甘油醛-3-磷酸脱氢酶的原核表达及其单克隆抗体的制备
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-23页 |
| ·甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的应用进展 | 第11-15页 |
| ·GAPDH的介绍 | 第11页 |
| ·GAPDH的结构及作用 | 第11页 |
| ·GAPDH的用途 | 第11-14页 |
| ·GAPDH DNA修复的功能 | 第13页 |
| ·GAPDH作为内参的应用 | 第13页 |
| ·GAPDH调节蛋白质的表达 | 第13页 |
| ·GAPDH参与细胞凋亡 | 第13-14页 |
| ·GAPDH在农产品贮藏与加工及相关领域中的研究 | 第14-15页 |
| ·原核表达及重组蛋白纯化的技术 | 第15-16页 |
| ·原核表达技术 | 第15页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第15-16页 |
| ·单克隆抗体的研究进展 | 第16-22页 |
| ·杂交瘤技术制备单克隆抗体的原理及特点 | 第16-17页 |
| ·单克隆抗体研究进展 | 第17-18页 |
| ·鼠源性抗体 | 第17页 |
| ·人源化抗体 | 第17-18页 |
| ·人源性抗体 | 第18页 |
| ·单克隆抗体的应用现状 | 第18-20页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第20-21页 |
| ·小鼠免疫途径 | 第20页 |
| ·细胞融合 | 第20-21页 |
| ·单克隆抗体大量制备 | 第21页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第21页 |
| ·抗GAPDH单克隆抗体的应用 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的、意义及研究内容 | 第22-23页 |
| ·研究目的、意义 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| ·GAPDH的原核表达 | 第22页 |
| ·GAPDH单克隆抗体的制备 | 第22-23页 |
| 第二章 GAPDH的原核表达 | 第23-45页 |
| ·材料与方法 | 第23-37页 |
| ·材料 | 第23-29页 |
| ·主要菌种和细胞株 | 第23页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第23-25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要溶液 | 第26-29页 |
| ·方法 | 第29-37页 |
| ·PCR扩增GAPDH基因 | 第29-31页 |
| ·目的片段的克隆和阳性克隆子的筛选 | 第31-32页 |
| ·表达质粒的构建 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及活性鉴定 | 第33-36页 |
| ·GPADH蛋白的纯化和活性鉴定 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-43页 |
| ·GAPDH基因的克隆及序列分析 | 第37-39页 |
| ·PCR扩增GAPDH基因 | 第37-38页 |
| ·重组载体pMD18-T-GAPDH的构建及分析 | 第38页 |
| ·表达载体的构建及结果分析 | 第38-39页 |
| ·GAPDH的原核表达 | 第39-43页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·GAPDH重组蛋白表达方式鉴定及纯化 | 第40-43页 |
| ·讨论与小结 | 第43-45页 |
| 第三章 GAPDH单克隆抗体的制备 | 第45-61页 |
| ·材料与方法 | 第45-54页 |
| ·材料 | 第45-48页 |
| ·细胞株和实验动物 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第46-48页 |
| ·主要溶液 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-54页 |
| ·GAPDH重组蛋白免疫原性的检测 | 第48-50页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第50-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-58页 |
| ·GAPDH重组蛋白的免疫原性 | 第54页 |
| ·细胞融合检验 | 第54-55页 |
| ·间接ELISA筛选 | 第55页 |
| ·单克隆抗体的大量制备和纯化 | 第55-57页 |
| ·单克隆抗体浓度的测定 | 第57页 |
| ·间接ELISA检测单克隆抗体效价 | 第57-58页 |
| ·讨论与小结 | 第58-61页 |
| 第四章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录1 | 第67-68页 |
| 附录2 | 第68-69页 |
| 附录3 | 第69-70页 |
| 附录4 资助基金项目 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简历 | 第72-73页 |
| 在读期间科研学术成果目录 | 第73页 |
