| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-29页 |
| ·肿瘤 | 第11-14页 |
| ·肿瘤标志物 | 第11页 |
| ·肿瘤标志物的免疫分析方法 | 第11-13页 |
| ·放射免疫分析 | 第12页 |
| ·酶免疫分析 | 第12页 |
| ·时间分辨荧光免疫分析 | 第12-13页 |
| ·化学发光免疫分析 | 第13页 |
| ·电化学发光免疫分析 | 第13页 |
| ·肿瘤标志物的应用 | 第13-14页 |
| ·mRNA 表达水平的检测方法 | 第14-16页 |
| ·RT-PCR | 第14-15页 |
| ·Northern blot | 第15页 |
| ·原位杂交 | 第15页 |
| ·核糖核酸酶保护分析法 | 第15-16页 |
| ·微量剖析 | 第16页 |
| ·荧光成像 | 第16页 |
| ·基因工程工具酶 | 第16-22页 |
| ·DNA 聚合酶（DNA polymerase） | 第16-17页 |
| ·DNA 聚合酶的性质 | 第17页 |
| ·DNA 聚合酶的种类 | 第17-19页 |
| ·大肠杆菌 DNA 聚合酶 I（DNA pol I） | 第17页 |
| ·大肠杆菌 DNA 聚合酶 II（DNA pol II） | 第17页 |
| ·大肠杆菌 DNA 聚合酶（DNA pol III） | 第17-18页 |
| ·T4-DNA 聚合酶（T4-DNA pol） | 第18页 |
| ·真核生物的 DNA 聚合酶 | 第18页 |
| ·Taq DNA 聚合酶 | 第18页 |
| ·pfu DNA 聚合酶 | 第18-19页 |
| ·核酸外切酶 | 第19页 |
| ·单链的核酸外切酶 | 第19页 |
| ·大肠杆菌核酸外切酶 I（exo I） | 第19页 |
| ·核酸外切酶 VII（exoVII） | 第19页 |
| ·双链的核酸外切酶 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌核酸外切酶 III（exo III） | 第19-20页 |
| ·λ噬菌体核酸外切酶（λexo） | 第20页 |
| ·T7 噬菌体基因 6 核酸外切酶 | 第20页 |
| ·DNA 聚合酶/核酸外切酶切酶等温循环放大技术的应用 | 第20-22页 |
| ·滚环复制（rolling circle amplification，RCA） | 第22-25页 |
| ·滚环复制技术的原理 | 第22页 |
| ·滚环复制技术的应用 | 第22-25页 |
| ·RCA 在核酸测序中的应用 | 第23页 |
| ·RCA 在单核苷酸多态性检测及细胞原位检测分析中的应用 | 第23-24页 |
| ·RCA 在蛋白质芯片上的应用 | 第24-25页 |
| ·RCA 滚环复制在 DNA 微阵列中的应用 | 第25页 |
| ·量子点 | 第25-26页 |
| ·量子点（quantum dots,QDs）的基本特性 | 第25页 |
| ·量子点技术在生物成像中的应用 | 第25-26页 |
| ·光学分析法在肿瘤标志物检测中的应用 | 第26-27页 |
| ·DNA 纳米结构 | 第27-28页 |
| ·课题意义及主要研究内容 | 第28-29页 |
| 第二章 基于 DNA 轮烷结构的交叉滚环复制放大技术检测肿瘤细胞中mRNA 的研究 | 第29-44页 |
| 摘要 | 第29页 |
| ·引言 | 第29-30页 |
| ·实验部分 | 第30-35页 |
| ·主要试剂 | 第30-32页 |
| ·仪器装置 | 第32页 |
| ·细胞培养 | 第32页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第32-33页 |
| ·cDNA 的合成 | 第33页 |
| ·DNA 轮烷结构的构建 | 第33页 |
| ·mRNA 的检测 | 第33-34页 |
| ·RT-PCR | 第34页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺电泳表征 | 第34页 |
| ·CdTe 量子点的制备 | 第34-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-43页 |
| ·实验原理 | 第35-36页 |
| ·滚环复制产物引起的 DPR 向 DR 转化的表征 | 第36-37页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺电泳表征 | 第37-38页 |
| ·cDNA 检测的灵敏度 | 第38-40页 |
| ·cDNA 检测的选择性 | 第40-41页 |
| ·实际样品分析 | 第41-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第三章 基于核酸外切酶级联循环放大免标记检测 DNA 的研究 | 第44-64页 |
| 摘要 | 第44页 |
| ·引言 | 第44-45页 |
| ·实验部分 | 第45-48页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·仪器装置 | 第46-47页 |
| ·检测 DNA 的 Exo-CRA 反应 | 第47页 |
| ·光学分析法检测 | 第47页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺电泳 | 第47页 |
| ·荧光成像 | 第47-48页 |
| ·Exo-CRA 体系的条件优化 | 第48页 |
| ·反应温度对 Exo-CRA 体系的影响 | 第48页 |
| ·核酸外切酶浓度对 Exo-CRA 体系的影响 | 第48页 |
| ·反应时间对 Exo-CRA 体系的影响 | 第48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-63页 |
| ·实验原理 | 第48-50页 |
| ·Exo-III 对 Exo-CRA 分子机器的影响 | 第50-52页 |
| ·Exo-CRA 体系的条件优化 | 第52-55页 |
| ·Exo-CRA 体系反应温度的选择 | 第52-53页 |
| ·Exo-CRA 体系 Exo-III 浓度的选择 | 第53-54页 |
| ·Exo-CRA 体系反应时间的选择 | 第54-55页 |
| ·免标记检测 DNA 的灵敏度 | 第55-57页 |
| ·对照实验 | 第57-61页 |
| ·MB1基于核酸外切酶辅助的放大循环反应 | 第57-59页 |
| ·MB1对单链靶 DNA 无酶放大的检测 | 第59-61页 |
| ·免标记检测 DNA 的选择性 | 第61-62页 |
| ·实际样品分析 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表及待发表学术论文目录 | 第73-74页 |
