| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-28页 |
| ·土壤盐渍化及其危害 | 第11-13页 |
| ·土壤盐渍化 | 第11页 |
| ·土壤盐渍化对植物的危害 | 第11-13页 |
| ·渗透胁迫 | 第12页 |
| ·离子胁迫 | 第12-13页 |
| ·营养胁迫 | 第13页 |
| ·植物耐盐机理 | 第13-18页 |
| ·拒盐 | 第14-15页 |
| ·降低细胞内的盐浓度 | 第15-16页 |
| ·Na~+区隔化 | 第15-16页 |
| ·Na~+外排 | 第16页 |
| ·有机溶质或渗透保护剂的积累 | 第16-18页 |
| ·脯氨酸 | 第17页 |
| ·甜菜碱 | 第17页 |
| ·多元醇 | 第17-18页 |
| ·多胺 | 第18页 |
| ·Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第18-26页 |
| ·SOS 调控途径 | 第20-22页 |
| ·SOS1 基因 | 第20-21页 |
| ·SOS2 基因 | 第21页 |
| ·SOS3 基因 | 第21-22页 |
| ·NHX 调控途径 | 第22-25页 |
| ·NHX 基因的发现 | 第22-23页 |
| ·NHX 基因的分类 | 第23-24页 |
| ·NHX 基因的研究进展 | 第24-25页 |
| ·Na~+/H~+逆向转运蛋白与植物耐盐性 | 第25-26页 |
| ·盐胁迫与 Na~+/H~+逆向转运蛋白活性 | 第25-26页 |
| ·其它胁迫与Na~+/H~+逆向转运蛋白活性 | 第26页 |
| ·转Na~+/H~+逆向转运蛋白基因植株与其耐盐性 | 第26页 |
| ·小麦Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第26-28页 |
| ·TaSOS1 基因 | 第27页 |
| ·小麦NHX 基因 | 第27-28页 |
| 2 引言 | 第28-30页 |
| 3 材料与方法 | 第30-40页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·植物材料及处理 | 第30页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-40页 |
| ·RNA 提取 | 第30-31页 |
| ·反转录反应 | 第31页 |
| ·TaNHX2 基因的克隆 | 第31-33页 |
| ·引物设计 | 第31页 |
| ·PCR 反应体系及条件 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第32-33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA 的提取 | 第33页 |
| ·TaNHX2 基因的功能验证 | 第33-37页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·重组质粒DNA 提取 | 第34页 |
| ·重组质粒DNA 的检测 | 第34-35页 |
| ·试验中所需酵母培养基 | 第35页 |
| ·LiAc 法转化酵母 | 第35-36页 |
| ·酵母质粒DNA 提取 | 第36页 |
| ·酵母质粒DNA PCR 检测及酶切检测 | 第36页 |
| ·酵母功能互补试验 | 第36-37页 |
| ·转基因酵母离子含量测定 | 第37页 |
| ·TaNHX2 基因的定位 | 第37-38页 |
| ·定位重组载体的构建 | 第37页 |
| ·拟南芥原生质体制备 | 第37-38页 |
| ·PEG 法转化拟南芥原生质体 | 第38页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测 | 第38页 |
| ·实时荧光定量PCR(Real-Time PCR) | 第38-39页 |
| ·荧光定量PCR 引物 | 第38页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第38-39页 |
| ·TaNHX2 突变体基因的功能验证 | 第39-40页 |
| ·TaNHX2 突变体基因的克隆 | 第39-40页 |
| ·TaNHX2 突变体酵母表达载体的构建 | 第40页 |
| ·酵母功能互补试验 | 第40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-53页 |
| ·TaNHX2 基因的克隆及生物信息学分析 | 第40-42页 |
| ·TaNHX2 基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·TaNHX2 基因的生物信息学分析 | 第41-42页 |
| ·转TaNHX2 基因酵母的功能互补验证 | 第42-44页 |
| ·pYES2-TaNHX2 重组质粒的构建 | 第43页 |
| ·转基因酵母功能验证 | 第43-44页 |
| ·转TaNHX2 基因酵母细胞的离子含量测定 | 第44-45页 |
| ·TaNHX2 基因的定位 | 第45-46页 |
| ·TaNHX2 基因在各种胁迫下的表达量分析 | 第46-50页 |
| ·RNA 及cDNA 检测 | 第46-47页 |
| ·标准曲线的建立 | 第47页 |
| ·熔解曲线 | 第47-48页 |
| ·TaNHX2 基因在各种胁迫下的特异性表达 | 第48-50页 |
| ·NaCl 胁迫下TaNHX2 基因的表达模式 | 第48-49页 |
| ·4℃低温胁迫下TaNHX2 基因的表达模式 | 第49页 |
| ·ABA 胁迫下TaNHX2 基因的表达模式 | 第49-50页 |
| ·PEG6000 胁迫下TaNHX2 基因的表达模式 | 第50页 |
| ·TaNHX2 的功能域分析 | 第50-53页 |
| ·TaNHX2 突变体基因的克隆 | 第50-51页 |
| ·转TaNHX2 突变体基因酵母的功能互补验证 | 第51-52页 |
| ·酸性条件对突变体功能影响 | 第52-53页 |
| 5 结论与讨论 | 第53-56页 |
| ·TaNHX2 的生物信息学分析 | 第53页 |
| ·TaNHX2 的耐盐性分析 | 第53-54页 |
| ·不同胁迫下TaNHX2 基因的表达 | 第54-55页 |
| ·TaNHX2 突变体基因耐盐性分析 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| ABSTRACT | 第66-68页 |