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雷竹14-3-3基因家族克隆和功能分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1 文献综述第9-19页
   ·成花诱导基因的研究进展第9-10页
   ·14-3-3 基因的研究进展第10-16页
     ·14-3-3 蛋白的概述第10页
     ·14-3-3 蛋白的结构第10-11页
     ·14-3-3 蛋白的调控机制第11-12页
     ·14-3-3 蛋白在植物中的主要功能第12-16页
       ·14-3-3 蛋白与成花第12-13页
       ·14-3-3 蛋白调节植物 H+-ATP 酶的活性第13页
       ·14-3-3 蛋白调节氮同化途径中的关键酶第13-14页
       ·14-3-3 蛋白与碳水化合物代谢中的酶相互作用第14页
       ·14-3-3 蛋白与信号通路蛋白相互作用第14-15页
       ·14-3-3 蛋白对转录的调控第15-16页
       ·14-3-3 蛋白对胁迫应答第16页
   ·竹类植物开花基因的研究进展第16-17页
   ·研究的目的和意义第17-19页
2 材料与方法第19-34页
   ·实验材料第19页
   ·实验方法第19-34页
     ·雷竹总 DNA 的提取第19页
     ·雷竹总 RNA 的提取第19-20页
     ·反转录第20页
     ·目的片段的回收第20-21页
     ·质粒的提取第21-22页
     ·连接第22页
     ·感受态的制备第22-23页
       ·大肠杆菌感受态的制备第22页
       ·农杆菌(GV3101)热激感受态细胞的制备第22-23页
       ·酵母感受态的制备第23页
     ·转化第23-24页
       ·大肠杆菌的转化(CaCl2)第23-24页
       ·转化农杆菌第24页
       ·酵母菌种的转化第24页
     ·菌液 PCR 检测及测序第24-25页
     ·引物设计第25-27页
     ·雷竹 14-3-3 基因组全长序列的获得第27页
     ·雷竹 14-3-3cDNA 全长序列的获得第27-28页
     ·生物信息学分析第28页
     ·14-3-3 基因的表达分析第28页
     ·PvGF14c 亚细胞定位第28-30页
       ·亚细胞载体的构建第28-29页
       ·洋葱表皮细胞细胞的制备第29页
       ·基因枪轰击第29-30页
       ·荧光显微镜观察第30页
     ·酵母双杂交第30-31页
       ·酵母表达载体的构建第30-31页
       ·酵母双杂交对照组第31页
     ·植物过表达载体的构建第31-32页
     ·拟南芥遗传转化及其转基因植株纯合子的筛选第32-34页
       ·拟南芥的种植第32页
       ·拟南芥的遗传转化第32页
       ·转基因植株的筛选及鉴定第32-33页
       ·筛选植株的 PCR 鉴定第33页
       ·转基因植株纯系的获得第33-34页
3 结果与分析第34-48页
   ·雷竹基因组 DNA 与总 RNA 提取第34页
   ·雷竹 14-3-3 同源基因的克隆第34-38页
   ·生物信息学分析第38-40页
     ·雷竹 14-3-3 蛋白的序列及结构分析第38-39页
     ·雷竹 14-3-3 蛋白进化树分析第39-40页
   ·雷竹 14-3-3 基因的表达特性分析第40-42页
     ·昼夜节律表达分析第40页
     ·开花前后表达分析第40-41页
     ·组织特异性表达检测第41-42页
   ·酵母双杂交实验第42页
   ·PvGF14c 的亚细胞定位第42-43页
   ·PvGF14b、 PvGF14c、PvGF14e、 PvGF14f 基因转化拟南芥第43-48页
4 结论第48-49页
5 讨论第49-50页
展望第50-51页
参考文献第51-57页
附录第57-60页
个人简历第60页
在校期间发表论文情况第60-61页
致谢第61页

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