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小麦TaWRKY基因的克隆及遗传转化

英文縮略表第1-5页
符号说明第5-9页
中文摘要第9-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-23页
   ·WRKY 转录因子的结构特点及分类第12-15页
     ·WRKY 结构域第12-14页
     ·WRKY 域和 W-box第14-15页
   ·WRKY 蛋白的分子生物学功能第15-20页
     ·WRKY 转录因子调控植物生物胁迫应答第16-17页
     ·WRKY 转录因子调控植物非生物胁迫应答第17-19页
     ·WRKY 转录因子在植物形态建成及生长发育中的作用第19页
     ·WRKY 转录因子在植物代谢中的调节作用第19-20页
   ·WRKY 转录因子调控植物逆境反映的机理第20-23页
     ·WRKY 转录因子的自调控第20页
     ·WRKY 转录因子参与 MAPK 信号级联途径第20-21页
     ·WRKY 转录因子参与激素信号转导途径第21-22页
     ·其他调控机制第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23页
2 材料与方法第23-35页
   ·实验材料第23-24页
     ·植物材料第23页
     ·克隆菌株及质粒载体第23-24页
     ·生化试剂第24页
     ·主要仪器设备第24页
     ·引物的设计与合成第24页
   ·实验方法第24-35页
     ·目的基因的克隆第24-29页
       ·总 RNA 的提取第25-26页
       ·反转录第一链 cDNA 的合成第26页
       ·TaWRKY 基因的 cDNA PCR 扩增第26-27页
       ·扩增片段的凝胶回收第27-28页
       ·回收目的片段产物与 pMD18-T simple 载体连接第28页
       ·连接转化方法第28页
       ·PCR 鉴定重组子方法第28页
       ·序列测定第28页
       ·TaWRKY 基因的荧光定量表达分析第28-29页
     ·表达载体的构建第29-31页
       ·质粒小量提取(吸附柱法)第30页
       ·目的基因片段、载体片段酶切和产物回收第30-31页
     ·基因枪转化第31-33页
       ·小麦幼胚灭菌方法第31-32页
       ·基因枪转化第32-33页
     ·转基因植株的 PCR 检测第33-34页
       ·植物基因组 DNA 提取方法(SDS 法)第33页
       ·检测所用 PCR 体系与程序第33-34页
     ·转基因植株的 RT-PCR 检测第34-35页
3 结果与分析第35-43页
   ·小麦 TaWRKY 基因的克隆第35-39页
     ·TaWRKY 基因的 cDNA 克隆第35页
     ·TaWRKY 基因编码的氨基酸序列分析第35-38页
     ·小麦 TaWRKY 基因的实时定量分析第38-39页
   ·小麦 TaWRKY 基因的表达载体的构建第39-40页
     ·小麦 TaWRKY 基因克隆载体 pMD18-WRKY 的构建第39页
     ·小麦 TaWRKY 基因表达载体 pUbi-WRKY 的构建第39-40页
   ·基因枪介导的小麦 TaWRKY 基因的小麦遗传转化第40-42页
   ·转基因植株的筛选鉴定第42-43页
4 讨论第43-46页
   ·WRKY 转录因子的分类及其功能第43-44页
   ·小麦的遗传转化第44-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-55页
附录第55-58页
致谢第58页

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