摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-42页 |
1 卵泡的发育 | 第12-22页 |
·卵泡的形成与发育 | 第12-19页 |
·卵泡的概念与分类 | 第12-13页 |
·卵泡的形成 | 第13页 |
·卵泡的发育 | 第13-15页 |
·卵泡发育的过程 | 第15-19页 |
·卵泡发育的调控机制 | 第19-22页 |
·卵泡发育调控基本机理 | 第19-20页 |
·生殖激素与卵泡发育 | 第20-22页 |
2 卵泡闭锁概述 | 第22-25页 |
·卵泡闭锁的定义 | 第22-23页 |
·卵泡闭锁的特征 | 第23-25页 |
3 卵泡闭锁调控的研究进展 | 第25-37页 |
·激素对卵泡闭锁的调控 | 第25-29页 |
·促性腺激素 | 第25-26页 |
·促性腺激素释放激素 | 第26-27页 |
·性腺类固醇激素 | 第27-28页 |
·抑制素、活化素和卵泡抑素 | 第28-29页 |
·生长激素 | 第29页 |
·细胞死亡配体和受体系统与卵泡闭锁 | 第29-33页 |
·TNFα和TNFRs | 第30-31页 |
·Fas配体和Fas | 第31-32页 |
·TRAIL和TRAILRs | 第32-33页 |
·卵泡闭锁相关基因 | 第33-36页 |
·FOXO基因 | 第33-34页 |
·Caspase基因 | 第34页 |
·Bcl-2家族基因 | 第34-36页 |
·p53与WT-1基因 | 第36页 |
·研究卵泡闭锁的意义 | 第36-37页 |
4 基因表达芯片技术 | 第37-42页 |
·基因芯片的定义 | 第37页 |
·基因芯片的分类 | 第37-39页 |
·光引导原位聚合技术 | 第38页 |
·压电打印原位聚合技术 | 第38页 |
·其他分类方法 | 第38-39页 |
·基因芯片的应用 | 第39-42页 |
·基因芯片—多用途生物研究工具 | 第39页 |
·基因芯片在疾病研究中的应用 | 第39页 |
·基因芯片其他领域的应用 | 第39-42页 |
第二章 试验部分 | 第42-74页 |
1 试验材料 | 第42-45页 |
·试验动物 | 第42页 |
·试剂和仪器 | 第42-44页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42-43页 |
·引物 | 第43-44页 |
·主要生物学数据库及软件 | 第44页 |
·溶液配制 | 第44-45页 |
·卵巢采样所配溶液 | 第44页 |
·电泳液配制 | 第44页 |
·电泳试剂的配制 | 第44页 |
·RNA提取试剂配置 | 第44-45页 |
2 实验方法 | 第45-60页 |
·卵泡的剥离及卵泡液的收集 | 第45页 |
·卵泡闭锁程度的判断 | 第45-46页 |
·根据卵泡外观形态判断闭锁程度 | 第45页 |
·基于卵泡液激素浓度的测定对卵泡闭锁程度的判断 | 第45-46页 |
·卵泡闭锁程度的综合判定 | 第46页 |
·总RNA的提取及检测 | 第46-49页 |
·卵泡组织中总RNA的提取 | 第46-47页 |
·RNA质量控制 | 第47页 |
·RNA的纯化 | 第47-48页 |
·RNA浓度和纯度的检测 | 第48页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量 | 第48-49页 |
·基因芯片分析 | 第49-57页 |
·基因芯片的设计制作 | 第49页 |
·由RNA合成双链DNA | 第49-51页 |
·生物素标记cRNA合成 | 第51-52页 |
·杂交 | 第52-53页 |
·洗脱、染色、扫描芯片 | 第53-57页 |
·荧光定量RT-PCR验证 | 第57-60页 |
·反转录cDNA的合成 | 第57页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第57-58页 |
·实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第58-60页 |
3 实验结果与分析 | 第60-68页 |
·芯片杂交图谱和差异基因转录 | 第60-63页 |
·Gene Ontology(GO)分析 | 第63-64页 |
·聚类分析 | 第64-67页 |
·实时定量PCR验证的基因芯片数据(qPCR) | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-74页 |
·基因转录的整体变化与GO和聚类分析 | 第68-69页 |
·选择的上调基因 | 第69-71页 |
·CYP11A1基因在卵泡早期闭锁过程中表达的变化 | 第70页 |
·IRG6基因在卵泡早期闭锁过程中表达的变化 | 第70页 |
·ALCAM基因在卵泡早期闭锁过程中表达的变化 | 第70-71页 |
·选择的下调基因 | 第71-74页 |
·STAR基因在卵泡早期闭锁过程中表达的变化 | 第71页 |
·VEGFA基因在卵泡早期闭锁过程中表达的变化 | 第71-72页 |
·CYP19A3基因在卵泡早期闭锁过程中表达的变化 | 第72页 |
·猪卵泡闭锁潜在的调节机制和影响因素 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-86页 |
致谢 | 第86页 |