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茶树MEP途径中HDS与HDR基因的cDNA全长克隆、功能分析与表达特征研究

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
1 文献综述第12-20页
   ·植物与害虫相互作用研究进展第12-14页
     ·植物对害虫的防御体系第12-13页
     ·参与植物害虫防御的挥发性化合物第13-14页
   ·萜类化合物生物合成途径的相关研究进展第14-17页
     ·萜类化合物生物合成途径第15页
     ·MVA 途径第15-16页
     ·MEP 途径第16-17页
   ·HDS 与 HDR 研究进展第17-20页
     ·HDS第17-18页
     ·HDR第18-20页
2 引言第20-22页
   ·研究意义与目的第20-21页
   ·研究内容第21页
   ·技术路线第21-22页
3 材料与方法第22-30页
   ·试验材料与处理第22-23页
     ·实验材料第22页
     ·试验处理第22-23页
   ·主要试剂与配方第23页
   ·方法第23-30页
     ·处理组与对照组茶树叶片总 RNA 提取第23页
     ·RNA 的检测第23-24页
     ·PCR 扩增产物的纯化回收和克隆第24页
     ·cDNA 第一链的合成第24页
     ·CsHDS 与 CsHDR 的 cDNA 全长克隆第24-26页
     ·CsHDS 与 CsHDR 的生物信息学分析第26页
     ·CsHDR 的真核表达载体的构建第26-27页
     ·拟南芥 HDR 突变体(SALK-017803C)的种植第27-28页
     ·转基因烟草的获得第28页
     ·CsHDS,CsHDR 表达特征的 qRT-PCR 分析第28-30页
4 结果与分析第30-48页
   ·CsHDS 与 CsHDR 的全长 cDNA 克隆与序列分析第30-38页
     ·CsHDS 与 CsHDR 的 3’-RACE 克隆第30页
     ·CsHDS 与 CsHDR 的 5’-RACE 克隆第30-31页
     ·CsHDS 与 CsHDR 的全长 cDNA 验证第31页
     ·CsHDS 与 CsHDR 的序列分析第31-34页
     ·CsHDS 与 CsHDR 序列的同源性比对及进化树分析第34-38页
   ·CsHDR 真核表达载体的构建第38-40页
     ·CsHDR 的 ORF 扩增第38-39页
     ·重组体表达载体的双酶切验证第39页
     ·表达载体转化到农杆菌的菌落 PCR 鉴定第39-40页
   ·拟南芥 HDR 突变体的种植与农杆菌转化烟草第40-41页
     ·拟南芥 HDR 突变体的种植第40-41页
     ·农杆菌转化烟草第41页
   ·CsHDS 与 CsHDR 的表达特征分析第41-48页
     ·实时荧光定量 PCR 标准曲线的确定第41-42页
     ·CsHDS 与 CsHDR 的组织特异性表达分析第42-43页
     ·茶尺蠖取食诱导 CsHDS 与 CsHDR 的表达特征分析第43-44页
     ·机械损伤处理诱导 CsHDS 与 CsHDR 的表达特征分析第44页
     ·茶尺蠖口腔分泌液处理诱导 CsHDS 与 CsHDR 的表达特征分析第44-45页
     ·MeJA 处理对 CsHDS 与 CsHDR 表达的影响第45-46页
     ·SA,ABA 处理对 CsHDS 与 CsHDR 表达的影响第46-47页
     ·化学杀虫剂吡虫啉处理对 CsHDS 与 CsHDR 表达的影响第47-48页
5 讨论第48-52页
   ·CsHDS 与 CsHDR 的结构特征与进化分类第48-49页
   ·CsHDS 与 CsHDR 的表达特征分析第49-51页
   ·CsHDR 的功能验证第51-52页
6 结论第52-53页
参考文献第53-59页
附录 英文缩写词汇表第59-60页
致谢第60-61页
作者简介第61页

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