摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
文献综述 | 第13-25页 |
1.引言 | 第13页 |
2.禽类的性别 | 第13-14页 |
3.性别控制的研究进展 | 第14-16页 |
·芳香化酶的研究进展 | 第15页 |
·芳香化酶抑制剂的研究进展 | 第15-16页 |
4.胚胎性腺的分化及性别决定基因 | 第16-22页 |
·胚胎性腺的由来 | 第16-17页 |
·原始生殖细胞(PGC)的研究 | 第16-17页 |
·家禽 PGCs 的迁移过程 | 第17-19页 |
·生殖嵴对 PGCs 的吸引作用 | 第17-18页 |
·影响 PGCs 迁移与增殖的因素 | 第18-19页 |
·胚胎的性腺分化 | 第19-20页 |
·GDNF 的研究 | 第19-20页 |
·Mvh 的研究 | 第20页 |
·禽类性别决定的相关基因 | 第20-22页 |
·Z染色体性别决定的候选基因(DMRT1) | 第20-21页 |
·抗中肾旁管激素 / 抗苗勒氏管激素(antimul lerianhormone gene,AMH ) | 第21页 |
·雌激素受体(estrogen receptor,ER) | 第21-22页 |
5.实时荧光定量 PCR(Real-time Fluorecent Quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-FQPCR) | 第22-23页 |
·RT-FQPCR 的技术原理 | 第22页 |
·RT-FQPCR 的应用与前景 | 第22-23页 |
6.研究的目的与意义 | 第23-25页 |
试验部分 | 第25-62页 |
实验一 芳香化酶抑制剂对番鸭性别控制的研究 | 第25-35页 |
1.序言 | 第25页 |
2.材料与方法 | 第25-28页 |
·实验动物 | 第25页 |
·实验设计与分组 | 第25-28页 |
·人工受精 | 第25-26页 |
·雏鸭的生殖性别鉴定 | 第26页 |
·雏鸭的遗传性别鉴定 | 第26-28页 |
·组织样 DNA 提取 | 第26-27页 |
·双重 PCR 鉴定番鸭胚胎性别 | 第27页 |
·PCR 反应体系 | 第27页 |
·PCR 反应程序 | 第27-28页 |
·PCR 产物检测 | 第28页 |
·数据处理 | 第28页 |
3.结果与分析 | 第28-33页 |
·番鸭胚胎 DNA 提取效果检测 | 第28页 |
·PCR 扩增结果 | 第28-29页 |
·人工受精结果 | 第29-33页 |
4.讨论 | 第33-35页 |
·芳香化酶抑制剂对番鸭受精率的影响 | 第33页 |
·芳香化酶抑制剂对番鸭性别分化的影响 | 第33-35页 |
实验二 番鸭性腺分化的组织学研究 | 第35-46页 |
1.序言 | 第35页 |
2.材料与方法 | 第35-38页 |
·实验材料 | 第35页 |
·实验动物 | 第35页 |
·仪器设备 | 第35页 |
·试剂 | 第35页 |
·方法 | 第35-38页 |
·胚胎提取 | 第35-36页 |
·番鸭胚胎性别鉴定 | 第36页 |
·胚胎连续切片制作 | 第36-37页 |
·免疫组化 | 第37-38页 |
3.结果 | 第38-43页 |
·H.E、PAS 染色结果 | 第38-41页 |
·免疫组化结果 | 第41-43页 |
4.讨论 | 第43-46页 |
·P G C 的特征 | 第43-44页 |
·性腺分化时期组织结构变化 | 第44-45页 |
·性腺分化时间的判断 | 第45-46页 |
试验三 番鸭胚胎 AMH 和 ER-α基因的表达研究 | 第46-62页 |
1 材料与方法 | 第46-50页 |
·试验动物 | 第46页 |
·主要试剂和仪器 | 第46-47页 |
·主要仪器 | 第46-47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·引物设计及合成 | 第47页 |
·性腺分离及总 RNA 的提取与反转录 | 第47-49页 |
·引物检测 | 第49-50页 |
·荧光定量 PCR 扩增效率检测 | 第50页 |
·荧光定量 PCR 检测 | 第50页 |
·数据处理与统计分析 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-59页 |
·性腺提取 RNA 检测 | 第50-51页 |
·各基因普通 PCR 产物电泳结果 | 第51-52页 |
·定量 PCR 扩增效率检测结果 | 第52-54页 |
·RT-QPCR 的熔解曲线及扩增曲线结果 | 第54-56页 |
·RT- FQPCR 检测结果 | 第56-59页 |
·AMH 基因在不同胚龄番鸭性腺中的表达差异 | 第56-57页 |
·ER-α基因在不同胚龄番鸭性腺中的表达差异 | 第57-59页 |
3.讨论 | 第59-62页 |
·RT-FQPCR 方法的建立 | 第59-60页 |
·AMH 基因的组织表达 | 第60页 |
·ER基因的组织表达 | 第60-62页 |
全文总结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
致谢 | 第70页 |