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戊型肝炎病毒ORF2蛋白与肝组织相互作用蛋白的筛选及验证

主要中英文缩写词第1-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
前言第8-12页
   ·HEV 的流行病学第8-9页
   ·HEV 的分子生物学第9-10页
   ·HEV 与宿主细胞的相互作用第10-11页
   ·本研究的目的和内容第11-12页
实验材料、仪器和试剂第12-20页
   ·材料第12-16页
     ·酵母双杂交系统第12-15页
     ·化学发光免疫共沉淀系统第15页
     ·细胞株第15页
     ·经典免疫共沉淀与 pull-down第15-16页
   ·仪器第16-17页
   ·试剂及配制第17-20页
     ·试剂第17-18页
     ·试剂配制第18-20页
实验方法第20-33页
   ·酵母双杂交实验第20-25页
     ·分子克隆实验第20-21页
     ·酵母双杂交筛选压力的确定第21-22页
       ·酵母双杂交筛选人肝脏 cDNA 文库第22-23页
     ·阳性克隆的确认以及捕获质粒的提取第23-25页
     ·酵母双杂交共转化实验第25页
     ·pull-down 及经典免疫共沉淀第25-33页
     ·细胞 cDNA 文库的建立第25-26页
     ·pCMV-prey 质粒的构建第26-28页
     ·pull-down 或免疫共沉淀第28-31页
       ·western blotting 检测第31-33页
结果第33-54页
 第一部分 HEV 感染相关蛋白的研究第33-46页
   ·酵母双杂交筛选结果第33-41页
     ·酵母双杂交筛选压力的确定第33-34页
     ·酵母双杂交筛选人肝脏 cDNA 文库实验结果第34-36页
     ·酵母共转染验证酵母双杂交阳性克隆第36-37页
     ·蛋白的亚细胞定位及功能聚类分析第37-41页
   ·人肝脏文库中与 1 型和 4 型 ORF2 相互作用蛋白的验证第41-43页
     ·pull-down 实验捕获质粒 pCMV-Myc-prey 的构建第41页
     ·人肝脏文库中与 1 型和 4 型 ORF2 相互作用蛋白的 pull-down 验证第41-43页
   ·TMEM134 的免疫共沉淀验证第43-45页
  小结第45-46页
 第二部分 HEV 种属限制性相关蛋白的研究第46-54页
   ·酵母双杂交文库的筛选第46-47页
   ·猪肝脏文库中仅与 4 型 ORF2 相互作用蛋白的验证第47-49页
     ·pull-down 实验捕获质粒的构建第47页
     ·HEV 4 型 ORF2 与猪蛋白的 pull-down 分析第47页
     ·HEV 1 型 ORF2 与猪蛋白的 pull-down 分析第47-49页
   ·人 ATL2、猪 ATL2 与 1 型、4 型 ORF2 的 pull-down 分析第49-50页
   ·不同种属 ASGR2 与 ORF2 相互作用的分析第50-53页
  小结第53-54页
讨论第54-59页
参考文献第59-63页
论文综述第63-73页
 参考文献第68-73页
致谢第73-74页
附录第74-77页

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