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Pseudomonas mosselii E1和P.pseudoalcaligenes B50铁载体合成相关基因的克隆及功能初步分析

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
第一章 绪论第11-36页
   ·铁的生理机能和铁的生物有效性第11页
   ·微生物铁载体的作用第11-12页
   ·微生物铁载体的种类与结构第12-14页
   ·微生物铁载体的合成及相关基因第14-26页
     ·微生物铁载体的合成过程第14-16页
     ·pyochelin 的合成及相关基因第16-18页
     ·pyoverdin 的合成及相关基因第18-19页
     ·enterobactin 的合成及相关基因第19-21页
     ·vibriobactin 的合成及相关基因第21-23页
     ·anguibactin 的合成及相关基因第23-24页
     ·yersiniabactin 的合成及相关基因第24-25页
     ·影响微生物铁载体合成的因素第25-26页
   ·微生物从铁载体获取铁的机制第26-29页
   ·微生物铁载体的研究方法第29-31页
   ·转座子诱变第31-32页
   ·本研究的目的意义第32页
   ·研究内容、技术路线及方法第32-36页
第二章 Pseudomonas pseudoalcaligenes B50 和Pseudomonas mosseliiE1 的鉴定及其铁载体合成缺失突变株的筛选第36-55页
   ·前言第36-37页
   ·材料和方法第37-48页
     ·菌株与质粒第37页
     ·培养基与培养液第37-38页
     ·实验试剂第38-40页
     ·方法第40-48页
       ·铁载体产生菌 B50 和 E1 的生理生化鉴定第40页
       ·药敏试验第40页
       ·铁载体定性检测第40-41页
       ·转座子诱变第41页
       ·接合子的保存第41-42页
       ·基因组 DNA 的提取第42页
       ·琼脂糖凝胶电泳第42-43页
       ·DNA 凝胶回收第43页
       ·DNA 浓度的确定第43页
       ·铁载体产生菌的鉴定第43-44页
       ·PCR产物的纯化第44-45页
       ·碱裂解法小量提取质粒第45页
       ·CaCl_2法制备新鲜的 DH5α感受态细胞第45-46页
       ·luxA PCR 验证第46页
       ·PCR 产物克隆第46-47页
       ·克隆中插入片断的验证第47-48页
   ·结果第48-54页
     ·棉花根际铁载体产生细菌的药敏试验第48页
     ·铁载体产生细菌的鉴定第48-52页
     ·铁载体合成缺失突变株的筛选第52-54页
   ·讨论第54-55页
第三章 Pseudomonas mosselii E1 铁载体合成相关基因cysI 的克隆及功能初步分析第55-67页
   ·前言第55-56页
   ·材料与方法第56-59页
     ·菌株与质粒第56页
     ·培养基与培养液及试剂第56页
     ·方法第56-59页
       ·TAIL-PCR 引物的设计第56-58页
       ·TAIL-PCR 反应体系的设计第58-59页
       ·TAIL-PCR 反应条件的设计第59页
   ·结果第59-65页
     ·转座子 Tn5-1063a 右侧翼序列的获得第59-61页
     ·转座子 Tn5-1063a 左侧翼序列的获得第61页
     ·cysI 序列的获得第61-63页
     ·cysI 序列分析第63-65页
     ·cysI 的功能验证第65页
   ·讨论第65-67页
第四章 Pseudomonas pseudoalcaligenes B50 铁载体合成相关基因pyrD 的克隆及功能初步分析第67-76页
   ·引言第67-68页
   ·材料和方法第68页
     ·菌株与质粒第68页
     ·培养基与培养液及试剂第68页
     ·方法第68页
   ·结果第68-75页
     ·转座子 Tn5-1063a 右侧翼序列的获得第68-69页
     ·转座子 Tn5-1063a 左侧翼序列的获得第69-70页
     ·pyrD 序列的获得第70-74页
     ·pyrD 序列分析第74页
     ·pyrD 的功能验证第74-75页
   ·讨论第75-76页
第五章 Pseudomonas pseudoalcaligenes B50 铁载体合成相关基因1elA 片段的克隆第76-81页
   ·引言第76-77页
   ·材料和方法第77页
     ·菌株与质粒第77页
     ·培养基与培养液及试剂第77页
     ·方法第77页
   ·结果第77-80页
     ·转座子 Tn5-1063a 右侧翼序列的获得第77-78页
     ·转座子 Tn5-1063a 左侧翼序列的获得第78-79页
     ·relA 部分序列的获得第79-80页
   ·讨论第80-81页
第六章 结论及建议第81-82页
   ·结论第81页
   ·尚待完成的工作第81-82页
参考文献第82-93页
致谢第93-94页
攻读学位期间发表的论文第94页

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