| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 縮略语表 | 第15-18页 |
| 1 前言 | 第18-24页 |
| ·立题依据 | 第18页 |
| ·国内外研究现状与发展趋势 | 第18-22页 |
| ·T-2毒素的化学组成及危害 | 第18-20页 |
| ·单端孢毒素抑制生长的机理 | 第20-22页 |
| ·T-2毒素毒性机制的研究方法 | 第22页 |
| ·目的意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-46页 |
| ·细胞株 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·主要溶液的配制 | 第26-29页 |
| ·细胞培养及冻存 | 第29页 |
| ·MTT筛选对GH3细胞毒性最大的单端孢毒素 | 第29-30页 |
| ·毒素作用合适浓度和时间测定(ELISA方法检测生长激素浓度) | 第30-31页 |
| ·待测样本准备 | 第30页 |
| ·操作步骤 | 第30-31页 |
| ·毒素作用差异基因的检测(基因芯片) | 第31-38页 |
| ·样品RNA的抽提(TRIZOL法) | 第31-33页 |
| ·cDNA第一链和第二链一步法合成 | 第33页 |
| ·荧光标记cRNA合成 | 第33-34页 |
| ·荧光探针纯化 | 第34页 |
| ·芯片杂交 | 第34-35页 |
| ·芯片洗涤 | 第35-36页 |
| ·芯片扫描及数据分析 | 第36页 |
| ·部分差异基因验证(Real-Time PCR) | 第36-38页 |
| ·GH3细胞蛋白质二维电泳条件优化及质谱鉴定 | 第38-46页 |
| ·细胞处理及分组 | 第38-39页 |
| ·GH3细胞蛋白提取方法 | 第39页 |
| ·蛋白质定量 | 第39-40页 |
| ·二维凝胶电泳 | 第40-42页 |
| ·图像扫描及分析 | 第42页 |
| ·蛋白质质谱鉴定 | 第42-43页 |
| ·Western Blot方法验证GH和GRP78蛋白表达情况 | 第43-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-84页 |
| ·T-2毒素作用于GH3细胞的毒性最大 | 第46页 |
| ·T-2毒素作用合适浓度和时间确定 | 第46-48页 |
| ·细胞生存活力的检测 | 第46-47页 |
| ·T-2毒素对GH3细胞GH分泌的影响 | 第47-48页 |
| ·T-2作用差异基因的分析(基因芯片) | 第48-58页 |
| ·总RNA质量 | 第48-49页 |
| ·芯片质量与结果可靠性分析 | 第49-50页 |
| ·毒素作用后差异表达基因 | 第50-58页 |
| ·关键基因mRNA表达水平的验证 | 第58页 |
| ·T-2毒素作用GH3细胞的差异蛋白分析(双向电泳-质谱) | 第58-83页 |
| ·双向电泳条件的优化 | 第59页 |
| ·T-2处理GH3细胞的2D图谱 | 第59-61页 |
| ·T-2处理GH3细胞2D图谱分析 | 第61-62页 |
| ·差异蛋白点的鉴定分析 | 第62-82页 |
| ·Western Blot验证GH和BIP蛋白 | 第82-83页 |
| ·基因芯片结果与蛋白组的比对 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-100页 |
| ·T-2毒素作用GH3细胞浓度和时间的确定 | 第84页 |
| ·T-2毒素对GH3细胞GH合成分泌的影响 | 第84-98页 |
| ·生长激素合成的相关基因和蛋白 | 第85-88页 |
| ·生长激素加工相关的基因与蛋白 | 第88-90页 |
| ·间接影响GH合成加工的基因与蛋白 | 第90-92页 |
| ·生长激素分泌相关基因与蛋白 | 第92-95页 |
| ·能量代谢相关基因与蛋白 | 第95-98页 |
| ·T-2毒素作用于GH3细胞的时间关系 | 第98-99页 |
| ·基因芯片与蛋白组学结果之间的关系 | 第99-100页 |
| 5 全文总结 | 第100-101页 |
| 文献综述 | 第101-113页 |
| 1 毒理基因组学 | 第101-107页 |
| ·毒理基因组学的产生及其基本概念 | 第101-102页 |
| ·毒理基因组学的主要技术 | 第102页 |
| ·毒理基因组的应用 | 第102-106页 |
| ·毒性作用机制的研究 | 第103-105页 |
| ·毒作用的量效关系和实效关系的研究 | 第105页 |
| ·筛选生物标志物 | 第105-106页 |
| ·动物毒性的实验结果的外推 | 第106页 |
| ·毒理基因组面临的问题挑战 | 第106-107页 |
| ·毒理基因组的发展趋势 | 第107页 |
| 2 毒理蛋白组学 | 第107-113页 |
| ·毒理蛋白质组学的概念和相关背景 | 第107-108页 |
| ·毒理蛋白质组学研究的主要技术平台 | 第108-109页 |
| ·毒理蛋白组学的应用 | 第109-111页 |
| ·研究外源性物质对生命有机体的毒性机制 | 第110-111页 |
| ·筛选化合物毒性评价的生物标志物 | 第111页 |
| ·毒理蛋白组学的发展趋势与展望 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 附录 | 第133-165页 |
