献综述第9-25页
   ·AP1(APETALA1)基因分子机制研究进展第9-17页
     ·引言第9页
     ·AP1作为一个花起始的协调因子起作用第9-10页
     ·AP1的上游调控机制第10-11页
     ·AP1的下游靶基因的识别第11-12页
     ·从抑制到激活:AP1相互作用蛋白的作用第12-14页
     ·AP1功能的保守性和创新点第14-15页
     ·展望第15-17页
   ·VIGS在同源基因保守区段共沉默上的研究进展第17-25页
     ·VIGS技术的原理第17-18页
     ·影响VIGS沉默效率的因素第18-20页
     ·VIGS技术在豌豆基因功能研究上的应用第20-22页
     ·花同源异型基因之间保守的相对性第22-24页
     ·展望第24-25页
2 材料和方法第25-37页
   ·实验材料第25-27页
     ·植物材料第25页
     ·菌株第25页
     ·质粒载体第25页
     ·常用耗材第25页
     ·引物序列第25-27页
   ·实验方法第27-37页
     ·植物材料的种植第27-28页
     ·植物总RNA提取第28-29页
     ·cDNA模板的制备第29页
     ·DNA聚合酶链式反应(PCR)第29-31页
     ·生物分析软件第31页
     ·VIGS实验第31-32页
     ·RNA原位杂交第32-37页
3 实验内容和结果第37-56页
   ·豌豆中APETALA1/FRUITFULL-like同源基因功能的研究第37-46页
     ·野生型JI992中PEAM4的沉默导致豌豆花分生组织属性和花器官属性的改变第37-42页
       ·PEAM4基因特异区段的PEAM4S的VIGS构建第37-38页
       ·PEAM4S沉默植株表型分析第38-40页
       ·VIGS导致野生型豌豆中PEAM4基因mRNA表达水平减弱,同时在此背景下PsSVP和PsSOC1a的表达量上调第40页
       ·PsSVP、PsSOC1a分别在JI992野生型和PEAM4S-VIGS背景下的原位杂交第40-42页
     ·PEAM4基因包含MADS区的保守区段PEAM4C的VIGS第42-44页
       ·PEAM4基因包含MADS区的保守区段PEAM4C的VIGS构建第42页
       ·PEAM4C沉默植株表型分析第42-43页
       ·在PEAM4C-VIGS背景下,PEAM4、PsSVP和PsSOC1a基因表达的变化第43-44页
     ·PsFUL基因保守区段的VIGS第44-46页
       ·PsFUL基因保守区段的VIGS构建第44页
       ·PsFUL沉默植株表型分析第44-46页
   ·豌豆中四个ABCE类MADS-box基因PEAM4,PsPI,PsAG,PsSEP1/2 MADS区的VIGS构建第46-56页
     ·PEAM4基因对应MADS区的VIGS第46-49页
       ·PEAM4基因对应MADS区的VIGS载体的构建第46页
       ·PEAM4-MADS沉默植株表型分析第46-48页
       ·PEAM4的MADS区的VIGS背景下,PEAM4表达量的检测第48-49页
     ·PsPI基因对应MADS区的VIGS第49-50页
       ·PsPI基因对应MADS区的VIGS载体的构建第49页
       ·PsPI-MADS沉默植株表型分析第49-50页
       ·PsPI的MADS区的VIGS背景下,PsPI表达量的检测第50页
     ·PsAG基因对应MADS区的VIGS第50-52页
       ·PsAG基因对应MADS区的VIGS载体的构建第50-51页
       ·PsAG MADS沉默植株表型分析第51页
       ·PsAG基因对应MADS区的VIGS背景下,PsAG表达量的检测第51-52页
     ·PsSEP1/2基因对应MADS区的VIGS第52-56页
       ·PsSEP1/2基因对应MADS区的VIGS载体的构建第52页
       ·PsSEP1/2-MADS沉默植株表型分析第52-54页
       ·PsSEP1/2的MADS区的VIGS背景下,PsSEP1/2表达量的检测第54-56页
4 小结第56-58页
   ·PEAM4-MADS的VIGS的构建和PsFUL保守区段的VIGS构建在株型上的相似性第56页
   ·PEAM4的VIGS的构建和PsSEP1/2的MADS区的VIGS构建的比较第56-58页
     ·不同点第56-57页
     ·相同点第57-58页
5 分析和讨论第58-61页
   ·对豌豆花发育过程中属于MADS-box基因的ABCE类基因的相对保守性分析第58-59页
   ·对ABCE类中的MADS-box基因的MADS区VIGS的有效性分析第59-60页
   ·关于豌豆中开花诱导的分子机制的探究第60-61页
参考文献第61-70页
附录第70-74页

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