致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-28页 |
·土壤盐渍化及其危害 | 第11-13页 |
·土壤盐渍化 | 第11页 |
·土壤盐渍化对植物的危害 | 第11-13页 |
·渗透胁迫 | 第12页 |
·离子胁迫 | 第12-13页 |
·营养胁迫 | 第13页 |
·植物耐盐机理 | 第13-18页 |
·拒盐 | 第14-15页 |
·降低细胞内的盐浓度 | 第15-16页 |
·Na~+区隔化 | 第15-16页 |
·Na~+外排 | 第16页 |
·有机溶质或渗透保护剂的积累 | 第16-18页 |
·脯氨酸 | 第17页 |
·甜菜碱 | 第17页 |
·多元醇 | 第17-18页 |
·多胺 | 第18页 |
·Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第18-26页 |
·SOS 调控途径 | 第20-22页 |
·SOS1 基因 | 第20-21页 |
·SOS2 基因 | 第21页 |
·SOS3 基因 | 第21-22页 |
·NHX 调控途径 | 第22-25页 |
·NHX 基因的发现 | 第22-23页 |
·NHX 基因的分类 | 第23-24页 |
·NHX 基因的研究进展 | 第24-25页 |
·Na~+/H~+逆向转运蛋白与植物耐盐性 | 第25-26页 |
·盐胁迫与 Na~+/H~+逆向转运蛋白活性 | 第25-26页 |
·其它胁迫与Na~+/H~+逆向转运蛋白活性 | 第26页 |
·转Na~+/H~+逆向转运蛋白基因植株与其耐盐性 | 第26页 |
·小麦Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第26-28页 |
·TaSOS1 基因 | 第27页 |
·小麦NHX 基因 | 第27-28页 |
2 引言 | 第28-30页 |
3 材料与方法 | 第30-40页 |
·试验材料 | 第30页 |
·植物材料及处理 | 第30页 |
·试验材料 | 第30页 |
·试验方法 | 第30-40页 |
·RNA 提取 | 第30-31页 |
·反转录反应 | 第31页 |
·TaNHX2 基因的克隆 | 第31-33页 |
·引物设计 | 第31页 |
·PCR 反应体系及条件 | 第31-32页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第32-33页 |
·连接产物的转化 | 第33页 |
·大肠杆菌质粒DNA 的提取 | 第33页 |
·TaNHX2 基因的功能验证 | 第33-37页 |
·酵母表达载体的构建 | 第33-34页 |
·重组质粒DNA 提取 | 第34页 |
·重组质粒DNA 的检测 | 第34-35页 |
·试验中所需酵母培养基 | 第35页 |
·LiAc 法转化酵母 | 第35-36页 |
·酵母质粒DNA 提取 | 第36页 |
·酵母质粒DNA PCR 检测及酶切检测 | 第36页 |
·酵母功能互补试验 | 第36-37页 |
·转基因酵母离子含量测定 | 第37页 |
·TaNHX2 基因的定位 | 第37-38页 |
·定位重组载体的构建 | 第37页 |
·拟南芥原生质体制备 | 第37-38页 |
·PEG 法转化拟南芥原生质体 | 第38页 |
·激光共聚焦显微镜检测 | 第38页 |
·实时荧光定量PCR(Real-Time PCR) | 第38-39页 |
·荧光定量PCR 引物 | 第38页 |
·实时荧光定量PCR | 第38-39页 |
·TaNHX2 突变体基因的功能验证 | 第39-40页 |
·TaNHX2 突变体基因的克隆 | 第39-40页 |
·TaNHX2 突变体酵母表达载体的构建 | 第40页 |
·酵母功能互补试验 | 第40页 |
4 结果与分析 | 第40-53页 |
·TaNHX2 基因的克隆及生物信息学分析 | 第40-42页 |
·TaNHX2 基因的克隆 | 第40-41页 |
·TaNHX2 基因的生物信息学分析 | 第41-42页 |
·转TaNHX2 基因酵母的功能互补验证 | 第42-44页 |
·pYES2-TaNHX2 重组质粒的构建 | 第43页 |
·转基因酵母功能验证 | 第43-44页 |
·转TaNHX2 基因酵母细胞的离子含量测定 | 第44-45页 |
·TaNHX2 基因的定位 | 第45-46页 |
·TaNHX2 基因在各种胁迫下的表达量分析 | 第46-50页 |
·RNA 及cDNA 检测 | 第46-47页 |
·标准曲线的建立 | 第47页 |
·熔解曲线 | 第47-48页 |
·TaNHX2 基因在各种胁迫下的特异性表达 | 第48-50页 |
·NaCl 胁迫下TaNHX2 基因的表达模式 | 第48-49页 |
·4℃低温胁迫下TaNHX2 基因的表达模式 | 第49页 |
·ABA 胁迫下TaNHX2 基因的表达模式 | 第49-50页 |
·PEG6000 胁迫下TaNHX2 基因的表达模式 | 第50页 |
·TaNHX2 的功能域分析 | 第50-53页 |
·TaNHX2 突变体基因的克隆 | 第50-51页 |
·转TaNHX2 突变体基因酵母的功能互补验证 | 第51-52页 |
·酸性条件对突变体功能影响 | 第52-53页 |
5 结论与讨论 | 第53-56页 |
·TaNHX2 的生物信息学分析 | 第53页 |
·TaNHX2 的耐盐性分析 | 第53-54页 |
·不同胁迫下TaNHX2 基因的表达 | 第54-55页 |
·TaNHX2 突变体基因耐盐性分析 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
ABSTRACT | 第66-68页 |