| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| 1. 肿瘤坏死因子的发现和分布 | 第11页 |
| 2. 肿瘤坏死因子结构 | 第11-12页 |
| 3. 肿瘤坏死因子的生物学活性及应用 | 第12-16页 |
| ·TNF与肿瘤疾病 | 第13-14页 |
| ·TNF与病毒性肝炎 | 第14页 |
| ·TNF与细菌感染性疾病 | 第14页 |
| ·TNF与寄生虫病 | 第14-15页 |
| ·TNF与糖尿病、肝病、肥胖症 | 第15页 |
| ·TNF与心血管疾病 | 第15-16页 |
| 4. 试验的目的及意义 | 第16-17页 |
| 第二章 研究内容 | 第17-53页 |
| 实验一 卡拉库尔羊TNF-α基因的克隆及序列特征性分析 | 第17-35页 |
| 1. 试验材料与方法 | 第17-25页 |
| ·试验材料 | 第17-19页 |
| ·试验方法 | 第19-25页 |
| 2. 结果 | 第25-32页 |
| ·卡拉库尔羊淋巴细胞分离 | 第25页 |
| ·卡拉库尔羊淋巴细胞总RNA完整性的鉴定 | 第25-26页 |
| ·卡拉库尔羊TNF-α基因的PCR扩增 | 第26页 |
| ·卡拉库尔羊TNF-α-pMD-18T基因的菌液PCR及酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·卡拉库尔羊TNF-α基因的序列分析 | 第27-32页 |
| 3. 讨论 | 第32-34页 |
| ·淋巴细胞分离 | 第32-33页 |
| ·RNA提取 | 第33页 |
| ·TNF-α基因的克隆 | 第33页 |
| ·TNF-α序列分析 | 第33-34页 |
| 4. 小结 | 第34-35页 |
| 实验二 卡拉库尔羊TNF-α基因原核表达载体的构建及表达 | 第35-45页 |
| 1. 试验材料和方法 | 第35-41页 |
| ·试验材料 | 第35-37页 |
| ·试验方法 | 第37-41页 |
| 2. 结果 | 第41-44页 |
| ·卡拉库尔羊TNF-α基因重组原核表达质粒的鉴定 | 第41页 |
| ·重组质粒pET-28b-TNF-α诱导表达条件优 | 第41-44页 |
| 3. 讨论 | 第44页 |
| 4. 小结 | 第44-45页 |
| 实验三 卡拉库尔羊TNF-α重组蛋白的纯化及抗原性分析 | 第45-53页 |
| 1. 试验材料和方法 | 第45-49页 |
| ·试验材料 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-49页 |
| 2. 结果 | 第49-52页 |
| ·表达产物的定性分析 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白pET-28b-TNF-α的纯化 | 第50页 |
| ·抗血清的免疫原性测定 | 第50-51页 |
| ·兔抗融合蛋白pET-28b-TNF-α血清IgG的提取纯化 | 第51页 |
| ·重组蛋白pET-28b-TNF-α的Western Blotting分析 | 第51-52页 |
| 3. 讨论 | 第52页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第52页 |
| ·融合蛋白的抗原性分析 | 第52页 |
| 4. 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
