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CD47在非小细胞肺癌转移中的作用及相关机制研究

中文摘要第1-15页
英文摘要第15-21页
前言第21-29页
 参考文献第25-29页
第一部分 非小细胞肺癌组织CD47的表达及其临床意义第29-43页
 引言第29页
 材料和方法第29-35页
  1.研究对象第29-30页
  2.材料第30-32页
   ·仪器第30页
   ·试剂第30-31页
   ·试剂配制第31-32页
  3.方法第32-35页
   ·Western blot第32-34页
   ·免疫组织化学染色第34-35页
   ·统计学分析第35页
 结果第35-38页
  1. CD47在NSCLC组织表达的Western blot检测第35-36页
  2.CD47在NSCLC患者表达的免疫组化染色第36页
  3.CD47表达与NSCLC患者临床病理特征的关系第36-38页
 讨论第38-40页
 小结第40-41页
 参考文献第41-43页
第二部分 CD47在NSCLC侵袭转移中的作用第43-75页
 引言第43-44页
 材料和方法第44-59页
  1.材料第44-48页
   ·仪器第44-45页
   ·细胞株第45页
   ·试剂第45-48页
   ·试剂配制第48页
  2.方法第48-59页
   ·细胞培养第48-50页
   ·West ern blot第50-51页
   ·Rea l-t im e P CR第51-53页
   ·细胞免疫荧光化学第53页
   ·微流控芯片制作第53-54页
   ·微流控芯片上细胞转移能力观察第54页
   ·s i RN A下调CD47的表达第54-55页
   ·pc DNA3.1 -3× Flag -CD47表达载体构建及转染第55-57页
   ·噻唑兰(MTT)法检测细胞活性第57-58页
   ·裸鼠皮下人肺癌移植瘤自发转移模型的建立第58页
   ·裸鼠尾静脉肺癌转移模型的建立第58页
   ·HE染色第58-59页
   ·统计学分析第59页
 结果第59-69页
  1. NSCLC细胞株CD47表达水平检测第59-60页
   ·w e s t e r n b l o t检测C D 47 在N S C L C细胞株的蛋白表达情况第59页
   ·Rea l -t i m e P CR检测CD 47 在N SC LC细胞株的mRNA表达情况第59-60页
   ·细胞免疫荧光NSCLC细胞株CD47表达水平检测第60页
  2. 验证细胞转移能力的微流控芯片模型构建第60-62页
   ·微流控芯片转移模型的构建第60-61页
   ·微流控芯片转移模型的细胞转移能力观察验证第61-62页
  3. 基于微流控芯片转移模型过表达或下调CD47蛋白表达后肺癌细胞侵袭转移能力变化的观察第62-66页
   ·siRNA可以有效下调CD47蛋白表达第62页
   ·下调CD47蛋白表达后细胞转移能力验证第62-63页
   ·si RN A对细胞增殖能力的影响第63-64页
   ·pcDNA3.1-3×Flag-CD47过表达CD47的验证第64-65页
   ·CD 47 过表达后细胞转移能力验证第65-66页
  4.下调CD47表达抑制肺癌细胞的体内成瘤第66-67页
  5.下调CD47表达抑制肺癌体内转移侵袭能力第67-69页
 讨论第69-72页
 小结第72-73页
 参考文献第73-75页
第三部分 CD47促进非小细胞肺癌转移机制的初步探讨第75-94页
 引言第75页
 材料和方法第75-85页
  1. 材料第75-80页
   ·仪器第75-76页
   ·细胞株第76页
   ·N SCLC组织标本第76-77页
   ·试剂第77-79页
   ·试剂配制第79-80页
  2. 方法第80-85页
   ·细胞培养第80-81页
   ·Western blot第81-83页
   ·微流控芯片制作第83页
   ·微流控芯片上细胞转移能力观察第83页
   ·RNA干扰下调CD47或Cdc42表达第83-84页
   ·C D 47 过表达质粒转染肺癌细胞株第84页
   ·免疫组织化学染色第84-85页
   ·统计学分析第85页
 结果第85-88页
  1. CD47和Cdc42在NSCLC细胞株中的表达第85-86页
  2. 非小细胞肺癌患者组织标本CD47和Cdc42表达第86-87页
  3.CD47介导Cdc42表达调控细胞转移能力第87-88页
 讨论第88-91页
 小结第91-92页
 参考文献第92-94页
综述第94-107页
 参考文献第101-107页
攻读学位期间发表文章情况第107-108页
致谢第108-109页

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