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铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因的克隆及在昆虫细胞中的表达研究

第一章 文献综述第1-26页
   ·弹性蛋白酶的研究现状第10-16页
     ·弹性蛋白酶的来源和分布第10-12页
     ·弹性蛋白酶的研究概况第12-15页
     ·弹性蛋白酶的应用第15-16页
   ·昆虫杆状病毒表达载体系统研究现状第16-26页
     ·杆状病毒概论第16-20页
     ·杆状病毒表达载体系统的原理及研究进展第20-22页
     ·杆状病毒表达载体系统的应用及其前景第22-26页
第二章 引言第26-30页
   ·研究目的和意义第26-27页
   ·主要研究内容第27-28页
     ·弹性蛋白酶基因的克隆第27页
     ·表达载体的构建第27页
     ·弹性蛋白酶的表达情况第27页
     ·弹性蛋白酶的特性研究第27-28页
   ·技术路线:第28-30页
第三章 材料与方法第30-44页
   ·材料第30-31页
     ·质粒、菌株及病毒载体第30页
     ·试剂第30页
     ·主要仪器与设备第30-31页
     ·常用试剂配制第31页
   ·方法第31-44页
     ·弹性蛋白酶基因的克隆第31-35页
     ·重组转移载体的构建第35-39页
     ·重组转移载体导入受体细胞第39-40页
     ·弹性蛋白酶在SF21细胞中的表达第40-44页
第四章 实验结果与分析第44-58页
   ·弹性蛋白酶基因的克隆及鉴定第44-46页
     ·弹性蛋白酶基因的PCR扩增结果第44页
     ·PCR产物的T-A克隆及鉴定第44-46页
   ·转移载体的构建第46-49页
     ·中间载体质粒pET28a-Ela的筛选及鉴定第46-47页
     ·转移载体质粒pBacPAK8-His-Ela的筛选及鉴定第47-49页
   ·细胞转染及外源基因的表达第49-53页
     ·转染后不同时期GFP的表达情况第49-51页
     ·重组病毒对细胞的感染第51-52页
     ·感毒细胞的形态差异第52-53页
   ·表达产物的检测第53-58页
     ·以感毒细胞DNA为模板的PCR扩增第53-54页
     ·SDS-PAGE检测目的蛋白的表达第54页
     ·细胞裂解液酶活的测定第54-55页
     ·表达产物的时程分析第55-56页
     ·表达产物的酶学特性测定第56-58页
第五章 结论与讨论第58-62页
   ·结论第58-59页
   ·讨论第59-62页
参考文献第62-66页
致谢第66-67页
攻读硕士学位期间发表论文及参与课题情况第67页

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