| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一章 EGCG抗肺癌A549细胞活性的研究 | 第16-28页 |
| 1. 前言 | 第16页 |
| 2. 材料试剂及主要实验设备 | 第16-19页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·主要溶液及试剂配方 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| 3. 试验方法 | 第19-20页 |
| ·体外实验 | 第19-20页 |
| ·动物实验 | 第20页 |
| 4. 统计学方法 | 第20页 |
| 5. 结果 | 第20-25页 |
| ·体外实验 | 第20-24页 |
| ·在体实验 | 第24-25页 |
| 6. 讨论 | 第25-27页 |
| 7. 结论 | 第27-28页 |
| 第二章 EGCG通过线粒体凋亡途径诱导肺癌细胞A549凋亡的研究 | 第28-58页 |
| 1. 前言 | 第28页 |
| 2. 材料试剂及主要实验设备 | 第28-34页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·主要溶液及试剂配方 | 第30-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| 3. 实验方法 | 第34-41页 |
| ·细胞培养 | 第34页 |
| ·逆转录逆转录聚合酶链式反应 | 第34-37页 |
| ·Real-time PCR | 第37-38页 |
| ·WesternBlot蛋白印迹 | 第38-41页 |
| 4. 统计学方法 | 第41-42页 |
| 5. 结果 | 第42-53页 |
| ·细胞及动物组织总RNA的提取 | 第42页 |
| ·RT-PCR检测EGCG处理后A549移植瘤中Bax mRNA的表达 | 第42页 |
| ·RT-PCR检测EGCG处理后A549移植瘤中Bcl-xl mRNA的表达 | 第42-43页 |
| ·Western Blot检测EGCG处理后A549移植瘤中Bax蛋白的表达 | 第43-44页 |
| ·Western Blot检测EGCG处理后A549移植瘤中Bcl-xl蛋白的表达 | 第44-45页 |
| ·Western Blot检测EGCG处理后A549移植瘤中Caspase-3(17kDa)蛋白的表达 | 第45-46页 |
| ·Real-time PCR检测EGCG处理后A549细胞中Bax mRNA的表达 | 第46-49页 |
| ·Real-time PCR检测EGCG处理后A549细胞中Bcl-xl mRNA的表达 | 第49-50页 |
| ·Western Blot检测EGCG处理后A549细胞中Bax蛋白的表达 | 第50-51页 |
| ·Western Blot检测EGCG处理后A549细胞中Bcl-xl蛋白的表达 | 第51-52页 |
| ·Western Blot检测EGCG处理后A549细胞中Caspase-3(17kDa)蛋白的表达 | 第52-53页 |
| 6. 讨论 | 第53-57页 |
| 7. 结论 | 第57-58页 |
| 第三章 EGCG通过Ku70调控肺癌细胞A549的凋亡 | 第58-90页 |
| 1. 前言 | 第58页 |
| 2. 材料试剂及主要实验设备 | 第58-66页 |
| ·实验材料 | 第58-60页 |
| ·主要溶液及试剂配方 | 第60-66页 |
| 3. 试验方法 | 第66-78页 |
| ·细胞培养 | 第66页 |
| ·逆转录逆转录聚合酶链式反应 | 第66-68页 |
| ·Real-time PCR | 第68-70页 |
| ·WesternBlot蛋白印迹 | 第70-72页 |
| ·免疫共沉淀 | 第72-73页 |
| ·shRNA表达载体的构建 | 第73-78页 |
| 4. 统计学方法 | 第78页 |
| 5. 结果 | 第78-87页 |
| ·测序结果 | 第78-79页 |
| ·Ku70干扰后各组细胞Ku70表达的情况 | 第79页 |
| ·RT-PCR检测EGCG处理后A549移植瘤中Ku70 mRNA的表达 | 第79页 |
| ·Western Blot检测EGCG处理后A549移植瘤中Ku70蛋白的表达 | 第79-80页 |
| ·免疫共沉淀检测EGCG处理后A549移植瘤中Bax-Ku70的相互作用 | 第80-81页 |
| ·Real-time PCR检测EGCG处理后A549细胞中Ku70 mRNA的表达 | 第81-82页 |
| ·Western Blot检测EGCG处理后A549细胞中Ku70蛋白的表达 | 第82-84页 |
| ·免疫共沉淀检测EGCG处理后A549细胞中Bax-Ku70的相互作用 | 第84页 |
| ·流式细胞仪(Annexin Ⅴ/PI双染法)检测EGCG对转染不同质粒A549细胞凋亡的诱导作用 | 第84-85页 |
| ·Western Blot检测EGCG对转染不同质粒A549细胞中Bax蛋白的表达的影响 | 第85-86页 |
| ·Western Blot检测EGCG对转染不同质粒A549细胞中Caspase-3(17KDa)蛋白的表达的影响 | 第86-87页 |
| 6. 讨论 | 第87-89页 |
| 7. 结论 | 第89-90页 |
| 第四章 EGCG通过Ku70的乙酰化状态调控肺癌细胞A549的凋亡 | 第90-128页 |
| 1. 前言 | 第90-91页 |
| 2. 材料试剂及主要实验设备 | 第91-100页 |
| ·实验材料 | 第91-95页 |
| ·主要溶液及试剂配方 | 第95-100页 |
| 3. 试验方法 | 第100-111页 |
| ·细胞培养 | 第100页 |
| ·WesternBlot蛋白印迹 | 第100-103页 |
| ·免疫共沉淀 | 第103页 |
| ·Ku70-pCDNA3.1(+)表达载体的构建 | 第103-108页 |
| ·Ku70-pCDNA3.1点突变真核表达载体构建 | 第108-110页 |
| ·质粒大量制备 | 第110页 |
| ·紫外分光光度仪测定质粒DNA的浓度和纯度 | 第110页 |
| ·细胞转染 | 第110-111页 |
| 4. 统计学方法 | 第111页 |
| 5. 结果 | 第111-124页 |
| ·Ku70 cDNA扩增PCR产物电泳图 | 第111页 |
| ·Ku70过表达菌检结果 | 第111-112页 |
| ·阳性克隆酶切鉴定 | 第112页 |
| ·Ku70点突变PCR产物电泳图 | 第112-113页 |
| ·Ku70点突变PCR菌检结果 | 第113-114页 |
| ·测序结果 | 第114-119页 |
| ·Ku70过表达和点突变后各组细胞Ku70表达的情况 | 第119页 |
| ·免疫共沉淀检测EGCG对A549细胞中Ku70乙酰化的影响 | 第119-120页 |
| ·流式细胞仪(Annexin Ⅴ/PI双染法)检测EGCG对转染不同质粒A549细胞凋亡的诱导作用 | 第120-122页 |
| ·Western Blot检测EGCG对转染不同质粒A549细胞中Bax蛋白的表达的影响 | 第122-123页 |
| ·Western Blot检测EGCG对转染不同质粒A549细胞中Caspase-3(17KDa)蛋白的表达的影响 | 第123-124页 |
| ·免疫共沉淀法检测EGCG对转染不同质粒A549细胞中Bax-Ku70相互作用的影响 | 第124页 |
| 6. 讨论 | 第124-127页 |
| 7. 结论 | 第127-128页 |
| 第五章 总结 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-140页 |
| 综述 | 第140-148页 |
| 参考文献 | 第144-148页 |
| 攻读学位期间的主要成果 | 第148-149页 |
| 致谢 | 第149页 |
