中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
中英文缩略词表 | 第8-9页 |
第1章 引言 | 第9-12页 |
第2章 材料与方法 | 第12-26页 |
·实验材料 | 第12-14页 |
·细胞株 | 第12页 |
·细胞培养所需的的试剂以及材料 | 第12页 |
·完全细胞培养基的配置 | 第12-13页 |
·慢病毒转染相关试剂 | 第13页 |
·miRNA 的提取 | 第13页 |
·qPCR 相关 | 第13页 |
·CCK-8 细胞增殖试验 | 第13页 |
·Annexin V-PE/7-AAD 双染细胞凋亡检测和 PI 单染检测细胞周期分布 | 第13-14页 |
·细胞克隆形成 | 第14页 |
·细胞体外侵袭分析 | 第14页 |
·MTT 法检测化放疗敏感性 | 第14页 |
·主要仪器以及设备 | 第14-15页 |
·实验方法 | 第15-25页 |
·HT-29 细胞株的培养 | 第15-16页 |
·慢病毒载体构建 | 第16-18页 |
·慢病毒转染靶细胞 | 第18页 |
·荧光显微镜观察各组细胞绿色荧光(GFP)强度 | 第18页 |
·筛选 GFP 稳定表达细胞 | 第18-19页 |
·实时定量 PCR 检测转染前后 miR-21 表达量的变化 | 第19-21页 |
·CCK-8 细胞增殖检测 | 第21-22页 |
·Annexin V-PE/7-AAD 双染标记细胞凋亡检测 | 第22页 |
·PI 单染细胞周期分析 | 第22-23页 |
·细胞克隆形成试验 | 第23页 |
·细胞体外侵袭分析 | 第23-24页 |
·CCK-8 法化疗敏感性检测 | 第24页 |
·MTT 法放疗敏感性检测 | 第24-25页 |
·统计学分析 | 第25-26页 |
第3章 结果 | 第26-36页 |
·HT-29 细胞生长状况 | 第26页 |
·转染后 GFP 绿色荧光表达强度 | 第26-27页 |
·实时定量 PCR 检测转染前后 miR-21 量的变化 | 第27-28页 |
·miR-21 对 HT-29 细胞增殖影响 | 第28-29页 |
·miR-21 对细胞周期的影响 | 第29-30页 |
·miR-21 对细胞凋亡影响 | 第30-31页 |
·miR-21 对细胞克隆形成的影响 | 第31-32页 |
·细胞体外侵袭分析 | 第32-33页 |
·miR-21 对细胞 5-FU 敏感性的影响 | 第33-34页 |
·miR-21 对 HT-29 细胞放疗敏感性的影响 | 第34-36页 |
第4章 讨论 | 第36-43页 |
第5章 结论及展望 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
综述 | 第49-60页 |
参考文献 | 第56-60页 |