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MUC1基因沉默诱导肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制及促凋亡作用研究

提要第1-5页
中文摘要第5-8页
Abstract第8-15页
英文缩写词表第15-16页
第1章 文献综述第16-32页
   ·粘蛋白家族(Mucins)第16页
   ·MUC1第16-27页
     ·MUC1 的分布和结构第16-17页
     ·MUC1 同种型第17-18页
     ·MUC1 生物学功能第18-27页
   ·肿瘤的基因治疗第27-28页
   ·RNA 干扰技术研究进展及其应用第28页
   ·肝癌的研究现状第28-29页
   ·本课题主要研究目的、内容及特色第29-32页
     ·研究目的第29页
     ·研究内容第29-30页
     ·本课题的特色第30-32页
第2章 MUC1 基因沉默稳定克隆的筛选与鉴定第32-56页
   ·材料与方法第32-44页
     ·实验材料第32-35页
     ·实验方法第35-44页
     ·统计学分析第44页
   ·结果第44-54页
     ·MUC1 在肝癌细胞表达分析第44-45页
     ·MUC1 siRNA 重组表达载体的酶切鉴定第45-46页
     ·MUC1 siRNA 重组表达载体的测序鉴定第46-47页
     ·荧光显微镜观察 MUC1 siRNA 重组表达载体的转染效率第47-48页
     ·半定量 RT-PCR 分析重组表达载体瞬时转染对SMMC-7721 细胞 MUC1 mRNA 表达的影响第48-49页
     ·流式细胞仪分析 MUC1 siRNA 重组表达载体瞬时转染对SMMC-7721 细胞 MUC1 表达的影响第49-50页
     ·MTT 法分析 MUC1 siRNA 重组表达载体瞬时转染对SMMC-7721 细胞增殖能力的影响第50-51页
     ·荧光显微镜观察稳定克隆 MUC1 表达第51-52页
     ·RT-PCR 分析稳定克隆 MUC1 mRNA 表达第52-53页
     ·稳定克隆 MUC1 沉默效率第53页
     ·Western blotting 分析稳定克隆 MUC1 蛋白表达第53-54页
   ·讨论第54-56页
第3章 MUC1 基因沉默对肝癌 SMMC-7721 细胞增殖和迁移的影响第56-78页
   ·材料与方法第56-62页
     ·实验材料第56-57页
     ·实验方法第57-62页
     ·统计学分析第62页
   ·结果第62-73页
     ·MUC1 基因沉默降低肝癌细胞增殖能力第62-63页
     ·MUC1 基因沉默降低肝癌细胞克隆形成能力第63-64页
     ·MUC1 基因沉默诱导细胞周期阻滞第64-65页
     ·MUC1 基因沉默增加细胞间粘附聚集能力第65-66页
     ·MUC1 基因沉默对细胞迁移能力的影响第66-67页
     ·免疫共沉淀分析 MUC1-CT/β-catenin 相互作用第67-68页
     ·β-catenin 细胞内分布分析第68-69页
     ·MUC1 基因沉默降低肝癌细胞 cyclin D1/c-Myc mRNA表达第69页
     ·MUC1 基因沉默降低肝癌细胞 cyclin D1/c-Myc 蛋白表达第69-70页
     ·MUC1 基因沉默增加肝癌细胞 E-cadherin 蛋白表达第70-71页
     ·基因芯片分析增殖、迁移相关基因差异表达第71-73页
   ·讨论第73-78页
第4章 MUC1 基因沉默对肝癌 SMMC-7721 细胞凋亡的影响第78-94页
   ·材料和方法第79-83页
     ·实验材料第79-80页
     ·实验方法第80-83页
     ·统计学分析第83页
   ·结果第83-91页
     ·MUC1 基因沉默诱导 SMMC-7721 细胞凋亡的形态学及生化学改变第83-88页
     ·MUC1 基因沉默调节凋亡相关基因 mRNA 的表达第88-89页
     ·MUC1 基因沉默调节凋亡相关蛋白的表达及活化第89-90页
     ·免疫共沉淀分析 MUC1 与 Bax 及 caspase-8 的相互作用第90-91页
   ·讨论第91-94页
第5章 MUC1 基因沉默对SMMC-7721 细胞体内致瘤能力的影响第94-98页
   ·材料与方法第94页
     ·实验材料第94页
     ·实验方法第94页
   ·结果第94-96页
   ·讨论第96-98页
结论第98-100页
参考文献第100-114页
在学期间所取得的科研成果第114-116页
致谢第116页

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