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表达FMDV vp1基因和山羊γ-干扰素基因的重组山羊痘病毒的构建及其生物学特性研究

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 绪论第15-42页
   ·羊痘及羊痘病毒第15-23页
     ·羊痘概况第15-18页
     ·羊痘病毒的生物学特性第18-23页
   ·重组痘病毒的研究第23-31页
     ·构建重组病毒的原则第24页
     ·构建重组病毒的方法第24-28页
     ·提高重组病毒免疫效力的策略第28-29页
     ·羊痘病毒作为病毒载体的优点第29-30页
     ·重组羊痘病毒的研究现状第30-31页
   ·口蹄疫病毒及其新型疫苗的研究第31-34页
     ·口蹄疫病毒基因组的基本结构第31页
     ·口蹄疫病毒的型及亚型第31页
     ·口蹄疫病毒基因组的开放阅读框(ORF)及其功能第31-33页
     ·口蹄疫新型疫苗的研究第33-34页
   ·传染性疾病的TH1/TH2 模式及其疫苗设计的指导意义第34-40页
     ·传染性疾病Th1/Th2 模式的划分依据第35-36页
     ·Th1/Th2 应答模式与选择性诱生HI或CI的关系第36页
     ·病原体诱生的Th1/Th2 应答及其对疾病预后的影响第36-37页
     ·Th1/Th2 应答模式对疫苗设计的指导意义第37-40页
   ·研究的目的和意义第40-42页
第二章 山羊干扰素-γ的克隆、原核表达及其抗血清的制备第42-60页
   ·材料与方法第43-44页
     ·实验动物第43页
     ·载体与受体菌第43页
     ·酶类及主要生化试剂第43页
     ·引物第43页
     ·主要仪器设备第43-44页
   ·实验方法第44-52页
     ·目的基因的克隆第44-48页
     ·目的基因的原核表达第48-51页
     ·抗血清的制备第51-52页
   ·结果与分析第52-57页
     ·RT-PCR产物的鉴定结果第52-53页
     ·重组质粒的酶切鉴定第53页
     ·CapIFN-γ基因序列测定结果第53页
     ·CapIFN-γ的序列分析结果第53-54页
     ·重组表达质粒的PCR鉴定结果第54-55页
     ·重组表达质粒的酶切鉴定结果第55-56页
     ·融合蛋白的纯化及SDS-PAGE分析第56页
     ·融合蛋白多克隆抗血清的制备及检测第56-57页
   ·讨论第57-60页
第三章 共表达口蹄疫病毒VP1 基因和山羊IFN-γ基因的重组山羊痘病毒的构建及其生物学特性研究第60-86页
   ·材料与方法第61-66页
     ·细胞与毒株第61页
     ·载体与菌株第61页
     ·生化试剂及试剂盒第61页
     ·主要仪器设备第61页
     ·引物设计第61-62页
     ·犊牛睾丸细胞的制备第62页
     ·vp1 基因的PCR扩增第62页
     ·转移载体的构建第62-63页
     ·转染和重组病毒筛选第63-64页
     ·重组病毒的鉴定第64-65页
     ·重组病毒的生物学特征第65-66页
   ·结果第66-80页
     ·vp1 基因的PCR扩增第66页
     ·转移载体pTK-VP- IFNγ的构建与鉴定第66-69页
     ·重组病毒的纯化与鉴定第69-73页
     ·重组病毒的生物学特性第73-80页
   ·讨论第80-86页
     ·口蹄疫活载体疫苗的研究第80页
     ·VP1 是FMDV最主要的抗原蛋白第80-81页
     ·重组活载体疫苗的构建第81-82页
     ·重组病毒的筛选与鉴定第82-83页
     ·启动子的调控作用第83-84页
     ·IFN-γ的抗病毒作用对重组病毒的影响第84-86页
第四章 结论第86-87页
参考文献第87-101页
附录第101-105页
致谢第105-106页
作者简历第106页
攻读博士学位期间发表的学术论文第106页

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