| 摘要 | 第1-6页 |
| Summary | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| Ⅰ 引言 | 第14-16页 |
| Ⅱ 文献综述 | 第16-26页 |
| 1 马铃薯产业概述 | 第16-17页 |
| ·中国马铃薯产业的发展情况 | 第16页 |
| ·中国马铃薯产业的发展遇到的问题 | 第16-17页 |
| 2 马铃薯病毒病检测 | 第17-20页 |
| ·马铃薯病毒 | 第17-18页 |
| ·常见马铃薯病毒种类 | 第18-20页 |
| ·马铃薯 X 病毒 | 第18页 |
| ·马铃薯 Y 病毒 | 第18-19页 |
| ·马铃薯 S 病毒 | 第19页 |
| ·马铃薯卷叶病毒 | 第19-20页 |
| 3 马铃薯病毒的检测方法 | 第20-26页 |
| ·电子显微镜检测 | 第20页 |
| ·指示植物法检测 | 第20-21页 |
| ·免疫学方法检测 | 第21-22页 |
| ·酶联免疫检测法检测 | 第21-22页 |
| ·指示试纸检测法 | 第22页 |
| ·免疫胶体金层析技术 | 第22页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第22-26页 |
| ·核酸斑点杂交技术 | 第22-23页 |
| ·基因芯片技术 | 第23页 |
| ·环介导恒温扩增技术 | 第23-24页 |
| ·反转录聚合酶链式反应检测技术 | 第24-26页 |
| Ⅲ 研究的目的及意义 | 第26-27页 |
| Ⅳ 研究技术路线 | 第27-28页 |
| Ⅴ 材料与方法 | 第28-38页 |
| 1 材料 | 第28-29页 |
| ·供试材料 | 第28页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·IPTG 和 X-Gal | 第29页 |
| 2 方法 | 第29-38页 |
| ·感染病毒的马铃薯叶片总 RNA 提取和完整性检测 | 第29页 |
| ·cDNA 的合成 | 第29-30页 |
| ·CP 全长基因引物的设计 | 第30-32页 |
| ·马铃薯 X 病毒 CP 基因扩增与测序 | 第30-31页 |
| ·马铃薯 Y 病毒 CP 基因扩增与测序 | 第31页 |
| ·马铃薯 S 病毒 CP 基因扩增与测序 | 第31-32页 |
| ·马铃薯卷叶病毒 CP 基因扩增与测序 | 第32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第33页 |
| ·大肠杆菌质粒 DNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·阳性对照的制备 | 第34页 |
| ·病毒 CP 基因保守区域的筛选 | 第34页 |
| ·单重 RT-PCR 扩增 CP 基因保守序列 | 第34-35页 |
| ·多重 RT-PCR 体系的建立 | 第35页 |
| ·多重 RT-PCR 反应体系优化 | 第35-37页 |
| ·dNTP 浓度优化 | 第36页 |
| ·引物的优化 | 第36页 |
| ·辅助剂 | 第36-37页 |
| ·反应条件的优化 | 第37页 |
| ·多重 RT-PCR 特异性检测 | 第37页 |
| ·马铃薯病毒检测的多重 RT-PCR 方法应用 | 第37-38页 |
| Ⅵ 结果与分析 | 第38-60页 |
| 1 RNA 提取结果 | 第38页 |
| 2 四种病毒 CP 基因全长克隆和测序结果 | 第38-47页 |
| ·PVX CP 质粒酶切结果 | 第38-40页 |
| ·PVX CP 基因测序结果比对 | 第40-41页 |
| ·PVY CP 质粒酶切结果 | 第41-42页 |
| ·PVY CP 基因测序结果比对 | 第42页 |
| ·PVS CP 质粒酶切结果 | 第42-44页 |
| ·PVS CP 基因测序结果比对 | 第44-45页 |
| ·PLRV CP 质粒酶切结果 | 第45-46页 |
| ·PLRV CP 基因测序结果比对 | 第46-47页 |
| 3 CP 基因保守区域的筛选 | 第47-49页 |
| ·马铃薯 Y 病毒 CP 基因保守区域的筛选 | 第47页 |
| ·马铃薯 X 病毒 CP 基因保守区域的筛选 | 第47页 |
| ·马铃薯 S 病毒 CP 基因保守区域的筛选 | 第47-48页 |
| ·马铃薯卷叶病毒 CP 基因保守区域的筛选 | 第48-49页 |
| 4 保守序列引物设计 | 第49-53页 |
| 5 四种马铃薯病毒保守序列的扩增结果 | 第53-54页 |
| 6 多重 PCR 检测 | 第54-57页 |
| ·dNTP 浓度优化 | 第54-55页 |
| ·多重 RT-PCR 反应引物优化 | 第55页 |
| ·辅助剂 | 第55-56页 |
| ·多重 RT-PCR 反应条件优化 | 第56-57页 |
| 7 多重 RT-PCR 检测体系特异性检测 | 第57页 |
| 8 田间样品的检测 | 第57-60页 |
| Ⅶ 讨论与展望 | 第60-62页 |
| 1 马铃薯病毒多重 RT-PCR 检测优点 | 第60页 |
| 2 多重 PCR 引物的设计与条件优化 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70-71页 |
| 导师简介 | 第71-72页 |