| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 1 前言 | 第16-27页 |
| ·研究背景 | 第16-24页 |
| ·喹赛多药理与毒理作用机制研究进展 | 第16-22页 |
| ·细胞模型用于药物筛选的研究进展 | 第22-24页 |
| ·研究内容 | 第24-25页 |
| ·研究思路 | 第25-26页 |
| ·研究意义 | 第26-27页 |
| 2 材料和方法 | 第27-44页 |
| ·细胞株 | 第27页 |
| ·药品和试剂 | 第27-30页 |
| ·主要仪器和设备 | 第30-31页 |
| ·溶液配制 | 第31-33页 |
| ·细胞的复苏、传代和冻存 | 第33-34页 |
| ·总RNA的提取 | 第34页 |
| ·总RNA纯度及完整性的检测 | 第34页 |
| ·反转录反应 | 第34-35页 |
| ·实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平 | 第35-37页 |
| ·Western Blot实验 | 第37-40页 |
| ·细胞蛋白提取及蛋白浓度测定 | 第37页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第37-39页 |
| ·Western blot | 第39-40页 |
| ·细胞活力的检测 | 第40-43页 |
| ·MTT法检测喹嗯啉类代谢物对L02细胞的活力影响 | 第40-41页 |
| ·乳酸脱氢酶(LDH)释放测定 | 第41-42页 |
| ·细胞内自由基(ROS)释放测定 | 第42页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第42-43页 |
| ·统计学分析 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-60页 |
| ·总RNA质量 | 第44页 |
| ·喹赛多及其代谢物对EGF基因表达的时效量效关系 | 第44-47页 |
| ·喹赛多对EGF基因表达的时效量效关系分析 | 第44-45页 |
| ·喹赛多的主要代谢物对EGF mRNA表达的影响 | 第45-46页 |
| ·PI3K-Akt通路对EGF表达的调控 | 第46-47页 |
| ·2μM喹赛多与细胞孵育后对ROS释放的影响 | 第47-48页 |
| ·2gM喹赛多对FOXO1和P53 mRNA和蛋白表达的影响 | 第48-50页 |
| ·2gM喹赛多对cyclin D1表达的影响 | 第50-51页 |
| ·喹赛多及其代谢物对L02细胞剂量及时间依赖性毒性作用 | 第51-52页 |
| ·喹嗯啉类代谢物对L02细胞中LDH释放的影响 | 第52-53页 |
| ·喹赛多及其代谢物对ROS释放的影响 | 第53-54页 |
| ·100μM喹赛多对FOXO1和P53表达的影响 | 第54-57页 |
| ·喹赛多与EGF和FOXO1及p53表达的量效关系 | 第57-58页 |
| ·100MM喹赛多对细胞凋亡的影响 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-67页 |
| ·喹赛多及其代谢物药理与毒理活性大小 | 第60页 |
| ·喹赛多促进ROS释放的时效量效及与Akt激活间的关系 | 第60-64页 |
| ·P53表达的量效关系以及p53表达和Akt激活间的关系 | 第64-65页 |
| ·FOXO1的量效关系以及FOXO1与Akt激活之间的关系 | 第65-66页 |
| ·喹赛多的药理与毒理作用机理 | 第66-67页 |
| 5 全文总结 | 第67-68页 |
| 6 文献综述 | 第68-79页 |
| 参考文献 | 第79-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 附录 | 第94-100页 |
| 附录Ⅰ---研究生简介 | 第94页 |
| 附录Ⅱ--实时荧光PCR各基因扩增产物的溶解曲线分析结果 | 第94-95页 |
| 附录Ⅲ-实验过程中细胞培养的步骤 | 第95-96页 |
| 附录Ⅳ-实验过程中RNA的提取步骤 | 第96-97页 |
| 附录Ⅴ-BCA标曲的测定 | 第97-98页 |
| 对各答辩委员的答复书 | 第98-100页 |
