英文縮略表 | 第1-5页 |
符号说明 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-23页 |
·WRKY 转录因子的结构特点及分类 | 第12-15页 |
·WRKY 结构域 | 第12-14页 |
·WRKY 域和 W-box | 第14-15页 |
·WRKY 蛋白的分子生物学功能 | 第15-20页 |
·WRKY 转录因子调控植物生物胁迫应答 | 第16-17页 |
·WRKY 转录因子调控植物非生物胁迫应答 | 第17-19页 |
·WRKY 转录因子在植物形态建成及生长发育中的作用 | 第19页 |
·WRKY 转录因子在植物代谢中的调节作用 | 第19-20页 |
·WRKY 转录因子调控植物逆境反映的机理 | 第20-23页 |
·WRKY 转录因子的自调控 | 第20页 |
·WRKY 转录因子参与 MAPK 信号级联途径 | 第20-21页 |
·WRKY 转录因子参与激素信号转导途径 | 第21-22页 |
·其他调控机制 | 第22-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23页 |
2 材料与方法 | 第23-35页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·植物材料 | 第23页 |
·克隆菌株及质粒载体 | 第23-24页 |
·生化试剂 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·引物的设计与合成 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-35页 |
·目的基因的克隆 | 第24-29页 |
·总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
·反转录第一链 cDNA 的合成 | 第26页 |
·TaWRKY 基因的 cDNA PCR 扩增 | 第26-27页 |
·扩增片段的凝胶回收 | 第27-28页 |
·回收目的片段产物与 pMD18-T simple 载体连接 | 第28页 |
·连接转化方法 | 第28页 |
·PCR 鉴定重组子方法 | 第28页 |
·序列测定 | 第28页 |
·TaWRKY 基因的荧光定量表达分析 | 第28-29页 |
·表达载体的构建 | 第29-31页 |
·质粒小量提取(吸附柱法) | 第30页 |
·目的基因片段、载体片段酶切和产物回收 | 第30-31页 |
·基因枪转化 | 第31-33页 |
·小麦幼胚灭菌方法 | 第31-32页 |
·基因枪转化 | 第32-33页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第33-34页 |
·植物基因组 DNA 提取方法(SDS 法) | 第33页 |
·检测所用 PCR 体系与程序 | 第33-34页 |
·转基因植株的 RT-PCR 检测 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-43页 |
·小麦 TaWRKY 基因的克隆 | 第35-39页 |
·TaWRKY 基因的 cDNA 克隆 | 第35页 |
·TaWRKY 基因编码的氨基酸序列分析 | 第35-38页 |
·小麦 TaWRKY 基因的实时定量分析 | 第38-39页 |
·小麦 TaWRKY 基因的表达载体的构建 | 第39-40页 |
·小麦 TaWRKY 基因克隆载体 pMD18-WRKY 的构建 | 第39页 |
·小麦 TaWRKY 基因表达载体 pUbi-WRKY 的构建 | 第39-40页 |
·基因枪介导的小麦 TaWRKY 基因的小麦遗传转化 | 第40-42页 |
·转基因植株的筛选鉴定 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
·WRKY 转录因子的分类及其功能 | 第43-44页 |
·小麦的遗传转化 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
附录 | 第55-58页 |
致谢 | 第58页 |