提要 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-15页 |
英文缩写词表 | 第15-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-32页 |
·粘蛋白家族(Mucins) | 第16页 |
·MUC1 | 第16-27页 |
·MUC1 的分布和结构 | 第16-17页 |
·MUC1 同种型 | 第17-18页 |
·MUC1 生物学功能 | 第18-27页 |
·肿瘤的基因治疗 | 第27-28页 |
·RNA 干扰技术研究进展及其应用 | 第28页 |
·肝癌的研究现状 | 第28-29页 |
·本课题主要研究目的、内容及特色 | 第29-32页 |
·研究目的 | 第29页 |
·研究内容 | 第29-30页 |
·本课题的特色 | 第30-32页 |
第2章 MUC1 基因沉默稳定克隆的筛选与鉴定 | 第32-56页 |
·材料与方法 | 第32-44页 |
·实验材料 | 第32-35页 |
·实验方法 | 第35-44页 |
·统计学分析 | 第44页 |
·结果 | 第44-54页 |
·MUC1 在肝癌细胞表达分析 | 第44-45页 |
·MUC1 siRNA 重组表达载体的酶切鉴定 | 第45-46页 |
·MUC1 siRNA 重组表达载体的测序鉴定 | 第46-47页 |
·荧光显微镜观察 MUC1 siRNA 重组表达载体的转染效率 | 第47-48页 |
·半定量 RT-PCR 分析重组表达载体瞬时转染对SMMC-7721 细胞 MUC1 mRNA 表达的影响 | 第48-49页 |
·流式细胞仪分析 MUC1 siRNA 重组表达载体瞬时转染对SMMC-7721 细胞 MUC1 表达的影响 | 第49-50页 |
·MTT 法分析 MUC1 siRNA 重组表达载体瞬时转染对SMMC-7721 细胞增殖能力的影响 | 第50-51页 |
·荧光显微镜观察稳定克隆 MUC1 表达 | 第51-52页 |
·RT-PCR 分析稳定克隆 MUC1 mRNA 表达 | 第52-53页 |
·稳定克隆 MUC1 沉默效率 | 第53页 |
·Western blotting 分析稳定克隆 MUC1 蛋白表达 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第3章 MUC1 基因沉默对肝癌 SMMC-7721 细胞增殖和迁移的影响 | 第56-78页 |
·材料与方法 | 第56-62页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-62页 |
·统计学分析 | 第62页 |
·结果 | 第62-73页 |
·MUC1 基因沉默降低肝癌细胞增殖能力 | 第62-63页 |
·MUC1 基因沉默降低肝癌细胞克隆形成能力 | 第63-64页 |
·MUC1 基因沉默诱导细胞周期阻滞 | 第64-65页 |
·MUC1 基因沉默增加细胞间粘附聚集能力 | 第65-66页 |
·MUC1 基因沉默对细胞迁移能力的影响 | 第66-67页 |
·免疫共沉淀分析 MUC1-CT/β-catenin 相互作用 | 第67-68页 |
·β-catenin 细胞内分布分析 | 第68-69页 |
·MUC1 基因沉默降低肝癌细胞 cyclin D1/c-Myc mRNA表达 | 第69页 |
·MUC1 基因沉默降低肝癌细胞 cyclin D1/c-Myc 蛋白表达 | 第69-70页 |
·MUC1 基因沉默增加肝癌细胞 E-cadherin 蛋白表达 | 第70-71页 |
·基因芯片分析增殖、迁移相关基因差异表达 | 第71-73页 |
·讨论 | 第73-78页 |
第4章 MUC1 基因沉默对肝癌 SMMC-7721 细胞凋亡的影响 | 第78-94页 |
·材料和方法 | 第79-83页 |
·实验材料 | 第79-80页 |
·实验方法 | 第80-83页 |
·统计学分析 | 第83页 |
·结果 | 第83-91页 |
·MUC1 基因沉默诱导 SMMC-7721 细胞凋亡的形态学及生化学改变 | 第83-88页 |
·MUC1 基因沉默调节凋亡相关基因 mRNA 的表达 | 第88-89页 |
·MUC1 基因沉默调节凋亡相关蛋白的表达及活化 | 第89-90页 |
·免疫共沉淀分析 MUC1 与 Bax 及 caspase-8 的相互作用 | 第90-91页 |
·讨论 | 第91-94页 |
第5章 MUC1 基因沉默对SMMC-7721 细胞体内致瘤能力的影响 | 第94-98页 |
·材料与方法 | 第94页 |
·实验材料 | 第94页 |
·实验方法 | 第94页 |
·结果 | 第94-96页 |
·讨论 | 第96-98页 |
结论 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-114页 |
在学期间所取得的科研成果 | 第114-116页 |
致谢 | 第116页 |