中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一章 绪论 | 第11-36页 |
·铁的生理机能和铁的生物有效性 | 第11页 |
·微生物铁载体的作用 | 第11-12页 |
·微生物铁载体的种类与结构 | 第12-14页 |
·微生物铁载体的合成及相关基因 | 第14-26页 |
·微生物铁载体的合成过程 | 第14-16页 |
·pyochelin 的合成及相关基因 | 第16-18页 |
·pyoverdin 的合成及相关基因 | 第18-19页 |
·enterobactin 的合成及相关基因 | 第19-21页 |
·vibriobactin 的合成及相关基因 | 第21-23页 |
·anguibactin 的合成及相关基因 | 第23-24页 |
·yersiniabactin 的合成及相关基因 | 第24-25页 |
·影响微生物铁载体合成的因素 | 第25-26页 |
·微生物从铁载体获取铁的机制 | 第26-29页 |
·微生物铁载体的研究方法 | 第29-31页 |
·转座子诱变 | 第31-32页 |
·本研究的目的意义 | 第32页 |
·研究内容、技术路线及方法 | 第32-36页 |
第二章 Pseudomonas pseudoalcaligenes B50 和Pseudomonas mosseliiE1 的鉴定及其铁载体合成缺失突变株的筛选 | 第36-55页 |
·前言 | 第36-37页 |
·材料和方法 | 第37-48页 |
·菌株与质粒 | 第37页 |
·培养基与培养液 | 第37-38页 |
·实验试剂 | 第38-40页 |
·方法 | 第40-48页 |
·铁载体产生菌 B50 和 E1 的生理生化鉴定 | 第40页 |
·药敏试验 | 第40页 |
·铁载体定性检测 | 第40-41页 |
·转座子诱变 | 第41页 |
·接合子的保存 | 第41-42页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第42页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第42-43页 |
·DNA 凝胶回收 | 第43页 |
·DNA 浓度的确定 | 第43页 |
·铁载体产生菌的鉴定 | 第43-44页 |
·PCR产物的纯化 | 第44-45页 |
·碱裂解法小量提取质粒 | 第45页 |
·CaCl_2法制备新鲜的 DH5α感受态细胞 | 第45-46页 |
·luxA PCR 验证 | 第46页 |
·PCR 产物克隆 | 第46-47页 |
·克隆中插入片断的验证 | 第47-48页 |
·结果 | 第48-54页 |
·棉花根际铁载体产生细菌的药敏试验 | 第48页 |
·铁载体产生细菌的鉴定 | 第48-52页 |
·铁载体合成缺失突变株的筛选 | 第52-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
第三章 Pseudomonas mosselii E1 铁载体合成相关基因cysI 的克隆及功能初步分析 | 第55-67页 |
·前言 | 第55-56页 |
·材料与方法 | 第56-59页 |
·菌株与质粒 | 第56页 |
·培养基与培养液及试剂 | 第56页 |
·方法 | 第56-59页 |
·TAIL-PCR 引物的设计 | 第56-58页 |
·TAIL-PCR 反应体系的设计 | 第58-59页 |
·TAIL-PCR 反应条件的设计 | 第59页 |
·结果 | 第59-65页 |
·转座子 Tn5-1063a 右侧翼序列的获得 | 第59-61页 |
·转座子 Tn5-1063a 左侧翼序列的获得 | 第61页 |
·cysI 序列的获得 | 第61-63页 |
·cysI 序列分析 | 第63-65页 |
·cysI 的功能验证 | 第65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
第四章 Pseudomonas pseudoalcaligenes B50 铁载体合成相关基因pyrD 的克隆及功能初步分析 | 第67-76页 |
·引言 | 第67-68页 |
·材料和方法 | 第68页 |
·菌株与质粒 | 第68页 |
·培养基与培养液及试剂 | 第68页 |
·方法 | 第68页 |
·结果 | 第68-75页 |
·转座子 Tn5-1063a 右侧翼序列的获得 | 第68-69页 |
·转座子 Tn5-1063a 左侧翼序列的获得 | 第69-70页 |
·pyrD 序列的获得 | 第70-74页 |
·pyrD 序列分析 | 第74页 |
·pyrD 的功能验证 | 第74-75页 |
·讨论 | 第75-76页 |
第五章 Pseudomonas pseudoalcaligenes B50 铁载体合成相关基因1elA 片段的克隆 | 第76-81页 |
·引言 | 第76-77页 |
·材料和方法 | 第77页 |
·菌株与质粒 | 第77页 |
·培养基与培养液及试剂 | 第77页 |
·方法 | 第77页 |
·结果 | 第77-80页 |
·转座子 Tn5-1063a 右侧翼序列的获得 | 第77-78页 |
·转座子 Tn5-1063a 左侧翼序列的获得 | 第78-79页 |
·relA 部分序列的获得 | 第79-80页 |
·讨论 | 第80-81页 |
第六章 结论及建议 | 第81-82页 |
·结论 | 第81页 |
·尚待完成的工作 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第94页 |