| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-27页 |
| ·改良植物种子中营养品质的方法概述 | 第12-17页 |
| ·蛋白质序列的修饰 | 第13-14页 |
| ·人工合成优质蛋白基因 | 第14页 |
| ·异源优质蛋白基因的转移和过量表达 | 第14-15页 |
| ·同源优质蛋白基因的过量表达 | 第15-16页 |
| ·增加游离的必需氨基酸的含量 | 第16页 |
| ·基因工程技术提高水稻种子中赖氨酸含量的研究进展 | 第16-17页 |
| ·高等植物中赖氨酸的生物合成与分解代谢 | 第17-23页 |
| ·赖氨酸的合成代谢途径 | 第17-20页 |
| ·植物中的氮同化过程及天冬氨酸的合成 | 第18页 |
| ·天冬氨酸途径（Aspartate family pathway） | 第18-20页 |
| ·赖氨酸的分解代谢途径 | 第20-23页 |
| ·代谢工程提高植物中赖氨酸含量的研究进展 | 第23-26页 |
| ·增加赖氨酸的生物合成 | 第23-24页 |
| ·降低赖氨酸的生物分解 | 第24-25页 |
| ·增加赖氨酸的生物合成，同时降低赖氨酸的生物降解 | 第25页 |
| ·提高植物中赖氨酸含量的其他途径 | 第25-26页 |
| ·植物中赖氨酸含量增加后的负效应 | 第26页 |
| ·本研究的主要目的 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-37页 |
| ·实验材料 | 第27-30页 |
| ·植物材料 | 第27-30页 |
| ·PCR 引物 | 第30页 |
| ·化学试剂 | 第30页 |
| ·水稻总 DNA 和总 RNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·微量总DNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·大量总DNA 的提取 | 第31页 |
| ·总RNA 的提取 | 第31页 |
| ·潮霉素抗性鉴定 | 第31页 |
| ·PCR 分析 | 第31-32页 |
| ·地高辛标记DNA 探针的制备 | 第32页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第32页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第32-33页 |
| ·GUS 活性分析 | 第33页 |
| ·组织化学染色分析 | 第33页 |
| ·荧光定量测定 | 第33页 |
| ·稻米样品的前处理 | 第33页 |
| ·水稻种子氨基酸含量分析 | 第33-34页 |
| ·稻米垩白度的测定 | 第34页 |
| ·稻米理化品质性状的测定 | 第34-36页 |
| ·直链淀粉含量的测定 | 第34-35页 |
| ·胶稠度的测定 | 第35页 |
| ·糊化温度的测定 | 第35页 |
| ·淀粉粘滞性谱（RVA）的测定 | 第35-36页 |
| ·种子蛋白质含量的测定 | 第36页 |
| ·凯氏定氮法测定 | 第36页 |
| ·近红外光谱法测定 | 第36页 |
| ·田间性状调查 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-63页 |
| ·水稻赖氨酸降解关键酶基因LKR/SDH 启动子的表达特性 | 第37-43页 |
| ·纯合转基因水稻植株的筛选及其鉴定 | 第37-38页 |
| ·3.9-kb 长启动子驱动的GUS 融合基因的表达特性 | 第38-41页 |
| ·GUS 融合基因在不同组织中的表达 | 第38-40页 |
| ·GUS 融合基因在萌发种子中的表达 | 第40-41页 |
| ·不同长度缺失的启动子-GUS 融合基因的表达特性 | 第41-43页 |
| ·含赖氨酸代谢相关基因转基因纯合系的选育及鉴定 | 第43-46页 |
| ·转基因水稻的分子鉴定及纯合系筛选 | 第43-45页 |
| ·无抗性选择标记转基因水稻的筛选及鉴定 | 第45-46页 |
| ·转基因水稻胚乳中目的基因的表达 | 第46-47页 |
| ·转基因稻米中的赖氨酸含量 | 第47-50页 |
| ·转 AK 和DHPS 基因成熟种子中的赖氨酸含量 | 第47-49页 |
| ·转LKR/SDH RNAi 结构成熟种子中的赖氨酸含量 | 第49-50页 |
| ·同时转入 AK/DHPS 基因和 LKR /SDH RNAi 基因成熟种子的赖氨酸含量 | 第50页 |
| ·转基因稻米中其他氨基酸和蛋白质含量的变化 | 第50-54页 |
| ·总氨基酸含量和总蛋白质含量的变化 | 第50-52页 |
| ·对种子中其他氨基酸含量的影响 | 第52-54页 |
| ·转基因水稻成熟种子的外观品质表现 | 第54-55页 |
| ·转基因植株成熟稻米的理化品质 | 第55-61页 |
| ·常规理化品质表现 | 第55-57页 |
| ·稻米淀粉的粘滞性谱特性 | 第57-61页 |
| ·田间实验与农艺性状 | 第61-63页 |
| 4 小结与讨论 | 第63-66页 |
| ·研究小结 | 第63-64页 |
| ·来源于大肠杆菌的AK 和DHPS 基因的共同表达 | 第64页 |
| ·降低LKR/SDH 基因的表达以提高游离赖氨酸的含量 | 第64页 |
| ·AK、DHPS 基因和 LKR /SDH RNAi 基因的共同表达 | 第64-65页 |
| ·研究展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
