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上调miR-21对HT-29细胞生物学行为及对5-FU和放疗敏感性影响

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
中英文缩略词表第8-9页
第1章 引言第9-12页
第2章 材料与方法第12-26页
   ·实验材料第12-14页
     ·细胞株第12页
     ·细胞培养所需的的试剂以及材料第12页
     ·完全细胞培养基的配置第12-13页
     ·慢病毒转染相关试剂第13页
     ·miRNA 的提取第13页
     ·qPCR 相关第13页
     ·CCK-8 细胞增殖试验第13页
     ·Annexin V-PE/7-AAD 双染细胞凋亡检测和 PI 单染检测细胞周期分布第13-14页
     ·细胞克隆形成第14页
     ·细胞体外侵袭分析第14页
     ·MTT 法检测化放疗敏感性第14页
   ·主要仪器以及设备第14-15页
   ·实验方法第15-25页
     ·HT-29 细胞株的培养第15-16页
     ·慢病毒载体构建第16-18页
     ·慢病毒转染靶细胞第18页
     ·荧光显微镜观察各组细胞绿色荧光(GFP)强度第18页
     ·筛选 GFP 稳定表达细胞第18-19页
     ·实时定量 PCR 检测转染前后 miR-21 表达量的变化第19-21页
     ·CCK-8 细胞增殖检测第21-22页
     ·Annexin V-PE/7-AAD 双染标记细胞凋亡检测第22页
     ·PI 单染细胞周期分析第22-23页
     ·细胞克隆形成试验第23页
     ·细胞体外侵袭分析第23-24页
     ·CCK-8 法化疗敏感性检测第24页
     ·MTT 法放疗敏感性检测第24-25页
   ·统计学分析第25-26页
第3章 结果第26-36页
   ·HT-29 细胞生长状况第26页
   ·转染后 GFP 绿色荧光表达强度第26-27页
   ·实时定量 PCR 检测转染前后 miR-21 量的变化第27-28页
   ·miR-21 对 HT-29 细胞增殖影响第28-29页
   ·miR-21 对细胞周期的影响第29-30页
   ·miR-21 对细胞凋亡影响第30-31页
   ·miR-21 对细胞克隆形成的影响第31-32页
   ·细胞体外侵袭分析第32-33页
   ·miR-21 对细胞 5-FU 敏感性的影响第33-34页
   ·miR-21 对 HT-29 细胞放疗敏感性的影响第34-36页
第4章 讨论第36-43页
第5章 结论及展望第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-49页
综述第49-60页
 参考文献第56-60页

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