摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略表 | 第12-14页 |
1 文献综述 | 第14-28页 |
·猪链球菌病 | 第14-15页 |
·溶血素促进S.suis感染 | 第15-16页 |
·猪链球菌菌毛基因簇和菌毛与S.suis致病关系。 | 第16-18页 |
·S.suis侵袭性酶类 | 第18-21页 |
·猪链球菌调控机制 | 第21-25页 |
·独立型转录因子 | 第21-22页 |
·双组分调控系统 | 第22-23页 |
·真核生物类似的丝氨酸/苏氨酸激酶与磷酸酶 | 第23页 |
·非编码调节RNA | 第23-25页 |
·基因组多样性 | 第25-26页 |
·基因岛和接合转移原件 | 第25-26页 |
·噬菌体 | 第26页 |
·猪链球菌的感染机制 | 第26-27页 |
·研究目的和意义 | 第27-28页 |
2 材料和方法 | 第28-46页 |
·试验材料 | 第28-31页 |
·菌种和质粒 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·主要仪器 | 第28-29页 |
·培养基和抗生素 | 第29页 |
·蛋白表达和纯化相关试剂 | 第29-30页 |
·SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western Blotting相关试剂 | 第30页 |
·ELISA相关试剂 | 第30-31页 |
·明胶酶谱及酶活测定相关试剂 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-46页 |
·菌株培养以及细胞株的传代 | 第31-32页 |
·构建表达载体以及重组蛋白的表达和纯化、酶活反应检测与相关指标测定以及体外促进炎症因子释放。 | 第32-44页 |
·以SC19 为背景菌株构建Abpb突变株 | 第44页 |
·SC19 与 Δabpb对表皮细胞系Hep-2 细胞的粘附实验 | 第44-45页 |
·人工感染小鼠 | 第45-46页 |
3 结果与分析 | 第46-65页 |
·生物信息学分析结果 | 第46-47页 |
·Abpb蛋白在原核表达系统的重组表达以及利用AKTA-FPLC系统和Ni-NTA树脂的纯化。 | 第47-49页 |
·Abpb重组蛋白蛋白酶特性的确立以及精氨酸肽酶特性的检测和蛋白酶酶活指标Vmax和Km的测定以及最适pH的检测。 | 第49-51页 |
·Abpb蛋白酶具有较高的免疫原性特性,能在小鼠模型上给予很好的被动攻毒保护效果。 | 第51-53页 |
·Abpb基因表达的亚细胞定位 | 第53-55页 |
·Abpb蛋白体外促进巨噬细胞释放炎性因子 | 第55-56页 |
·以SC19 为背景菌株构建Abpb基因突变株 | 第56-58页 |
·突变株△Abpb与野生菌SC19 毒力差异比较,突变株显示出致弱的毒力表型 | 第58-59页 |
·突变株表现出下降的对表皮细胞的粘附能力,和致弱的抗原代巨噬细胞的吞噬杀伤能力。 | 第59-62页 |
·突变株△Abpb和野生菌株SC19 体内共感染实验 | 第62-65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
5 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-81页 |
附录 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |