| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 符号及缩略语 | 第13-15页 |
| 第一篇 综述部分 | 第15-43页 |
| 第一章 传染性海绵状脑病研究简况 | 第17-33页 |
| 1 传染性海绵状脑病简史 | 第17-18页 |
| 2 疯牛病概况 | 第18-22页 |
| ·BSE的危害性 | 第18-20页 |
| ·BSE的临床症状 | 第20-21页 |
| ·BSE的流行病学 | 第21-22页 |
| 3 羊痒病(Scrapie)概况 | 第22-23页 |
| ·Scrapie的流行病学 | 第23页 |
| ·Scrapie的主要症状和病变 | 第23页 |
| 4 TSE的检测方法 | 第23-33页 |
| ·TSE的临床表现 | 第23-24页 |
| ·TSE的病理组织学和免疫学检测 | 第24-33页 |
| 第二章 朊毒体及朊蛋白的分子特征 | 第33-43页 |
| 1 朊蛋白(PrP~c)分子遗传学特征 | 第33-36页 |
| ·编码基因 | 第33页 |
| ·PrP~c的结构和特性 | 第33-35页 |
| ·PrP~c的可能功能 | 第35-36页 |
| 2 朊毒体(PrP~(S_c)的特性 | 第36-39页 |
| ·耐受性和致病特征 | 第37页 |
| ·PrP~c与PrP~(S_c)的差异(表2-1) | 第37-38页 |
| ·致病力 | 第38页 |
| ·PrP~(S_c)的形成假说 | 第38-39页 |
| 3 致病机制 | 第39-43页 |
| ·分类 | 第40页 |
| ·分子致病机制 | 第40-43页 |
| 第二篇 试验部分 | 第43-99页 |
| 第三章 小尾寒羊PrP27-30的克隆与表达 | 第45-53页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·实验仪器 | 第46-47页 |
| ·引物 | 第47页 |
| ·小尾寒羊PrP27-30表达质粒PrP-pET-32a的构建 | 第47-48页 |
| ·小尾寒羊PrP27-30融合蛋白Trx-PrP27-30诱导表达 | 第48-49页 |
| ·重组融合蛋白的纯化及回收 | 第49页 |
| 2 结果 | 第49-50页 |
| ·小尾寒羊PrP27-30的诱导表达 | 第49-50页 |
| ·重组融合蛋白的纯化 | 第50页 |
| ·Western blotting鉴定小尾寒羊PrP27-30 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-53页 |
| 第四章 小尾寒羊PrP27-30特异性单克隆抗体的制备 | 第53-63页 |
| 1 材料与方法 | 第54-57页 |
| ·试剂 | 第54页 |
| ·动物免疫 | 第54页 |
| ·骨髓瘤细胞SP2/0的准备 | 第54页 |
| ·细胞融合 | 第54-56页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第56页 |
| ·制备腹水单抗 | 第56-57页 |
| ·单抗特异性鉴定 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-59页 |
| ·阳性杂交瘤细胞筛选结果 | 第57-58页 |
| ·单抗特异性鉴定结果 | 第58页 |
| ·6株单抗与健康小尾寒羊脑组织中PrP°反应结果 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-63页 |
| 第五章 小尾寒羊PrP27-30特异性单克隆抗体抗原结合位点的初步鉴定 | 第63-73页 |
| 1 材料与方法 | 第64-66页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-71页 |
| ·分段表达PrP27-30基因序列的扩增 | 第66-67页 |
| ·分段表达PrP27-30阳性质粒的构建 | 第67-68页 |
| ·小尾寒羊PrP27-30分段融合表达 | 第68页 |
| ·小尾寒羊单抗抗原结合位点的鉴定 | 第68-71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| 第六章 小尾寒羊PrP27-30特异性单克隆抗体免疫学特性分析 | 第73-83页 |
| 1 材料与方法 | 第74页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·方法 | 第74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-80页 |
| ·Scrapie单抗的亚类分型 | 第74-76页 |
| ·Scrapie单抗的ELISA反应特性 | 第76页 |
| ·Scrapie特异性单抗的Western blotting反应特性 | 第76-77页 |
| ·Scrapie特异性单抗的IHC反应特性 | 第77-80页 |
| 3 讨论 | 第80-83页 |
| 第七章 羊痒病免疫组织化学检测方法的建立及在中国部分省份的监测 | 第83-91页 |
| 1 材料与方法 | 第84页 |
| ·IHC检测方法的建立 | 第84页 |
| ·中国部分省区Scrapie监测 | 第84页 |
| 2 结果 | 第84-91页 |
| ·Scrapie IHC染色方法的建立 | 第84-85页 |
| ·中国部分省区Scrapie监测结果 | 第85-91页 |
| 第八章 一株能区别牛、羊PrP的单抗2H3的特性分析 | 第91-99页 |
| 1 材料与方法 | 第92-93页 |
| ·突变融合表达小尾寒羊208位点 | 第92-93页 |
| ·2H3单抗抗原结合位点主要结合氨基酸的鉴定 | 第93页 |
| 2 结果 | 第93-97页 |
| ·抗原结合位点的BLAST比对结果 | 第93-94页 |
| ·点突变小尾寒羊PrP208位点融合表达 | 第94-95页 |
| ·Western blotting方法鉴定2H3抗原结合位点主要结合氨基酸 | 第95-97页 |
| 3 讨论 | 第97-99页 |
| 附录 | 第99-109页 |
| 全文总结 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-125页 |
| 致谢 | 第125-127页 |
| 发表论文 | 第127页 |
