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重组多肽VIP-TAT的制备及其抗东莨菪碱诱导的记忆缺失作用的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
第一章 前言第10-24页
   ·VIP 的简介第10-16页
     ·VIP 及其受体的研究概况第10-12页
     ·VIP 的生物学功能第12-16页
       ·VIP 对心血管的作用第13页
       ·VIP 作为促胰液素族成员中的主要作用第13-14页
       ·VIP 的免疫调节作用第14页
       ·VIP 的抗炎作用第14-15页
       ·VIP 调控细胞因子和生长因子第15页
       ·VIP 对癌症和细胞增殖的影响第15页
       ·VIP 与记忆和学习第15-16页
       ·VIP 与摄食第16页
     ·TAT/PTD 的转导机制及其生物学功能第16-20页
     ·蛋白转导域 PTD 的简介第17-18页
     ·PTD 的应用第18-20页
       ·PTD 在肿瘤治疗方面的应用第18页
       ·PTD 在免疫方面的应用第18-19页
       ·PTD 在脑血管疾病方面的应用第19页
       ·PTD 在基因治疗方面的作用第19-20页
     ·蛋白内含肽介导多肽制备的原理及优点第20-24页
     ·蛋白内含肽简介第20-21页
     ·蛋白内含肽介导蛋白质纯化第21-24页
第二章 本研究意义、目的及主要研究内容第24-26页
   ·研究目的及意义第24页
   ·主要研究内容第24-26页
第三章 重组多肽 VIP-TAT 的设计及制备第26-37页
   ·介绍第26页
   ·材料与方法第26-31页
     ·质粒、菌株和工具酶第26-27页
     ·VIP-TAT 基因的设计和合成第27-29页
     ·重组表达载体 pKYB-VIP-TAT 的构建第29页
     ·工程菌 pKYB-VIP-TAT-ER2566 构建第29-30页
     ·工程菌的融合蛋白表达条件优化第30页
     ·内含肽介导的目的多肽的纯化第30页
     ·SDS-PAGE第30-31页
   ·实验结果第31-35页
     ·PCR 扩增的 VIP-TAT 目的基因片段第31-32页
     ·重组载体 pKYB-VIP-TAT 的鉴定第32页
     ·工程菌 pKYB-VIP-TAT-ER2566 生长曲线的绘制第32-33页
     ·融合蛋白诱导表达条件优化第33-34页
     ·重组融合多肽 VIP-TAT 的纯化第34页
     ·重组多肽 VIP-TAT 的 western blot 检测第34-35页
   ·讨论第35-36页
   ·结论第36-37页
第四章 重组融合多肽 VIP-TAT 穿越能力的鉴定第37-48页
   ·介绍第37-38页
   ·实验材料与方法第38-41页
     ·实验材料和仪器第38-39页
     ·重组蛋白 VIP、VIP-TAT 的 FITC 标记第39-40页
     ·重组蛋白 VIP-TAT 和 VIP 穿细胞膜的功能的比较检测第40页
     ·重组蛋白 VIP、VIP-TAT 的雾化用药第40-41页
     ·重组 VIP-TAT 雾化用药对影响小鼠摄食实验第41页
   ·结果第41-44页
     ·重组蛋白 VIP -PTD 穿细胞膜的功能第41-42页
     ·重组多肽 VIP-TAT 和 VIP 穿越血气屏障和穿越血脑屏障的检测结果第42-43页
     ·重组蛋白 VIP-TAT 和 VIP 雾化用药后抑制摄食的检测结果第43-44页
   ·讨论第44-46页
     ·VIP-TAT 的雾化用药第44-45页
     ·VIP-TAT 的抑制摄食活性第45-46页
   ·结论第46-48页
第五章 VIP-TAT 抑制东莨菪碱诱导的记忆缺失的研究第48-63页
   ·介绍第48-50页
     ·VIP 与学习记忆第48页
     ·关于小鼠记忆缺失模型第48-49页
     ·小鼠避暗实验第49-50页
   ·实验材料与方法第50-53页
     ·动物、试剂与仪器第50-51页
     ·记忆障碍模型建立第51页
     ·一次性腹腔注射用药第51-52页
     ·一次性雾化用药第52页
     ·长期腹腔用药第52-53页
   ·结果第53-59页
     ·一次性腹腔注射用药的结果第53页
     ·一次性雾化用药的结果第53-54页
     ·长期用药的小鼠避暗潜伏期第54-55页
     ·长期用药脑组织中氧化与抗氧化指标的检测结果第55-56页
     ·长期用药对脑部乙酰胆碱酯酶含量的影响第56-57页
     ·长期用药后血液中相关指标的测定第57-59页
   ·讨论第59-61页
     ·VIP-TAT 和 VIP 的活性差异第59-60页
     ·VIP-TAT 抗记忆缺失的神经递质机制第60页
     ·VIP-TAT 抗记忆缺失的抗氧化机制第60-61页
     ·VIP-TAT 抗记忆缺失的供氧机制第61页
   ·结论第61-63页
第六章 总结、创新与展望第63-65页
   ·总结第63-64页
   ·创新第64页
   ·展望第64-65页
参考文献第65-74页
攻读硕士期间发表的文章第74-75页
附录 英文缩略词表第75-76页
致谢第76页

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