中文摘要 | 第1-15页 |
英文摘要 | 第15-21页 |
前言 | 第21-29页 |
参考文献 | 第25-29页 |
第一部分 非小细胞肺癌组织CD47的表达及其临床意义 | 第29-43页 |
引言 | 第29页 |
材料和方法 | 第29-35页 |
1.研究对象 | 第29-30页 |
2.材料 | 第30-32页 |
·仪器 | 第30页 |
·试剂 | 第30-31页 |
·试剂配制 | 第31-32页 |
3.方法 | 第32-35页 |
·Western blot | 第32-34页 |
·免疫组织化学染色 | 第34-35页 |
·统计学分析 | 第35页 |
结果 | 第35-38页 |
1. CD47在NSCLC组织表达的Western blot检测 | 第35-36页 |
2.CD47在NSCLC患者表达的免疫组化染色 | 第36页 |
3.CD47表达与NSCLC患者临床病理特征的关系 | 第36-38页 |
讨论 | 第38-40页 |
小结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-43页 |
第二部分 CD47在NSCLC侵袭转移中的作用 | 第43-75页 |
引言 | 第43-44页 |
材料和方法 | 第44-59页 |
1.材料 | 第44-48页 |
·仪器 | 第44-45页 |
·细胞株 | 第45页 |
·试剂 | 第45-48页 |
·试剂配制 | 第48页 |
2.方法 | 第48-59页 |
·细胞培养 | 第48-50页 |
·West ern blot | 第50-51页 |
·Rea l-t im e P CR | 第51-53页 |
·细胞免疫荧光化学 | 第53页 |
·微流控芯片制作 | 第53-54页 |
·微流控芯片上细胞转移能力观察 | 第54页 |
·s i RN A下调CD47的表达 | 第54-55页 |
·pc DNA3.1 -3× Flag -CD47表达载体构建及转染 | 第55-57页 |
·噻唑兰(MTT)法检测细胞活性 | 第57-58页 |
·裸鼠皮下人肺癌移植瘤自发转移模型的建立 | 第58页 |
·裸鼠尾静脉肺癌转移模型的建立 | 第58页 |
·HE染色 | 第58-59页 |
·统计学分析 | 第59页 |
结果 | 第59-69页 |
1. NSCLC细胞株CD47表达水平检测 | 第59-60页 |
·w e s t e r n b l o t检测C D 47 在N S C L C细胞株的蛋白表达情况 | 第59页 |
·Rea l -t i m e P CR检测CD 47 在N SC LC细胞株的mRNA表达情况 | 第59-60页 |
·细胞免疫荧光NSCLC细胞株CD47表达水平检测 | 第60页 |
2. 验证细胞转移能力的微流控芯片模型构建 | 第60-62页 |
·微流控芯片转移模型的构建 | 第60-61页 |
·微流控芯片转移模型的细胞转移能力观察验证 | 第61-62页 |
3. 基于微流控芯片转移模型过表达或下调CD47蛋白表达后肺癌细胞侵袭转移能力变化的观察 | 第62-66页 |
·siRNA可以有效下调CD47蛋白表达 | 第62页 |
·下调CD47蛋白表达后细胞转移能力验证 | 第62-63页 |
·si RN A对细胞增殖能力的影响 | 第63-64页 |
·pcDNA3.1-3×Flag-CD47过表达CD47的验证 | 第64-65页 |
·CD 47 过表达后细胞转移能力验证 | 第65-66页 |
4.下调CD47表达抑制肺癌细胞的体内成瘤 | 第66-67页 |
5.下调CD47表达抑制肺癌体内转移侵袭能力 | 第67-69页 |
讨论 | 第69-72页 |
小结 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-75页 |
第三部分 CD47促进非小细胞肺癌转移机制的初步探讨 | 第75-94页 |
引言 | 第75页 |
材料和方法 | 第75-85页 |
1. 材料 | 第75-80页 |
·仪器 | 第75-76页 |
·细胞株 | 第76页 |
·N SCLC组织标本 | 第76-77页 |
·试剂 | 第77-79页 |
·试剂配制 | 第79-80页 |
2. 方法 | 第80-85页 |
·细胞培养 | 第80-81页 |
·Western blot | 第81-83页 |
·微流控芯片制作 | 第83页 |
·微流控芯片上细胞转移能力观察 | 第83页 |
·RNA干扰下调CD47或Cdc42表达 | 第83-84页 |
·C D 47 过表达质粒转染肺癌细胞株 | 第84页 |
·免疫组织化学染色 | 第84-85页 |
·统计学分析 | 第85页 |
结果 | 第85-88页 |
1. CD47和Cdc42在NSCLC细胞株中的表达 | 第85-86页 |
2. 非小细胞肺癌患者组织标本CD47和Cdc42表达 | 第86-87页 |
3.CD47介导Cdc42表达调控细胞转移能力 | 第87-88页 |
讨论 | 第88-91页 |
小结 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-94页 |
综述 | 第94-107页 |
参考文献 | 第101-107页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第107-108页 |
致谢 | 第108-109页 |