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东亚飞蝗Parental RNAi技术体系建立以及hunchback基因功能研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
缩略词第11-12页
1 绪论第12-40页
   ·研究意义与背景第12-13页
   ·RNAi 技术的研究进展第13-24页
     ·RNAi 研究的历史及概况第14-15页
     ·RNAi 的作用机制第15-17页
     ·系统性RNAi第17-19页
     ·昆虫RNAi 技术第19-21页
     ·RNAi 的生物学功能第21-22页
     ·RNAi 技术的应用第22-24页
   ·hunchback 基因的研究进展第24-32页
     ·昆虫胚胎发育的基因调控第24-28页
     ·hunchback 基因的结构第28-29页
     ·hunchback 基因的调控功能第29-31页
     ·hunchback 基因的突变表型第31-32页
   ·小结第32-33页
   ·研究目标和整体思路第33页
     ·研究目标第33页
     ·整体思路第33页
   ·研究内容和技术路线第33-35页
     ·东亚飞蝗hunchback 基因的克隆及序列分析第33-34页
     ·东亚飞蝗hunchback 基因的表达第34页
     ·东亚飞蝗hunchback 基因的parental RNAi第34-35页
     ·东亚飞蝗RNAi 效果评价第35页
   ·本研究的创新性第35-40页
2 材料和方法第40-58页
   ·材料第40-41页
     ·供试昆虫第40页
     ·菌株第40页
     ·主要仪器设备第40页
     ·主要试剂第40-41页
   ·溶液配制第41-44页
   ·东亚飞蝗hunchback 基因克隆第44-50页
     ·hunchback 片段的PCR 扩增、克隆及序列测定第44-47页
     ·3’RACE 和5’RACE 克隆hunchback 基因3’端和5’端cDNA 序列第47-50页
   ·东亚飞蝗RNAi第50-53页
     ·dsRNA 的合成第50-52页
     ·dsRNA 的注射第52-53页
   ·东亚飞蝗胚胎制备以及免疫组织化学染色第53-54页
     ·胚胎的收集第53页
     ·胚胎制备第53页
     ·胚胎免疫组织化学染色第53-54页
   ·hunchback 基因的Northern Blot 分析第54-56页
     ·胚胎总RNA 的提取第54-55页
     ·Northern 杂交第55-56页
   ·Hunchback 蛋白的ELISA 检测第56-58页
     ·胚胎总蛋白的提取第56页
     ·ELISA第56-58页
3 结果与分析第58-78页
   ·东亚飞蝗hunchback 基因克隆和分析第58-65页
     ·东亚飞蝗hunchback 基因片段的克隆和分析第58-59页
     ·5’RACE 和3’RACE 克隆hunchback 基因5’端和3’端cDNA 序列第59-60页
     ·东亚飞蝗hunchback 基因的分析第60-65页
   ·东亚飞蝗胚胎体节模式的形成第65-67页
   ·hunchback 基因的表达第67-69页
   ·东亚飞蝗parental RNAi第69-74页
     ·DNA 模板第69页
     ·dsRNA 的制备第69页
     ·东亚飞蝗parental RNAi第69-70页
     ·parental RNAi 效果的Northern Blot 和ELISA 分析第70-72页
     ·parental RNAi 表型分析第72-74页
   ·Parental RNAi 影响因素的研究第74-78页
     ·不同注射剂量的影响第74-75页
     ·RNAi 作用的持续性第75-77页
     ·不同长度dsRNA 的影响第77-78页
4 讨论第78-92页
   ·东亚飞蝗parental RNAi第78-80页
     ·parental RNAi 方法的选择第78-79页
     ·东亚飞蝗parental RNAi 的特异性第79-80页
     ·东亚飞蝗parental RNAi 的高效性第80页
     ·东亚飞蝗parental RNAi 作用的持续性第80页
   ·影响东亚飞蝗parental RNAi 的因素第80-82页
     ·注射时间第80-81页
     ·注射剂量第81页
     ·dsRNA 的长度第81-82页
   ·东亚飞蝗parental RNAi 效果的评价第82页
   ·东亚飞蝗RNAi 的应用及展望第82-83页
   ·东亚飞蝗hunchback 基因的功能第83-86页
     ·hunchback 基因在颌部、胸部的作用第83-85页
     ·hunchback 基因在腹部的作用第85-86页
   ·hunchback 基因功能的进化第86-92页
     ·hunchback 基因可能在低等昆虫中起着更重要的作用第86-88页
     ·hunchback 基因氮端锌指因子功能的进化第88-92页
5 结论第92-94页
致谢第94-96页
参考文献第96-108页
附录第108-115页
 A 博士期间论文发表情况第108-110页
 B 用于转录dsRNA 的hunchback 基因片段的同源性比对结果第110-115页

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