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多壁碳纳米管生物学效应的分子机制研究

Table of Contens第1-15页
摘要第15-19页
ABSTRACT第19-24页
符号说明第24-27页
第一章 绪论第27-58页
   ·碳纳米管简介第27-32页
     ·纳米尺度、纳米科学、纳米技术以及纳米材料第27-31页
     ·碳纳米管第31-32页
   ·碳纳米管的功能化第32-35页
     ·共价功能化第32-34页
     ·非共价功能化第34-35页
   ·碳纳米管潜在的临床应用第35-43页
     ·肿瘤治疗第36-40页
       ·抗肿瘤化疗第36-38页
       ·抗肿瘤免疫治疗第38页
       ·抗肿瘤热治疗第38-40页
       ·其他肿瘤治疗策略第40页
     ·感染性疾病治疗第40-41页
     ·中枢神经系统疾病的治疗第41-42页
     ·组织工程方面的应用第42页
     ·结论第42-43页
   ·碳纳米管的生物学活性第43-49页
     ·纳米特性引起的生物学活性第44-46页
       ·诱导氧化应激第44-45页
       ·吸附蛋白第45-46页
     ·碳纳米管独特的生物学活性第46-49页
       ·石棉样效应第46-47页
       ·碳纳米管与细胞信号通路第47页
       ·碳纳米管与细胞分化第47-48页
       ·碳纳米管与细胞周期第48-49页
   ·参考文献第49-58页
第二章 纳米材料与细胞膜受体相互作用的方法学研究第58-78页
   ·引言第58-59页
   ·CNT与膜受体相互作用实验模型的构建第59-62页
   ·研究CNT-膜受体蛋白相互作用的方法第62-74页
     ·原位的邻位连接技术第62-68页
       ·实验部分第63-66页
       ·结果及讨论第66-68页
     ·焚光共振能量转移第68-71页
       ·实验部分第70-71页
     ·免疫金电镜技术第71-74页
       ·实验部分第72-74页
       ·结果及讨论第74页
   ·结论第74-76页
   ·参考文献第76-78页
第三章 羧基化多壁碳纳米管结合2型BMP受体并抑制BMP信号通路第78-99页
   ·引言第78-81页
   ·实验部分第81-86页
     ·材料与仪器第81-83页
     ·实验方法第83-86页
       ·细胞转染及荧光素酶活性检测第83-84页
       ·原位的邻位连接分析(in situ PLA)第84页
       ·荧光共振能量转移第84-85页
       ·Id1启动子活性检测第85页
       ·半定量PCR与实时定量荧光PCR第85-86页
   ·结果与讨论第86-95页
     ·MWCNT-COOH在C2C12细胞中抑制BMP信号通路第86-88页
     ·MWCNT-COOH不干扰1型BMP受体caALK2/3诱导的活性第88页
     ·MWCNT-COOH抑制BMPR1的磷酸化第88-90页
     ·MWCNT-COOH结合于BMPR2并干扰BMPR2/1二聚体形成第90-95页
       ·MWCNT-COOH不干扰配体BMP-4与受体的结合第90-91页
       ·MWCNT-COOH抑制BMPR2/1异二聚体的形成第91-92页
       ·MWCNT-COOH与BMPR2,而不是与BMPR1受体结合第92-95页
   ·结论第95-97页
   ·参考文献第97-99页
第四章 羧基化多壁碳纳米管调节bHLH转录因子功能并促进间充质干细胞分化第99-116页
   ·引言第99-101页
   ·实验部分第101-105页
     ·材料与仪器第101-103页
     ·实验方法第103-105页
       ·免疫细胞化学第103页
       ·染色质免疫沉淀(ChIP)第103-104页
       ·半定量PCR第104页
       ·启动子活性检测第104页
       ·免疫共沉淀第104-105页
       ·核融合指数计算第105页
       ·统计分析第105页
   ·结果与讨论第105-111页
     ·MWCNT-COOH调节bHLH蛋白的功能及表达第105-108页
     ·MWCNT-COOH促进bHLH二聚体的形成第108页
     ·MWCNT-COOH促进bHLH二聚体与E-box的结合第108页
     ·MWCNT-COOH增强Myogenin启动子活性第108-110页
     ·MWCNT-COOH促进Myogenin的核转移第110页
     ·MWCNT-COOH促进C2C12的成肌分化第110-111页
   ·结论第111-113页
   ·参考文献第113-116页
第五章 表面修饰的多壁碳纳米管库微调成肌细胞分化第116-133页
   ·引言第116-117页
   ·实验部分第117-122页
     ·材料与仪器第117-118页
     ·实验方法第118-122页
       ·功能化多壁碳纳米管库的制备第118-120页
       ·功能化多壁碳纳米管库对Id1与Myogenin启动子活性的筛选第120-121页
       ·功能化多壁碳纳米管对成肌分化影响的分析第121页
       ·功能化多壁碳纳米管表面化学与细胞分化效应的构效关系分析第121-122页
       ·统计分析第122页
   ·结果与讨论第122-130页
     ·多壁碳纳米管组合化学库的结构第122-124页
     ·多壁碳纳米管组合库Id1启动子活性筛选第124-126页
     ·多壁碳纳米管组合库对Myogenin启动子活性筛选第126页
     ·表面修饰的多壁碳纳米管组合化学库微调C2C12的成肌分化第126-128页
     ·功能化多壁碳纳米管表面化学与细胞分化效应的构效关系分析第128-130页
   ·结论第130-131页
   ·参考文献第131-133页
第六章 羧基化多壁碳纳米管抑制细胞凋亡第133-149页
   ·引言第133-134页
   ·实验部分第134-138页
     ·材料及器材第134-135页
     ·实验方法第135-138页
       ·末端转移酶标记第135页
       ·细胞周期分析第135-136页
       ·活性氧(ROS)检测第136页
       ·免疫细胞化学第136页
       ·Caspase-3活性检测第136页
       ·统计分析第136-138页
   ·结果与讨论第138-145页
     ·MWCNT-COOH抑制低血清诱导的细胞凋亡第138页
     ·MWCNT-COOH抑制DNA损伤剂诱导的细胞凋亡第138-141页
     ·MWCNT-COOH促进p21蛋白的表达及在线粒体上的定位第141-142页
     ·MWCNT-COOH抑制Caspase-3活性第142-145页
     ·MWCNT-COOH诱导的bHLH蛋白促进p21的表达第145页
   ·结论第145-147页
   ·参考文献第147-149页
第七章 羧基化多壁碳纳米管诱导p21介导的细胞周期阻滞第149-168页
   ·引言第149-150页
   ·实验部分第150-153页
     ·材料及器材第150-151页
     ·实验方法第151-153页
       ·细胞周期分析第151页
       ·免疫共沉淀第151-152页
       ·半定量PCR第152页
       ·免疫细胞化学第152页
       ·末端转移酶标记(TUNEL)第152-153页
       ·细胞转染及荧光素酶活性检测第153页
       ·统计分析第153页
   ·结果与讨论第153-162页
     ·MWCNT-COOH的制备与表征第153-154页
     ·MWCNT-COOH阻滞细胞周期第154-155页
     ·MWCNT-COOH诱导的p21蛋白介导细胞周期阻滞第155-158页
     ·MWCNT-COOH上调p21蛋白的mRNA表达第158页
     ·MWCNT-COOH不诱导细胞凋亡及p53表达第158-160页
     ·MWCNT-COOH诱导非p53依赖的p21表达第160-162页
     ·MWCNT-COOH诱导的p21表达依赖E-box序列且受BMP信号通路的控制第162页
   ·结论第162-164页
   ·参考文献第164-168页
第八章 总结与展望第168-170页
第九章 二维盘状纳米材料细胞摄入及细胞毒性的研究第170-186页
   ·引言第170页
   ·实验部分第170-174页
     ·材料及器材第170-171页
     ·实验方法第171-174页
       ·Nanodisks的合成第171页
       ·透射电子显微镜、动态光散射及Zeta电位检测第171-172页
       ·激光共聚焦显微镜与流式细胞检测第172页
       ·透膜实验第172-173页
       ·细胞膜磷脂双分子层的有序性检测第173页
       ·活性氧物质(ROS)检测第173页
       ·细胞凋亡检测第173-174页
       ·细胞周期分析第174页
   ·结果与讨论第174-180页
     ·Nanodisks与纳米球的单分散第174-176页
     ·Nanodisks不进入细胞第176-177页
     ·Nanodisks聚集于细胞膜第177-179页
     ·Nanodisks不诱导细胞内ROS第179页
     ·Nanodisks不导致细胞凋亡第179-180页
     ·Nanodisks不干扰细胞周期第180页
   ·结论第180-182页
   ·参考文献第182-186页
致谢第186-187页
攻读博士学位期间发表的学术论文目录第187-189页
学位论文评阅及答辩情况表第189页

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