| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-30页 |
| ·转基因作物的发展概况及Bt 抗虫植物基因工程的研究进展 | 第13-18页 |
| ·转基因作物的发展概况 | 第13-15页 |
| ·全球转基因作物种植情况 | 第13-14页 |
| ·我国转基因作物的研究与商业化 | 第14-15页 |
| ·Bt 抗虫植物基因工程的研究进展 | 第15-18页 |
| ·基因产品的安全性问题 | 第18-21页 |
| ·转基因产品的安全性问题引起争议 | 第18-19页 |
| ·转基因产品对人体健康可能产生影响 | 第19-20页 |
| ·转基因产品对环境生态可能产生影响 | 第20-21页 |
| ·有关国家对转基因产品的标识管理制度 | 第21-22页 |
| ·转基因植物及其产品检测方法研究进展 | 第22-28页 |
| ·转基因产品检测方法建立的基础 | 第22页 |
| ·检测方法 | 第22-28页 |
| ·核酸水平上的检测 | 第23-25页 |
| ·Southern 杂交检测方法 | 第23页 |
| ·基因芯片检测方法 | 第23页 |
| ·PCR 检测方法 | 第23-25页 |
| ·蛋白质水平上的检测 | 第25-28页 |
| ·Western 杂交检测方法 | 第25-26页 |
| ·ELISA 方法 | 第26-27页 |
| ·试纸条检侧方法 | 第27-28页 |
| ·本研究的目的意义、研究内容及技术路线 | 第28-30页 |
| ·目的意义 | 第28-29页 |
| ·研究内容 | 第29页 |
| ·技术路线 | 第29-30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-49页 |
| ·材料 | 第30-33页 |
| ·供试菌株 | 第30页 |
| ·酶和生化试剂 | 第30页 |
| ·实验所用试剂配制 | 第30-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| ·标准物质的制备 | 第33-38页 |
| ·Bt 质粒提取 | 第33-34页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·目的片段的扩增及纯化 | 第34-35页 |
| ·目的片段与载体的酶切 | 第35-36页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第36页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·重组载体的转化 | 第36-37页 |
| ·转化子的筛选 | 第37页 |
| ·重组载体的检测 | 第37-38页 |
| ·表达菌株的筛选 | 第38页 |
| ·标准物质 | 第38页 |
| ·Bt-CryⅠAc 蛋白的制备 | 第38-39页 |
| ·Bt-CryⅠAc 蛋白的粗提 | 第38-39页 |
| ·Bt 蛋白的纯化-胶回收法 | 第39页 |
| ·Bt-CryⅠAc 蛋白兔多克隆抗体的制备 | 第39-41页 |
| ·新西兰大白兔的免疫 | 第39-40页 |
| ·兔血清抗体的提取 | 第40页 |
| ·兔血清抗体的纯化 | 第40页 |
| ·兔血清抗体效价检测 | 第40-41页 |
| ·兔血清抗体免疫印迹（Western Blot）检测 | 第41页 |
| ·Bt-CryⅠAc 蛋白卵黄多克隆抗体的制备 | 第41-44页 |
| ·产蛋鸡的免疫 | 第41-42页 |
| ·卵黄抗体提取 | 第42页 |
| ·卵黄抗体透析 | 第42页 |
| ·卵黄抗体的纯化 | 第42-43页 |
| ·T-gel 的制备 | 第42页 |
| ·卵黄抗体T-gel 的纯化 | 第42-43页 |
| ·卵黄抗体效价检测 | 第43页 |
| ·卵黄抗体免疫印迹（Western Blot）检测 | 第43-44页 |
| ·双抗夹心ELISA 的建立 | 第44-46页 |
| ·抗体包被液的优化 | 第44页 |
| ·封闭液的优化 | 第44-45页 |
| ·包被抗体和检测抗体的优化 | 第45页 |
| ·样品缓冲液的优化 | 第45-46页 |
| ·双抗夹心ELISA 灵敏度检测 | 第46页 |
| ·胶体金免疫层析检测技术研究 | 第46-49页 |
| ·胶体金的制备 | 第46页 |
| ·抗体的胶体金标记 | 第46-48页 |
| ·胶体金标记抗体的最佳pH 值的测定 | 第46-47页 |
| ·使胶体金稳定的抗体加入量的测定 | 第47页 |
| ·金标抗体的制备 | 第47-48页 |
| ·金标抗体稀释度的确定 | 第48页 |
| ·硝酸纤维膜上检测抗体稀释度的确定 | 第48页 |
| ·检测免疫层析技术的灵敏度 | 第48页 |
| ·检测免疫层析试纸条对转基因植物的检测 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-67页 |
| ·标准物质的制备结果 | 第49-55页 |
| ·Bt 质粒DNA 的提取样品的检测 | 第49页 |
| ·CryAb/c 片段的PCR 扩增及纯化 | 第49-50页 |
| ·CryAb/c 与载体pET30a（+）的连接 | 第50页 |
| ·连接产物的转化和重组载体的检测 | 第50-53页 |
| ·CryAb/c 表达菌株的筛选 | 第53-54页 |
| ·标准物质的制备结果 | 第54-55页 |
| ·Bt-CryⅠAc 蛋白的制备结果 | 第55-56页 |
| ·Bt-CryⅠAc 蛋白兔多克隆抗体的制备 | 第56-57页 |
| ·兔血清抗体的纯化 | 第56页 |
| ·Bt-CryⅠAc 蛋白兔血清抗体的制备 | 第56-57页 |
| ·兔血清抗体免疫印迹（Western Blot）检测结果 | 第57页 |
| ·Bt-CryⅠAc 蛋白卵黄多克隆抗体的制备 | 第57-59页 |
| ·卵黄抗体的纯化 | 第57-58页 |
| ·Bt-CryⅠAc 蛋白卵黄抗体的制备 | 第58页 |
| ·卵黄抗体免疫印迹（Western Blot）检测结果 | 第58-59页 |
| ·定量检测技术：双抗夹心法的建立 | 第59-61页 |
| ·包被液的优化 | 第59页 |
| ·样品缓冲液的优化 | 第59-60页 |
| ·双抗夹心ELISA 法条件优化结果 | 第60页 |
| ·双抗夹心ELISA 灵敏度检测 | 第60-61页 |
| ·胶体金免疫层析检测技术研究 | 第61-67页 |
| ·胶体金制备结果 | 第61-63页 |
| ·抗体的胶体金标记 | 第63-64页 |
| ·胶体金标记抗体的最佳pH 值的测定结果 | 第63页 |
| ·使胶体金稳定的抗体加入量的测定结果 | 第63-64页 |
| ·胶体金标记质量的测定 | 第64页 |
| ·金标抗体稀释度的确定 | 第64-65页 |
| ·免疫层析技术的灵敏度检测结果 | 第65页 |
| ·免疫层析试纸条对转基因植物的检测结果 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| ·标准物质的制备 | 第67页 |
| ·Bt 菌株2411、2414 质粒DNA 的提取 | 第67页 |
| ·标准物质 | 第67页 |
| ·抗原的制备 | 第67-68页 |
| ·检测灵敏度 | 第68-70页 |
| 5 结论 | 第70-71页 |
| ·免疫原的制备 | 第70页 |
| ·兔血清多克隆抗体的制备 | 第70页 |
| ·卵黄多克隆抗体的制备 | 第70页 |
| ·双抗夹心 ELISA 的建立 | 第70页 |
| ·建立免疫层析检测试纸条 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
