| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-35页 |
| 第一节 水产动物主要致病菌的致病性研究 | 第14-24页 |
| ·哈氏弧菌致病机理的研究 | 第14-17页 |
| ·鳗弧菌致病机理的研究 | 第17-19页 |
| ·溶藻胶弧菌的研究进展 | 第19-21页 |
| ·海豚链球菌的研究进展 | 第21-24页 |
| 第二节 环介导等温扩增技术（LAMP） | 第24-29页 |
| ·LAMP 技术原理 | 第24-26页 |
| ·LAMP 引物设计 | 第26-28页 |
| ·LAMP 扩增结果判断 | 第28页 |
| ·LAMP 技术在动物疾病检测中的应用 | 第28-29页 |
| 第三节 鱼类疫苗的研究进展 | 第29-34页 |
| ·鱼类疫苗的类型 | 第29-31页 |
| ·根据病原的不同，鱼类疫苗可以分为 | 第29-30页 |
| ·细菌性疫苗 | 第29页 |
| ·病毒性疫苗 | 第29-30页 |
| ·寄生虫疫苗 | 第30页 |
| ·根据获得方式的不同，鱼用疫苗可以分为 | 第30-31页 |
| ·菌苗 | 第30页 |
| ·重组亚单位疫苗 | 第30-31页 |
| ·DNA 疫苗 | 第31页 |
| ·鱼类疫苗的免疫方式 | 第31-34页 |
| ·注射免疫 | 第31页 |
| ·浸泡免疫 | 第31-32页 |
| ·口服免疫 | 第32-34页 |
| 第四节 研究目的及意义 | 第34-35页 |
| 第二章 多重环介导等温扩增技术（MLAMP）诊断方法的建立及应用 | 第35-55页 |
| ·材料与方法 | 第36-43页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-43页 |
| ·LAMP 引物设计 | 第37-38页 |
| ·DNA 模板的制备 | 第38-39页 |
| ·采用煮沸热裂解法 | 第38-39页 |
| ·细菌基因组 DNA 提取试剂盒（TianGen） | 第39页 |
| ·LAMP 反应体系 | 第39-40页 |
| ·LAMP 反应条件的优化 | 第40页 |
| ·不同反应温度的优化 | 第40页 |
| ·不同反应时间的优化 | 第40页 |
| ·mLAMP 反应体系及扩增产物的酶切分析 | 第40-41页 |
| ·mLAMP 及 PCR 反应的灵敏性检测 | 第41-42页 |
| ·mLAMP 方法的特异性检测 | 第42页 |
| ·mLAMP 方法的应用 | 第42页 |
| ·数据分析 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-52页 |
| ·LAMP 及 mLAMP 扩增反应 | 第43-46页 |
| ·不同反应温度的优化结果 | 第43-44页 |
| ·不同反应时间的优化结果 | 第44-45页 |
| ·mLAMP 扩增反应 | 第45-46页 |
| ·mLAMP 及 PCR 反应的灵敏性检测 | 第46-47页 |
| ·mLAMP 方法的特异性检测 | 第47-49页 |
| ·mLAMP 检测方法的应用 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 第三章 鳗弧菌 C312M 减毒疫苗的筛选及其免疫保护效应的评价 | 第55-73页 |
| ·材料与方法 | 第56-61页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-61页 |
| ·细菌菌株的筛选 | 第56-57页 |
| ·实验鱼 | 第57页 |
| ·C312M 的毒力 | 第57页 |
| ·C312M 的毒力稳定性 | 第57-58页 |
| ·全细胞蛋白图谱 | 第58页 |
| ·蛋白酶和铁载体的产生 | 第58-59页 |
| ·疫苗颗粒的制备 | 第59页 |
| ·免疫试验 | 第59-60页 |
| ·C312M 感染免疫牙鲆后侵入组织的情况 | 第60-61页 |
| ·ELISA 和血清杀菌活性 | 第61页 |
| ·数据分析 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-70页 |
| ·C312M 及 C312 | 第61-64页 |
| ·C312M 的毒力 | 第64-66页 |
| ·C312M 在体内及体外稳定性的检测 | 第66页 |
| ·C312M 通过口服、浸泡、口服加浸泡方式进行牙鲆免疫 | 第66-70页 |
| ·免疫保护效应 | 第66-67页 |
| ·免疫后 C312M 在免疫鱼组织中的侵袭与繁殖 | 第67-68页 |
| ·C312M 诱导血清抗体的产生量及杀菌活性 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 第四章 海豚链球菌减毒株的筛选及其免疫保护效应的评价 | 第73-86页 |
| ·材料与方法 | 第74-78页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-78页 |
| ·SF1M1 的筛选 | 第74-75页 |
| ·蛋白酶及铁载体的产生 | 第75页 |
| ·实验鱼 | 第75-76页 |
| ·SF1M1 的毒力及稳定性分析 | 第76页 |
| ·免疫实验 | 第76-77页 |
| ·疫苗颗粒的制备 | 第76页 |
| ·免疫实验 | 第76-77页 |
| ·免疫后 SF1M1 侵入鱼组织情况 | 第77页 |
| ·酶联免疫吸附试验（ELISA）和血清杀菌活性 | 第77-78页 |
| ·数据分析 | 第78页 |
| ·结果 | 第78-83页 |
| ·SF1M1 菌株的筛选及特性分析 | 第78-80页 |
| ·SF1M1 毒力的稳定性 | 第80页 |
| ·SF1M1 作为自然免疫疫苗的可能性 | 第80-82页 |
| ·SF1M1 免疫后在鱼组织中的分散情况 | 第80-81页 |
| ·SF1M1 产生的保护效率 | 第81-82页 |
| ·血清抗体的产生及杀菌活性 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| 第五章 哈氏弧菌外膜蛋白的免疫学分析 | 第86-105页 |
| ·材料与方法 | 第87-96页 |
| ·材料 | 第87-88页 |
| ·方法 | 第88-96页 |
| ·序列分析 | 第88页 |
| ·原核表达载体质粒的构建 | 第88-93页 |
| ·哈氏弧菌 13 个外膜蛋白基因的 PCR 扩增 | 第88-90页 |
| ·重组外膜蛋白表达载体的构建 | 第90-91页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第91-92页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第92-93页 |
| ·Triton X114 去除内毒素 | 第93页 |
| ·哈氏弧菌抗血清的制备 | 第93页 |
| ·实验鱼 | 第93-94页 |
| ·免疫 | 第94页 |
| ·酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第94页 |
| ·血清抗体对细菌感染 FG9307 细胞的影响 | 第94-95页 |
| ·免疫诱导产生的抗体与细菌的结合 | 第95页 |
| ·被动免疫 | 第95页 |
| ·OMP173 对细菌感染的影响 | 第95页 |
| ·数据分析 | 第95-96页 |
| ·结果 | 第96-103页 |
| ·哈氏弧菌 13 个 OMPs 的序列特征 | 第96页 |
| ·OMPs 在体内感染中的免疫原性 | 第96-98页 |
| ·OMPs 作为亚单位疫苗的保护效率 | 第98页 |
| ·免疫牙鲆产生的血清抗体及其对细菌感染的影响 | 第98-99页 |
| ·OMP173 抗体分析 | 第99-102页 |
| ·结合细菌 | 第99-100页 |
| ·通过被动免疫检测细菌感染后产生的保护效应 | 第100-102页 |
| ·OMP173 对细菌感染宿主细胞的影响 | 第102-103页 |
| ·讨论 | 第103-105页 |
| 第六章 结论 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-118页 |
| 作者简历 | 第118-119页 |
| 攻读博士学位期间发表的文章 | 第119页 |
