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二斑叶螨对甲氰菊酯抗性的分子检测及田间抗性监测技术研究

摘要第1-4页
Summary第4-11页
前言第11-12页
第一章 文献综述第12-23页
   ·二斑叶螨的研究概况第12-17页
     ·二斑叶螨抗药性的发展第12-14页
     ·二斑叶螨对拟除虫菊酯类药剂的抗性机理第14-17页
       ·靶标抗性机理第14-15页
       ·代谢抗性机理第15-17页
   ·害螨(虫)抗性分子监测第17-20页
     ·生物测定检测法第17-18页
     ·限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)第18页
     ·专一性等位基因 PCR 扩增(PASA)第18-19页
     ·单链构型多态性分析(SSCP)第19页
     ·实时荧光定量 PCR 技术(qRT-PCR)第19-20页
   ·本文研究目的意义及内容第20-22页
     ·研究目的与意义第20-21页
     ·研究内容第21-22页
   ·本文研究技术路线第22-23页
第二章 二斑叶螨对甲氰菊酯抗性突变检测及分子监测技术研究第23-33页
   ·材料与方法第23-29页
     ·试验材料第23-25页
       ·供试二斑叶螨第23-24页
       ·供试药剂及试剂第24页
       ·供试仪器第24-25页
     ·试验方法第25-29页
       ·总 RNA 提取第25-26页
       ·第一链 cDNA 的合成第26页
       ·引物设计第26-27页
       ·二斑叶螨抗性监测体系建立第27-29页
   ·结果与分析第29-31页
     ·二斑叶螨 VGSCs 基因片段测序结果第29-30页
     ·二斑叶螨 PCR-RFLP 检测结果第30-31页
       ·A1215D 突变位点的 PCR-RFLP 检测第30-31页
       ·F1538I 突变位点的 PCR-RFLP 检测第31页
   ·小结与讨论第31-33页
第三章 抗性分子监测技术对田间二斑叶螨不同种群对菊酯类药剂抗性监测第33-39页
   ·材料与方法第33-34页
     ·试验材料第33-34页
       ·供试二斑叶螨第33-34页
       ·供试药剂及试剂第34页
       ·供试仪器第34页
     ·试验方法第34页
       ·总 RNA 提取第34页
       ·第一链 cDNA 的合成第34页
       ·引物设计第34页
       ·田间二斑叶螨的抗性监测第34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·二斑叶螨 VGSCs 基因片段扩增及测序第34-36页
       ·突变位点区域片段扩增第34-35页
       ·VGSCs 基因 PCR 产物测序结果第35-36页
     ·二斑叶螨 VGSCs 基因突变 PCR-RFLP 检测第36-37页
       ·A1215D 突变位点的 PCR-RFLP 检测第36页
       ·A1215D 突变位点的 PCR-RFLP 检测第36-37页
   ·小结与讨论第37-39页
第四章 田间二斑叶螨抗甲氰菊酯种群解毒酶基因表达分析第39-46页
   ·材料与方法第39-42页
     ·试验材料第39-40页
       ·供试二斑叶螨第39页
       ·供试试剂第39-40页
       ·供试仪器第40页
     ·试验方法第40-42页
       ·总 RNA 提取第40页
       ·第一链 cDNA 的合成第40页
       ·相对定量表达基因引物的设计第40-41页
       ·qRT-PCR 方法第41-42页
       ·数据分析第42页
   ·结果与分析第42-44页
     ·不同种群 GSTs 基因相对表达量的变化第42-43页
     ·不同种群 P450s 基因相对表达量的变化第43页
     ·不同种群 CarEs 基因相对表达量的变化第43-44页
   ·小结与讨论第44-46页
第五章 增效剂对田间二斑叶螨抗甲氰菊酯种群的增效作用第46-52页
   ·材料与方法第46-47页
     ·试验材料第46页
       ·供试二斑叶螨第46页
       ·供试药剂第46页
     ·试验方法第46-47页
       ·二斑叶螨不同种群毒力测定方法第47页
       ·增效剂的增效作用测定方法第47页
       ·数据处理第47页
   ·结果与分析第47-50页
     ·二斑叶螨不同种群抗性倍数测定结果第47-48页
     ·3种增效剂的增效作用测定结果第48-50页
   ·小结与讨论第50-52页
第六章 田间二斑叶螨抗甲氰菊酯种群解毒酶活性分析第52-63页
   ·材料与方法第52-59页
     ·试验材料第52-54页
       ·供试二斑叶螨第52页
       ·供试药剂及试剂第52-53页
       ·供试仪器第53-54页
     ·试验方法第54-59页
       ·蛋白质浓度测定第54-55页
       ·GSTs 活性的测定第55-56页
       ·MFOs 活性的测定第56-58页
       ·CarEs 活性的测定第58-59页
   ·结果与分析第59-61页
     ·蛋白质、对硝基苯酚以及α-萘酚标准曲线第59页
     ·二斑叶螨不同种群 GSTs、MFOs 以及 CarEs 活性的测定结果第59-61页
       ·二斑叶螨不同种群 GSTs 活性比较第59-60页
       ·二斑叶螨不同种群 MFOs 活性比较第60-61页
       ·二斑叶螨不同种群 CarEs 活性比较第61页
   ·小结与讨论第61-63页
第七章 主要结论、存在问题及创新点第63-66页
   ·主要结论与讨论第63-64页
     ·室内二斑叶螨 Fe-R 种群抗性突变检测及田间监测方法建立第63页
     ·田间二斑叶螨不同种群抗性监测第63页
     ·田间二斑叶螨不同种群解毒酶基因表达水平变化分析第63页
     ·田间二斑叶螨不同种群对甲氰菊酯的抗性及增效剂的增效作用第63-64页
     ·田间二斑叶螨不同种群主要解毒酶活性变化分析第64页
   ·存在问题第64-65页
   ·创新点第65-66页
参考文献第66-77页
致谢第77-78页
个人简介第78-79页
导师简介第79-80页

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