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斑马鱼两型生长抑素受体的时空表达研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第10-17页
   ·斑马鱼作为动物实验模式生物的主要优势及特点第10页
   ·生长抑素及其在生物体中的作用第10-12页
     ·生长抑素的结构,分布及类型第10-11页
     ·生长抑素的功能第11页
     ·生长抑素的表达调控第11-12页
   ·生长抑素受体(sstr)的研究进展第12-17页
     ·生长抑素受体分类及其分布第12-13页
     ·生长抑素受体结构及功能第13-14页
     ·生长抑素受体的下游信号途径第14-15页
     ·生长抑素受体的结合特性第15-17页
第二章 前言第17-19页
   ·关于斑马鱼第17页
   ·关于生长抑素受体(SSTR)第17页
   ·研究内容及技术路线第17-19页
     ·研究内容第17-18页
     ·技术路线第18-19页
第三章 斑马鱼sstr cDNA克隆及时空表达分析第19-42页
   ·材料与试剂第19-25页
     ·实验材料第19页
     ·主要试剂第19-20页
     ·原位杂交所用试剂第20页
     ·主要试剂的配制第20-22页
     ·原位杂交试剂的配制第22-24页
     ·主要仪器设备第24-25页
   ·实验方法与步骤第25-29页
     ·总RNA的提取与检测第25页
     ·RNA甲醛变性电泳第25-26页
     ·引物设计第26页
     ·sstr1b,sstr2片段的获得第26-28页
       ·去除总RNA中少量DNA的污染第26-27页
       ·合成第一链cDNA第27页
       ·PCR扩增反应第27-28页
       ·使用凝胶成像系统拍照第28页
     ·琼脂糖电泳及胶回收第28页
     ·产物克隆第28-29页
   ·重组pCR-blunt Ⅱ-topo-sstrlb,pCR-blunt Ⅱ-topo-sstr2质粒的构建第29-31页
     ·sstr1b,sstr2基因片段的克隆第29-31页
   ·体外转录合成原位杂交用探针第31-33页
     ·pCR-blunt Ⅱ-topo-sstrlb,pCR-blunt Ⅱ-topo-sstr2质粒的提取按照上述所述步骤进行第31页
     ·质粒线性化(单酶切)第31-32页
     ·线性化质粒乙醇沉淀回收第32页
     ·体外转录合成RNA探针第32-33页
     ·RNA探针纯化回收第33页
   ·RT-PCR实验结果与分析第33-35页
     ·总RNA完整性和纯度鉴定第33-34页
     ·阳性菌液初步鉴定,菌液PCR结果第34页
     ·RT-PCR检测sstr1b,sstr mRNA在胚胎不同发育时期的表达第34-35页
   ·原位杂交实验结果分析第35-41页
     ·pCR-blunt Ⅱ-topo-sstr1b and pCR-blunt Ⅱ-topo-sstr2质粒构建结果鉴定与分析第35-36页
     ·RNA探针合成及变性电泳结果及分析第36-37页
     ·原位杂交结果及分析第37-41页
   ·结论第41-42页
参考文献第42-46页
致谢第46-47页
攻读硕士期间发表的论文第47-48页
缩略词(abbreviations)第48页

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