英文缩略词表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-13页 |
英文摘要 | 第13-19页 |
前言 | 第19-22页 |
第一部分 构建稳定表达趋化因子受体5 的细胞株 | 第22-30页 |
试剂和仪器 | 第22-25页 |
1 主要试剂 | 第22-23页 |
2 主要试剂配制 | 第23-24页 |
3 主要仪器 | 第24-25页 |
实验方法 | 第25-27页 |
1 CCR5 表达质粒的鉴定 | 第25页 |
2 稳定转染HEK-293 细胞 | 第25-26页 |
3 流式细胞仪鉴定稳定表达CCR5 的细胞 | 第26-27页 |
实验结果 | 第27-30页 |
1 CCR5 表达质粒酶切鉴定及测序 | 第27-29页 |
2 流式细胞仪鉴定稳定表达CCR5 的细胞 | 第29-30页 |
第二部分 趋化因子受体5 激活后的细胞蛋白质组学研究 | 第30-44页 |
试剂和仪器 | 第30-34页 |
1 主要试剂 | 第30-31页 |
2 主要试剂配制 | 第31-34页 |
3 主要仪器 | 第34页 |
实验方法 | 第34-38页 |
1 细胞样品 | 第34-35页 |
2 双向电泳实验 | 第35-37页 |
3 图谱分析 | 第37页 |
4 质谱鉴定 | 第37-38页 |
实验结果 | 第38-44页 |
1 双向电泳图谱分析 | 第38-41页 |
2 质谱鉴定结果 | 第41-44页 |
第三部分 趋化因子受体5 的激活促进超氧化物歧化酶的表达 | 第44-55页 |
试剂和仪器 | 第44-46页 |
1.主要试剂 | 第44-45页 |
2 主要试剂配制 | 第45-46页 |
3 主要仪器 | 第46页 |
实验方法 | 第46-52页 |
1 RT-PCR 法初步鉴定表达差异蛋白质 | 第46-48页 |
2 Western Blot 实验验证CCR5 的激活促进SOD 的表达 | 第48-51页 |
3 CCR5 对SOD 表达的促进作用与MAPK 途径有关 | 第51-52页 |
实验结果 | 第52-55页 |
1 RT-PCR 结果 | 第52-53页 |
2 CCR5 的激活促进SOD 的表达 | 第53页 |
3 CCR5 对SOD 表达的促进作用与MAPK 途径有关 | 第53-55页 |
第四部分 趋化因子受体5 与配体作用激活人外周血单核细胞来源的巨噬细胞并促进超氧化物歧化酶的表达 | 第55-65页 |
试剂和仪器 | 第55-56页 |
1 主要试剂 | 第55页 |
2 主要试剂配制 | 第55-56页 |
3 主要仪器 | 第56页 |
实验方法 | 第56-61页 |
1 巨噬细胞的获得 | 第56-57页 |
2 巨噬细胞中 CCR5 的激活对 SOD 表达的影响 | 第57-58页 |
3 细胞内 ROS 的测定 | 第58页 |
4 巨噬细胞分泌 TNF-α的影响 | 第58-60页 |
5 巨噬细胞分泌 NO 的影响 | 第60-61页 |
实验结果 | 第61-65页 |
1 流式细胞仪鉴定人外周血单核细胞来源的巨噬细胞表面CCR5 的表达 | 第61-62页 |
2 MDM 中 CCR5 的激活促进 SOD-1 的表达 | 第62页 |
3 RANTES 对 MDM 中 ROS 产生的影响 | 第62-63页 |
4 RANTES 对 MDM 中 TNF-α 分泌的影响 | 第63-64页 |
5 RANTES 刺激 MDM 分泌 NO | 第64-65页 |
讨论 | 第65-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
附录一 文献综述 | 第83-103页 |
附件 | 第103-115页 |