第一章 文献综述 | 第1-26页 |
·弹性蛋白酶的研究现状 | 第10-16页 |
·弹性蛋白酶的来源和分布 | 第10-12页 |
·弹性蛋白酶的研究概况 | 第12-15页 |
·弹性蛋白酶的应用 | 第15-16页 |
·昆虫杆状病毒表达载体系统研究现状 | 第16-26页 |
·杆状病毒概论 | 第16-20页 |
·杆状病毒表达载体系统的原理及研究进展 | 第20-22页 |
·杆状病毒表达载体系统的应用及其前景 | 第22-26页 |
第二章 引言 | 第26-30页 |
·研究目的和意义 | 第26-27页 |
·主要研究内容 | 第27-28页 |
·弹性蛋白酶基因的克隆 | 第27页 |
·表达载体的构建 | 第27页 |
·弹性蛋白酶的表达情况 | 第27页 |
·弹性蛋白酶的特性研究 | 第27-28页 |
·技术路线: | 第28-30页 |
第三章 材料与方法 | 第30-44页 |
·材料 | 第30-31页 |
·质粒、菌株及病毒载体 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·主要仪器与设备 | 第30-31页 |
·常用试剂配制 | 第31页 |
·方法 | 第31-44页 |
·弹性蛋白酶基因的克隆 | 第31-35页 |
·重组转移载体的构建 | 第35-39页 |
·重组转移载体导入受体细胞 | 第39-40页 |
·弹性蛋白酶在SF21细胞中的表达 | 第40-44页 |
第四章 实验结果与分析 | 第44-58页 |
·弹性蛋白酶基因的克隆及鉴定 | 第44-46页 |
·弹性蛋白酶基因的PCR扩增结果 | 第44页 |
·PCR产物的T-A克隆及鉴定 | 第44-46页 |
·转移载体的构建 | 第46-49页 |
·中间载体质粒pET28a-Ela的筛选及鉴定 | 第46-47页 |
·转移载体质粒pBacPAK8-His-Ela的筛选及鉴定 | 第47-49页 |
·细胞转染及外源基因的表达 | 第49-53页 |
·转染后不同时期GFP的表达情况 | 第49-51页 |
·重组病毒对细胞的感染 | 第51-52页 |
·感毒细胞的形态差异 | 第52-53页 |
·表达产物的检测 | 第53-58页 |
·以感毒细胞DNA为模板的PCR扩增 | 第53-54页 |
·SDS-PAGE检测目的蛋白的表达 | 第54页 |
·细胞裂解液酶活的测定 | 第54-55页 |
·表达产物的时程分析 | 第55-56页 |
·表达产物的酶学特性测定 | 第56-58页 |
第五章 结论与讨论 | 第58-62页 |
·结论 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读硕士学位期间发表论文及参与课题情况 | 第67页 |