摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第9-14页 |
1 鸭肝炎病毒的分类地位 | 第9页 |
2 鸭肝炎病毒的病原特征 | 第9-10页 |
3 鸭肝炎病毒的致病性 | 第10页 |
4 鸭肝炎病毒的诊断方法 | 第10-11页 |
5 鸭肝炎病毒的基因组结构特点 | 第11-12页 |
·小 RNA 病毒的基因组结构特点 | 第11页 |
·I 型鸭肝炎病毒的基因组结构特点 | 第11-12页 |
6 I 型鸭肝炎病毒的蛋白结构特点 | 第12-13页 |
·I 型鸭肝炎病毒结构蛋白的特点 | 第12页 |
·I 型鸭肝炎病毒非结构蛋白的特点 | 第12-13页 |
7 本研究的目的和意义 | 第13-14页 |
第二章 C 型鸭肝炎病毒 GX 株全基因组序列的测定与分析 | 第14-28页 |
1 材料 | 第14-15页 |
·试验材料 | 第14-15页 |
·毒株 | 第14页 |
·载体及菌株 | 第14页 |
·主要试剂 | 第14页 |
·主要仪器设备 | 第14-15页 |
·主要溶液及其配制 | 第15页 |
2 方法 | 第15-18页 |
·病毒的增殖 | 第15页 |
·引物设计 | 第15-16页 |
·病毒 RNA 的提取 | 第16页 |
·RT-PCR 扩增病毒基因组 | 第16-17页 |
·各片段 PCR 产物的回收纯化 | 第17页 |
·目的片段与 pMD19-T 载体的连接 | 第17页 |
·连接产物的转化 | 第17-18页 |
·重组质粒 DNA 的提取 | 第18页 |
·重组质粒的鉴定 | 第18页 |
·序列测定与分析 | 第18页 |
3 结果与分析 | 第18-26页 |
·各片段 RT-PCR 扩增结果 | 第18-19页 |
·目的片段的克隆及鉴定 | 第19页 |
·测序结果及序列分析 | 第19-26页 |
·基因序列分析 | 第19-22页 |
·遗传进化分析 | 第22-26页 |
4 讨论 | 第26-28页 |
第三章 鸭肝炎病毒 ZJ-V 株结构蛋白的克隆与表达 | 第28-48页 |
1 材料 | 第28-30页 |
·试验材料 | 第28-29页 |
·毒株 | 第28页 |
·载体及菌株 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·主要仪器设备 | 第29页 |
·主要溶液及其配制 | 第29-30页 |
·SDS-PAGE 相关溶液 | 第29-30页 |
·Western-blot 相关溶液 | 第30页 |
·蛋白纯化相关溶液 | 第30页 |
·间接 ELISA 相关溶液 | 第30页 |
2 方法 | 第30-37页 |
·引物设计和合成 | 第30-31页 |
·病毒 RNA 的提取 | 第31页 |
·RT-PCR 扩增结构基因 | 第31页 |
·RT-PCR 产物的回收纯化 | 第31页 |
·重组表达质粒的构建 | 第31-34页 |
·重组菌的诱导表达 | 第34-35页 |
·表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第35-36页 |
·重组蛋白的 Western-blot 分析 | 第36页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第36页 |
·重组蛋白的纯化 | 第36-37页 |
·兔抗重组蛋白多克隆血清的制备及鉴定 | 第37页 |
·多克隆血清的制备 | 第37页 |
·间接 ELISA 检测鉴定 | 第37页 |
3 结果与分析 | 第37-46页 |
·结构基因 RT-PCR 扩增结果 | 第37-39页 |
·重组表达质粒的酶切鉴定结果 | 第39-40页 |
·重组蛋白的 SDS-PAGE 检测结果 | 第40-43页 |
·重组蛋白的 Western-blot 分析 | 第43-44页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第44-45页 |
·重组蛋白的纯化结果 | 第45-46页 |
·多克隆血清的制备及鉴定 | 第46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
全文结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54页 |