中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
缩略词 | 第11-12页 |
1 绪论 | 第12-40页 |
·研究意义与背景 | 第12-13页 |
·RNAi 技术的研究进展 | 第13-24页 |
·RNAi 研究的历史及概况 | 第14-15页 |
·RNAi 的作用机制 | 第15-17页 |
·系统性RNAi | 第17-19页 |
·昆虫RNAi 技术 | 第19-21页 |
·RNAi 的生物学功能 | 第21-22页 |
·RNAi 技术的应用 | 第22-24页 |
·hunchback 基因的研究进展 | 第24-32页 |
·昆虫胚胎发育的基因调控 | 第24-28页 |
·hunchback 基因的结构 | 第28-29页 |
·hunchback 基因的调控功能 | 第29-31页 |
·hunchback 基因的突变表型 | 第31-32页 |
·小结 | 第32-33页 |
·研究目标和整体思路 | 第33页 |
·研究目标 | 第33页 |
·整体思路 | 第33页 |
·研究内容和技术路线 | 第33-35页 |
·东亚飞蝗hunchback 基因的克隆及序列分析 | 第33-34页 |
·东亚飞蝗hunchback 基因的表达 | 第34页 |
·东亚飞蝗hunchback 基因的parental RNAi | 第34-35页 |
·东亚飞蝗RNAi 效果评价 | 第35页 |
·本研究的创新性 | 第35-40页 |
2 材料和方法 | 第40-58页 |
·材料 | 第40-41页 |
·供试昆虫 | 第40页 |
·菌株 | 第40页 |
·主要仪器设备 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40-41页 |
·溶液配制 | 第41-44页 |
·东亚飞蝗hunchback 基因克隆 | 第44-50页 |
·hunchback 片段的PCR 扩增、克隆及序列测定 | 第44-47页 |
·3’RACE 和5’RACE 克隆hunchback 基因3’端和5’端cDNA 序列 | 第47-50页 |
·东亚飞蝗RNAi | 第50-53页 |
·dsRNA 的合成 | 第50-52页 |
·dsRNA 的注射 | 第52-53页 |
·东亚飞蝗胚胎制备以及免疫组织化学染色 | 第53-54页 |
·胚胎的收集 | 第53页 |
·胚胎制备 | 第53页 |
·胚胎免疫组织化学染色 | 第53-54页 |
·hunchback 基因的Northern Blot 分析 | 第54-56页 |
·胚胎总RNA 的提取 | 第54-55页 |
·Northern 杂交 | 第55-56页 |
·Hunchback 蛋白的ELISA 检测 | 第56-58页 |
·胚胎总蛋白的提取 | 第56页 |
·ELISA | 第56-58页 |
3 结果与分析 | 第58-78页 |
·东亚飞蝗hunchback 基因克隆和分析 | 第58-65页 |
·东亚飞蝗hunchback 基因片段的克隆和分析 | 第58-59页 |
·5’RACE 和3’RACE 克隆hunchback 基因5’端和3’端cDNA 序列 | 第59-60页 |
·东亚飞蝗hunchback 基因的分析 | 第60-65页 |
·东亚飞蝗胚胎体节模式的形成 | 第65-67页 |
·hunchback 基因的表达 | 第67-69页 |
·东亚飞蝗parental RNAi | 第69-74页 |
·DNA 模板 | 第69页 |
·dsRNA 的制备 | 第69页 |
·东亚飞蝗parental RNAi | 第69-70页 |
·parental RNAi 效果的Northern Blot 和ELISA 分析 | 第70-72页 |
·parental RNAi 表型分析 | 第72-74页 |
·Parental RNAi 影响因素的研究 | 第74-78页 |
·不同注射剂量的影响 | 第74-75页 |
·RNAi 作用的持续性 | 第75-77页 |
·不同长度dsRNA 的影响 | 第77-78页 |
4 讨论 | 第78-92页 |
·东亚飞蝗parental RNAi | 第78-80页 |
·parental RNAi 方法的选择 | 第78-79页 |
·东亚飞蝗parental RNAi 的特异性 | 第79-80页 |
·东亚飞蝗parental RNAi 的高效性 | 第80页 |
·东亚飞蝗parental RNAi 作用的持续性 | 第80页 |
·影响东亚飞蝗parental RNAi 的因素 | 第80-82页 |
·注射时间 | 第80-81页 |
·注射剂量 | 第81页 |
·dsRNA 的长度 | 第81-82页 |
·东亚飞蝗parental RNAi 效果的评价 | 第82页 |
·东亚飞蝗RNAi 的应用及展望 | 第82-83页 |
·东亚飞蝗hunchback 基因的功能 | 第83-86页 |
·hunchback 基因在颌部、胸部的作用 | 第83-85页 |
·hunchback 基因在腹部的作用 | 第85-86页 |
·hunchback 基因功能的进化 | 第86-92页 |
·hunchback 基因可能在低等昆虫中起着更重要的作用 | 第86-88页 |
·hunchback 基因氮端锌指因子功能的进化 | 第88-92页 |
5 结论 | 第92-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-108页 |
附录 | 第108-115页 |
A 博士期间论文发表情况 | 第108-110页 |
B 用于转录dsRNA 的hunchback 基因片段的同源性比对结果 | 第110-115页 |