中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-27页 |
1 油酸的价值 | 第12页 |
2 植物脂肪酸合成途径与油酸的生物合成 | 第12-15页 |
·植物脂肪酸的一般合成途径 | 第12-13页 |
·油脂的合成 | 第13-14页 |
·油脂中油酸的合成与积累 | 第14-15页 |
3 与油酸积累相关的两个关键脱氢酶 | 第15-21页 |
·硬脂酰ACP 脱氢酶(SAD) | 第15-18页 |
·SAD 基因及其编码的氨基酸 | 第15-16页 |
·SAD 的结构与特征 | 第16页 |
·SAD 的表达与功能 | 第16-18页 |
·微粒体△~(12) 脂肪酸脱氢酶(delta 12 fatty acid desaturase, Δ~(12)FAD 或FAD2 | 第18-21页 |
·FAD2 基因 | 第18-19页 |
·FAD2 的性质和结构 | 第19-20页 |
·FAD2 促成高油酸性状的分子基础 | 第20-21页 |
4 高油酸油料作物的遗传改良 | 第21-27页 |
·基因工程遗传改良 | 第21-22页 |
·分子标记辅助选育 | 第22-27页 |
·几种常用的DNA 分子标记原理及特点 | 第22-24页 |
·分子标记在高油酸油料作物遗传育种中的应用 | 第24-27页 |
第二部分 实验论文 | 第27-69页 |
第一章 花生硬脂酰ACP 脱氢酶(SAD)基因的克隆和分析 | 第27-57页 |
一、材料和方法 | 第27-42页 |
1 实验材料 | 第27-33页 |
·植物材料 | 第27-28页 |
·菌株和质粒 | 第28页 |
·试剂和培养基 | 第28-32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·引物序列 | 第32-33页 |
2 实验方法 | 第33-42页 |
·基本分子生物学实验 | 第33-37页 |
·AhSAD 基因的克隆 | 第37页 |
·花生AhSAD1 基因的生物信息学分析 | 第37-38页 |
·基于半定量RT-PCR 的AhSAD1 的表达分析 | 第38-39页 |
·AhSAD1 基因过量表达载体的构建 | 第39-40页 |
·农杆菌介导的转化 | 第40-42页 |
二、结果与分析 | 第42-54页 |
1 花生AhSAD 基因的克隆及分析 | 第42-49页 |
·花生AhSAD 基因的克隆和序列分析 | 第42-45页 |
·AhSAD1-1 和AhSAD1-2 编码多肽的特性分析 | 第45页 |
·AhSAD1-1 和AhSAD1-2 编码蛋白的同源性分析 | 第45-48页 |
·AhSAD1 基因的表达分析 | 第48-49页 |
2 过量表达AhSAD1 植物表达载体的构建与验证 | 第49-51页 |
·植物表达载体的构建 | 第49-50页 |
·植物表达载体的酶切验证 | 第50-51页 |
3 烟草、花生的遗传转化 | 第51-54页 |
·烟草遗传转化及转基因植株检测 | 第51-52页 |
·花生遗传转化及转基因植株检测 | 第52-54页 |
三讨论 | 第54-57页 |
第二章 花生AHFAD2 基因的多态性及其与籽粒油酸 | 第57-69页 |
一、材料与方法 | 第58-60页 |
1 实验材料 | 第58页 |
·植物材料 | 第58页 |
·菌株及质粒 | 第58页 |
·试剂、培养基和主要仪器设备 | 第58页 |
·引物序列 | 第58页 |
2 实验方法 | 第58-60页 |
·RNA 提取和cDNA 合成 | 第58页 |
·目的基因扩增 | 第58-59页 |
·PCR 产物的回收、克隆与测序 | 第59页 |
·序列分析 | 第59页 |
·花生种子脂肪酸组分的分析 | 第59-60页 |
二、结果与分析 | 第60-65页 |
1 AhFAD2 基因编码区有效序列的确定 | 第60页 |
2 AhFAD2 基因转录本的分类及差异分析 | 第60-63页 |
3 AhFAD2A 和AhFAD2B在不同品种中的多态性 | 第63-64页 |
4 花生脂肪酸组分的测定结果 | 第64-65页 |
三、讨论 | 第65-68页 |
1 O/L 比值性状的遗传基础 | 第65-66页 |
2 AhFAD2 基因的多态性与O/L 比值之间的相关性 | 第66-67页 |
3 假基因功能的相关探讨 | 第67-68页 |
四 结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
硕士期间发表的论文 | 第78页 |