| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 目录 | 第13-15页 |
| 图片目录 | 第15-17页 |
| 表格目录 | 第17-18页 |
| 缩略词 | 第18-20页 |
| 前言 | 第20-24页 |
| 第一部分 新生SD鼠心肌成纤维细胞和心肌细胞原代培养及鉴定 | 第24-33页 |
| 1 材料与仪器 | 第24-26页 |
| ·试剂及配制 | 第24-25页 |
| ·主要仪器和设备 | 第25-26页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-28页 |
| ·心肌成纤维细胞和心肌细胞原代培养 | 第26-27页 |
| ·心肌成纤维细胞传代培养 | 第27页 |
| ·心肌细胞及心肌成纤维细胞鉴定 | 第27-28页 |
| ·统计学方法 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-29页 |
| ·细胞形态学观察 | 第28-29页 |
| ·细胞免疫化学染色 | 第29页 |
| 4 讨论 | 第29-33页 |
| ·心肌成纤维细胞和心肌细胞的原代培养和分离 | 第30-31页 |
| ·心肌成纤维细胞和心肌细胞的鉴定 | 第31-33页 |
| 第二部分 CVB3感染心肌成纤维细胞和心肌细胞模型的建立 | 第33-44页 |
| 1 材料与仪器 | 第33-34页 |
| ·细胞及病毒来源 | 第33页 |
| ·仪器与设备 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-36页 |
| ·实验设想 | 第34页 |
| ·病毒扩增 | 第34页 |
| ·在Hela细胞上进行病毒滴度测定 | 第34-35页 |
| ·检测CVB3感染心肌细胞50%组织感染率(TCID50) | 第35页 |
| ·CVB3感染心肌成纤维细胞模型的建立 | 第35页 |
| ·CVB3感染心肌细胞模型的建立 | 第35-36页 |
| ·电镜标本制作 | 第36页 |
| ·统计学方法 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-41页 |
| ·CVB3在Hela细胞上扩增并进行病毒滴度测定 | 第36-37页 |
| ·CVB3感染心肌细胞TCID50测定 | 第37-38页 |
| ·心肌成纤维细胞感染CVB3后细胞形态学改变 | 第38页 |
| ·心肌成纤维细胞感染CVB3后病毒蛋白mRNA的表达 | 第38-39页 |
| ·心肌细胞感染CVB3后细胞形态学改变 | 第39页 |
| ·心肌细胞感染CVB3后培养上清液心肌酶的变化 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·病毒种类与动物品种的选择 | 第41页 |
| ·CVB3感染心肌细胞模型的建立 | 第41-42页 |
| ·CVB3感染心肌成纤维细胞模型的建立 | 第42-44页 |
| 第三部分 雷帕霉素对CVB3感染的心肌成纤维细胞和心肌细胞mTOR、eIF-4E、Ⅰ型胶原及Smad3表达的影响 | 第44-70页 |
| 1 材料与仪器 | 第44-46页 |
| ·细胞和病毒来源 | 第44页 |
| ·仪器与设备 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44-46页 |
| ·PCR引物序列和产物长度 | 第46页 |
| 2 实验方法 | 第46-49页 |
| ·实验分组 | 第46页 |
| ·RT-PCR方法 | 第46-47页 |
| ·Western Blot检测方法 | 第47-48页 |
| ·MTT实验方法 | 第48-49页 |
| ·细胞免疫组化染色 | 第49页 |
| ·统计学方法 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-63页 |
| ·雷帕霉素对心肌成纤维细胞mTOR表达的影响 | 第49-51页 |
| ·CVB3诱导心肌成纤维细胞增殖 | 第51-52页 |
| ·雷帕霉素对CVB3感染的心肌成纤维细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
| ·雷帕霉素对CVB3感染的心肌成纤维细胞mTOR表达的影响 | 第53-55页 |
| ·雷帕霉素对CVB3感染的心肌成纤维细胞eIF-4E表达的影响 | 第55-56页 |
| ·雷帕霉素对CVB3感染的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原表达的影响 | 第56-57页 |
| ·雷帕霉素对CVB3感染的心肌成纤维细胞Smad3表达的影响 | 第57-58页 |
| ·雷帕霉素对CVB3感染的心肌细胞mTOR表达的影响 | 第58-60页 |
| ·雷帕霉素对CVB3感染的心肌细胞eIF-4E表达的影响 | 第60-61页 |
| ·雷帕霉素对CVB3感染的心肌细胞Ⅰ型胶原的影响 | 第61-62页 |
| ·雷帕霉素对CVB3感染的心肌细胞Smad3表达的影响 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-70页 |
| ·雷帕霉素使心肌成纤维细胞内源性mTOR表达下调 | 第64页 |
| ·雷帕霉素通过mTOR/eIF-4E信号通路抑制CVB3诱导的心肌成纤维细胞增殖 | 第64-66页 |
| ·雷帕霉素使CVB3诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原表达下调 | 第66-67页 |
| ·雷帕霉素使CVB3诱导的心肌成纤维细胞Smad3的表达下调 | 第67-68页 |
| ·雷帕霉素对CVB3诱导的心肌细胞mTOR、eIF-4E、Ⅰ型胶原及Smad3表达的影响 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-86页 |
| 综述 mTOR信号转导通路与心肌纤维化 | 第86-97页 |
| 附图 | 第97-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 在读期间的主要研究成果 | 第103-104页 |
