| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·水稻病害研究进展 | 第8页 |
| ·植物抗病基因研究进展 | 第8-13页 |
| ·抗病基因分类及其保守结构域 | 第9-10页 |
| ·植物抗病基因作用机理 | 第10-11页 |
| ·抗病基因的分布及进化 | 第11-13页 |
| ·抗病基因的分布 | 第11-12页 |
| ·抗病基因的多样性选择(diversifying selection) | 第12页 |
| ·抗病基因之间的序列交换 | 第12-13页 |
| ·Type-Ⅰ和Type-Ⅱ的进化机制 | 第13页 |
| ·抗病基因克隆 | 第13-15页 |
| ·转座子标签法(transposon tagging) | 第13-14页 |
| ·图位克隆法(Map-based cloning) | 第14页 |
| ·候选基因克隆植物抗病基因 | 第14-15页 |
| ·水稻遗传转化 | 第15-16页 |
| ·植物转基因技术 | 第15-16页 |
| ·农杆菌介导转化机制和特点 | 第16页 |
| ·RNA干涉(RNAi) | 第16-18页 |
| ·RNAi概况 | 第17页 |
| ·RNAi机制 | 第17-18页 |
| ·RNAi的特点及应用 | 第18页 |
| ·本研究的主要内容及意义 | 第18-20页 |
| 2 水稻中NBS-LRR同源基因分布和进化分析 | 第20-25页 |
| ·材料和方法 | 第20-22页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·序列数据 | 第20页 |
| ·水稻中全基因组分析 | 第20-21页 |
| ·同源基因结构分析 | 第21-22页 |
| ·结果与分析 | 第22-25页 |
| ·水稻中NBS类抗病基因的分类 | 第22-23页 |
| ·Type-Ⅰ和Type-Ⅱ类抗病基因的分析 | 第23-25页 |
| 3 转基因 | 第25-43页 |
| ·材料与方法 | 第25-35页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·菌株和载体 | 第25页 |
| ·水稻DNA提取(CTAB法) | 第25-26页 |
| ·引物设计以及PCR反应 | 第26页 |
| ·PCR产物回收和克隆 | 第26-27页 |
| ·RNAi载体构建 | 第27-31页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·质粒DNA酶切与连接 | 第28-29页 |
| ·农杆菌感受态的制备与转化 | 第29-30页 |
| ·农杆菌电击转化 | 第30-31页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第31-33页 |
| ·转基因植物的PCR检测 | 第33页 |
| ·水稻基因组DNA抽提 | 第33页 |
| ·PCR检测 | 第33页 |
| ·RT-PCR表达分析 | 第33-35页 |
| ·水稻RNA抽提 | 第33-34页 |
| ·RNA反转录以及PCR反应体系 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-43页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·RNAi载体构建 | 第35-39页 |
| ·水稻转基因 | 第39-41页 |
| ·转基因植株阳性检测及RT-PCR结果分析 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| ·水稻全基因组抗病基因分析 | 第43页 |
| ·水稻抗病基因RNAi沉默系的构建 | 第43-44页 |
| ·水稻中抗病基因克隆的应用及展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录 | 第51-64页 |
| 1 引物序列(RNAi载体构建的引物) | 第51-54页 |
| 2 PCR凝胶产物回收 | 第54-55页 |
| 3 连接产物的化学转化 | 第55-56页 |
| 4 农杆菌介导的转化 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 在读期间参与发表的论文 | 第65页 |
