主要缩略语英文索引 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
前言 | 第12-15页 |
第一部分 HIL-24 基因的克隆及原核表达载体的构建 | 第15-25页 |
实验材料 | 第15-16页 |
1. 菌株、载体 | 第15页 |
2. 主要实验试剂 | 第15-16页 |
·酶类、分子量标准及试剂盒 | 第15-16页 |
·其他试剂 | 第16页 |
3. 仪器设备 | 第16页 |
实验方法 | 第16-21页 |
1. HIL-24 基因的选取 | 第16-17页 |
2. HIL-24 基因的扩增 | 第17-21页 |
实验结果 | 第21-24页 |
1. hIL-24 基因的扩增 | 第21页 |
2. 重组质粒的双酶切鉴定及PCR 鉴定 | 第21-22页 |
3. hIL-24 基因序列的测定结果及Blast 分析 | 第22-24页 |
讨论 | 第24-25页 |
第二部分 PQE30-HIL24 在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定 | 第25-34页 |
实验材料 | 第25-26页 |
1. 菌株 | 第25页 |
2. 试剂盒 | 第25页 |
3. 其他试剂及材料 | 第25-26页 |
实验方法 | 第26-29页 |
1. pQE30-hIL24 在大肠杆菌中的表达及SDS-PAGE 鉴定 | 第26-27页 |
2. 重组蛋白的纯化和Western-blot 鉴定 | 第27-29页 |
实验结果 | 第29-33页 |
1. 重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达和鉴定 | 第29-31页 |
·不同诱导时间对重组蛋白表达的影响 | 第29-30页 |
·不同IPTG 诱导剂量对重组蛋白表达的影响 | 第30-31页 |
·重组蛋白存在状态分析 | 第31页 |
2. 重组蛋白的纯化 | 第31-32页 |
3. 表达、纯化及复性重组蛋白的Western-blot 鉴定 | 第32-33页 |
讨论 | 第33-34页 |
第三部分 RHIL-24 诱导THP-1 细胞分泌炎症性细胞因子及肿瘤细胞凋亡作用 | 第34-43页 |
实验材料 | 第34-35页 |
1. 仪器设备 | 第34-35页 |
2. 细胞株 | 第35页 |
3. 主要试剂 | 第35页 |
·主要试剂盒 | 第35页 |
·培养基 | 第35页 |
·培养瓶和培养板 | 第35页 |
实验方法 | 第35-37页 |
1. 细胞培养 | 第35-36页 |
2. 细胞因子的检测 | 第36页 |
3. 细胞凋亡检测 | 第36-37页 |
4. 统计学分析 | 第37页 |
实验结果 | 第37-41页 |
1. 细胞因子的检测结果 | 第37-39页 |
2. 细胞凋亡的检测结果 | 第39-41页 |
讨论 | 第41-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录 | 第48-50页 |
IL-24 基因与肿瘤免疫治疗 | 第50-58页 |
研究成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |