| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第12-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-32页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的概述 | 第13-18页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的病原学 | 第13-15页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的流行病学 | 第15页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的危害 | 第15-16页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的检测和诊断 | 第16-17页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的防制 | 第17-18页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌毒力因子的研究进展 | 第18-23页 |
| ·外毒素 | 第18-21页 |
| ·荚膜多糖 | 第21-22页 |
| ·脂多糖 | 第22页 |
| ·外膜蛋白 | 第22-23页 |
| ·转铁结合蛋白 | 第23页 |
| ·原核细胞骨架蛋白的结构和功能概述 | 第23-29页 |
| ·原核细胞骨架蛋白的结构与功能 | 第23-29页 |
| ·mre操纵子研究进展 | 第29页 |
| ·信号标签突变(STM)技术 | 第29-32页 |
| ·STM技术的原理 | 第29-30页 |
| ·STM技术的应用 | 第30-32页 |
| 第2章 胸膜肺炎放线杆菌mre操纵子的结构分析 | 第32-39页 |
| ·研究目的及意义 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·寡核甘酸引物 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·细菌的增殖 | 第34页 |
| ·细菌PCR模板制备 | 第34-35页 |
| ·PCR扩增 | 第35页 |
| ·mre操纵子结构分析 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-38页 |
| ·mre操纵子结构分析及比较 | 第36-37页 |
| ·mre操纵子完整性的验证 | 第37-38页 |
| ·结论及讨论 | 第38-39页 |
| 第3章 胸膜肺炎放线杆菌血清1型4074株mre操纵子突变体构建 | 第39-64页 |
| ·目的及意义 | 第39页 |
| ·实验材料 | 第39-43页 |
| ·菌株和质粒 | 第39-40页 |
| ·寡核甘酸引物 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第41-42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-53页 |
| ·细菌的增殖 | 第43页 |
| ·细菌PCR模板制备 | 第43-44页 |
| ·PCR扩增 | 第44页 |
| ·限制性酶切 | 第44页 |
| ·从凝胶中回收目的片段 | 第44-45页 |
| ·DNA片断的连接 | 第45页 |
| ·感受态的制备及转化 | 第45页 |
| ·碱裂解法小量制备质粒DNA | 第45-46页 |
| ·APP4074电转感受态细胞的制备及电转化 | 第46页 |
| ·重组质粒的构建 | 第46-49页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第49页 |
| ·突变菌株的筛选和鉴定 | 第49-50页 |
| ·细菌RNA提取 | 第50-51页 |
| ·反转录PCR | 第51页 |
| ·突变菌株荧光定量PCR检测 | 第51-52页 |
| ·细菌生长特性检测 | 第52页 |
| ·细菌表型特征检测 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-62页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第53-57页 |
| ·mre操纵子突变体的构建及鉴定 | 第57-59页 |
| ·所获得的mre操纵子系列突变株 | 第59页 |
| ·mre操纵子系列突变株对APP4074生长的影响 | 第59-60页 |
| ·mre操纵子系列突变株对APP4074细胞形态的影响 | 第60-61页 |
| ·荧光定量检测基因表达 | 第61-62页 |
| ·结论及讨论 | 第62-64页 |
| 第4章 胸膜肺炎放线杆菌STM突变体库的构建 | 第64-79页 |
| ·目的及意义 | 第64-65页 |
| ·实验材料 | 第65-69页 |
| ·菌株与质粒 | 第65页 |
| ·培养基和抗生素的配置 | 第65-66页 |
| ·寡聚核甘酸引物 | 第66-67页 |
| ·酶和试剂 | 第67页 |
| ·特异性标签 | 第67-68页 |
| ·其他试剂 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-74页 |
| ·细菌的培养和抗性诱导 | 第69页 |
| ·质粒pLOF/Km tag1-48的增殖与保存 | 第69-70页 |
| ·细菌结合实验及抗性筛选 | 第70-71页 |
| ·突变体的PCR鉴定 | 第71-72页 |
| ·突变体的Southern Blot分析 | 第72-74页 |
| ·突变体的冻干保存 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-76页 |
| ·两亲本结合和三亲本结合方法的比较 | 第74-75页 |
| ·不同APP菌株结合转座效率比较 | 第75页 |
| ·突变体获取及鉴定 | 第75-76页 |
| ·突变体库的构建 | 第76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| ·关于萘啶酸抗性菌株的获得 | 第77页 |
| ·关于结合转移试验方法 | 第77页 |
| ·关于突变体的构建 | 第77-79页 |
| 小结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
