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结肠癌细胞中miR-21对5-Fu代谢相关酶的调控及其靶基因的验证

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
中英文缩略词第7-8页
第1章 引言第8-10页
第2章 材料与方法第10-24页
   ·实验材料第10-12页
     ·细胞与培养方法第10页
     ·主要试剂第10-11页
     ·主要仪器设备第11-12页
   ·实验方法第12-23页
     ·HT-29 结肠癌细胞系的培养第12-13页
     ·慢病毒转染入人结肠癌 HT-29 细胞第13-14页
     ·靶基因的预测第14页
     ·双荧光素酶报告系统检测 hMSH2 为 miR-21 靶基因第14-18页
     ·提取总 RNA,逆转录成 cDNA,进行 qRT-PCR第18-20页
     ·Western Blotting第20-23页
   ·统计学处理第23-24页
第3章 结果第24-32页
   ·慢病毒转染人结肠腺癌 HT-29 细胞效率第24页
   ·双荧光素酶报告系统建立,并确定 hMSH2 为 miR-21 的靶基因第24-27页
     ·hMSH2-3’UTR 双荧光素酶报告系统建立第24-25页
     ·hMSH2 为 miR-21 的靶基因第25-27页
   ·qRT-PCR 检测 5 组 HT-29 细胞中 T S 酶、TP 酶、DPD 酶、hMSH2 的基因表达情况第27-29页
   ·Western Blotting 从蛋白水平检测 miR-21 上调或下调对 TS 酶、TP 酶、DPD 酶、hMSH2 表达情况的影响第29-32页
第4章 讨论第32-40页
第5章 结论第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-46页
综述第46-54页
 参考文献第51-54页

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