摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
·斑马鱼作为动物实验模式生物的主要优势及特点 | 第10页 |
·生长抑素及其在生物体中的作用 | 第10-12页 |
·生长抑素的结构,分布及类型 | 第10-11页 |
·生长抑素的功能 | 第11页 |
·生长抑素的表达调控 | 第11-12页 |
·生长抑素受体(sstr)的研究进展 | 第12-17页 |
·生长抑素受体分类及其分布 | 第12-13页 |
·生长抑素受体结构及功能 | 第13-14页 |
·生长抑素受体的下游信号途径 | 第14-15页 |
·生长抑素受体的结合特性 | 第15-17页 |
第二章 前言 | 第17-19页 |
·关于斑马鱼 | 第17页 |
·关于生长抑素受体(SSTR) | 第17页 |
·研究内容及技术路线 | 第17-19页 |
·研究内容 | 第17-18页 |
·技术路线 | 第18-19页 |
第三章 斑马鱼sstr cDNA克隆及时空表达分析 | 第19-42页 |
·材料与试剂 | 第19-25页 |
·实验材料 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·原位杂交所用试剂 | 第20页 |
·主要试剂的配制 | 第20-22页 |
·原位杂交试剂的配制 | 第22-24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·实验方法与步骤 | 第25-29页 |
·总RNA的提取与检测 | 第25页 |
·RNA甲醛变性电泳 | 第25-26页 |
·引物设计 | 第26页 |
·sstr1b,sstr2片段的获得 | 第26-28页 |
·去除总RNA中少量DNA的污染 | 第26-27页 |
·合成第一链cDNA | 第27页 |
·PCR扩增反应 | 第27-28页 |
·使用凝胶成像系统拍照 | 第28页 |
·琼脂糖电泳及胶回收 | 第28页 |
·产物克隆 | 第28-29页 |
·重组pCR-blunt Ⅱ-topo-sstrlb,pCR-blunt Ⅱ-topo-sstr2质粒的构建 | 第29-31页 |
·sstr1b,sstr2基因片段的克隆 | 第29-31页 |
·体外转录合成原位杂交用探针 | 第31-33页 |
·pCR-blunt Ⅱ-topo-sstrlb,pCR-blunt Ⅱ-topo-sstr2质粒的提取按照上述所述步骤进行 | 第31页 |
·质粒线性化(单酶切) | 第31-32页 |
·线性化质粒乙醇沉淀回收 | 第32页 |
·体外转录合成RNA探针 | 第32-33页 |
·RNA探针纯化回收 | 第33页 |
·RT-PCR实验结果与分析 | 第33-35页 |
·总RNA完整性和纯度鉴定 | 第33-34页 |
·阳性菌液初步鉴定,菌液PCR结果 | 第34页 |
·RT-PCR检测sstr1b,sstr mRNA在胚胎不同发育时期的表达 | 第34-35页 |
·原位杂交实验结果分析 | 第35-41页 |
·pCR-blunt Ⅱ-topo-sstr1b and pCR-blunt Ⅱ-topo-sstr2质粒构建结果鉴定与分析 | 第35-36页 |
·RNA探针合成及变性电泳结果及分析 | 第36-37页 |
·原位杂交结果及分析 | 第37-41页 |
·结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第47-48页 |
缩略词(abbreviations) | 第48页 |