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C型鸭肝炎病毒GX株全基因组序列测定及结构蛋白的原核表达

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第一章 绪论第9-14页
 1 鸭肝炎病毒的分类地位第9页
 2 鸭肝炎病毒的病原特征第9-10页
 3 鸭肝炎病毒的致病性第10页
 4 鸭肝炎病毒的诊断方法第10-11页
 5 鸭肝炎病毒的基因组结构特点第11-12页
   ·小 RNA 病毒的基因组结构特点第11页
   ·I 型鸭肝炎病毒的基因组结构特点第11-12页
 6 I 型鸭肝炎病毒的蛋白结构特点第12-13页
   ·I 型鸭肝炎病毒结构蛋白的特点第12页
   ·I 型鸭肝炎病毒非结构蛋白的特点第12-13页
 7 本研究的目的和意义第13-14页
第二章 C 型鸭肝炎病毒 GX 株全基因组序列的测定与分析第14-28页
 1 材料第14-15页
   ·试验材料第14-15页
     ·毒株第14页
     ·载体及菌株第14页
     ·主要试剂第14页
     ·主要仪器设备第14-15页
   ·主要溶液及其配制第15页
 2 方法第15-18页
   ·病毒的增殖第15页
   ·引物设计第15-16页
   ·病毒 RNA 的提取第16页
   ·RT-PCR 扩增病毒基因组第16-17页
   ·各片段 PCR 产物的回收纯化第17页
   ·目的片段与 pMD19-T 载体的连接第17页
   ·连接产物的转化第17-18页
   ·重组质粒 DNA 的提取第18页
   ·重组质粒的鉴定第18页
   ·序列测定与分析第18页
 3 结果与分析第18-26页
   ·各片段 RT-PCR 扩增结果第18-19页
   ·目的片段的克隆及鉴定第19页
   ·测序结果及序列分析第19-26页
     ·基因序列分析第19-22页
     ·遗传进化分析第22-26页
 4 讨论第26-28页
第三章 鸭肝炎病毒 ZJ-V 株结构蛋白的克隆与表达第28-48页
 1 材料第28-30页
   ·试验材料第28-29页
     ·毒株第28页
     ·载体及菌株第28页
     ·主要试剂第28-29页
     ·主要仪器设备第29页
   ·主要溶液及其配制第29-30页
     ·SDS-PAGE 相关溶液第29-30页
     ·Western-blot 相关溶液第30页
     ·蛋白纯化相关溶液第30页
     ·间接 ELISA 相关溶液第30页
 2 方法第30-37页
   ·引物设计和合成第30-31页
   ·病毒 RNA 的提取第31页
   ·RT-PCR 扩增结构基因第31页
   ·RT-PCR 产物的回收纯化第31页
   ·重组表达质粒的构建第31-34页
   ·重组菌的诱导表达第34-35页
   ·表达产物的 SDS-PAGE 检测第35-36页
   ·重组蛋白的 Western-blot 分析第36页
   ·重组蛋白的可溶性分析第36页
   ·重组蛋白的纯化第36-37页
   ·兔抗重组蛋白多克隆血清的制备及鉴定第37页
     ·多克隆血清的制备第37页
     ·间接 ELISA 检测鉴定第37页
 3 结果与分析第37-46页
   ·结构基因 RT-PCR 扩增结果第37-39页
   ·重组表达质粒的酶切鉴定结果第39-40页
   ·重组蛋白的 SDS-PAGE 检测结果第40-43页
   ·重组蛋白的 Western-blot 分析第43-44页
   ·重组蛋白的可溶性分析第44-45页
   ·重组蛋白的纯化结果第45-46页
   ·多克隆血清的制备及鉴定第46页
 4 讨论第46-48页
全文结论第48-49页
参考文献第49-53页
致谢第53-54页
作者简历第54页

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