第一章 前言 | 第1-35页 |
一 乙型肝炎病毒概述 | 第10-17页 |
1 乙型肝炎的流行病学和临床症状 | 第10-11页 |
2 乙型肝炎病毒的分子生物学 | 第11-13页 |
3 乙型肝炎病毒感染和致病机理 | 第13-17页 |
二 治疗性HBV疫苗的研究现状 | 第17-24页 |
1 治疗性HBV DNA疫苗的历史 | 第17-19页 |
2 重组MVA病毒疫苗的研究进展 | 第19-20页 |
3 “prime-boost”免疫策略的优势 | 第20-24页 |
三 细胞因子佐剂的研究进展 | 第24-34页 |
1 细胞因子概述 | 第24页 |
2 细胞因子在疫苗中的应用 | 第24-25页 |
3 细胞因子的佐剂效应 | 第25-32页 |
4 小结 | 第32-34页 |
四 本论文的设计思想 | 第34-35页 |
第二章 实验材料和方法 | 第35-63页 |
一 材料、仪器和溶液 | 第35-39页 |
1 材料 | 第35-36页 |
2 仪器 | 第36-37页 |
3 溶液 | 第37-39页 |
二 治疗性HBV DNA疫苗的构建及研究 | 第39-45页 |
1 治疗性HBV DNA疫苗的构建 | 第39-42页 |
2 治疗性HBV DNA疫苗在真核细胞中的表达分析 | 第42-43页 |
3 质粒的大规模提取 | 第43-45页 |
三 重组痘病毒疫苗的构建与研究 | 第45-49页 |
1 重组痘病毒疫苗的构建 | 第45-46页 |
2 重组痘病毒疫苗的鉴定 | 第46-47页 |
3 重组痘病毒疫苗的扩增和纯化 | 第47页 |
4 重组痘病毒滴度测定 | 第47-49页 |
四 DNA-prime/MVA-boost混合免疫与单独免疫的比较 | 第49-55页 |
1 动物试验设计 | 第49页 |
2 抗体水平检测 | 第49页 |
3 CTL实验 | 第49-52页 |
4 ELISPOT实验 | 第52-55页 |
五 细胞因子对治疗性HBV疫苗免疫应答的影响 | 第55-60页 |
1 比较IL-2蛋白和质粒对治疗性HBV疫苗免疫应答的影响 | 第55-56页 |
2 比较不同细胞因子对治疗性HBV疫苗的增强作用 | 第56-58页 |
3 GM-CSF和IL-2联合应用对治疗性HBV疫苗免疫应答的影响 | 第58-60页 |
六 治疗性HBV疫苗对转基因小鼠的治疗作用 | 第60-63页 |
1 动物实验设计 | 第60页 |
2 表面抗原水平检测 | 第60页 |
3 表面抗体水平的检测 | 第60页 |
4 HBV病毒定量 | 第60-62页 |
5 CTL实验 | 第62页 |
6 转氨酶检测 | 第62页 |
7 病理切片 | 第62-63页 |
第三章 结果与讨论 | 第63-95页 |
一 治疗性HBV DNA疫苗的构建 | 第63-67页 |
1 获得表面抗原基因 | 第63页 |
2 表面抗原基因连接到pGEM-T easy载体上 | 第63-64页 |
3 表面抗原基因连接到真核表达载体VR1012上 | 第64-65页 |
4 治疗性HBV DNA疫苗pVR1012/HBs表达蛋白的鉴定 | 第65页 |
5 质粒的大规模提取 | 第65页 |
6 小结 | 第65-67页 |
二 重组痘病毒疫苗的构建、表达及鉴定 | 第67-72页 |
1 MVA病毒重组穿梭质粒的构建 | 第67-68页 |
2 重组痘病毒的筛选 | 第68-69页 |
3 重组病毒的PCR鉴定 | 第69页 |
4 重组病毒表面抗原的表达 | 第69-70页 |
5 病毒滴度测定 | 第70页 |
6 小结 | 第70-72页 |
三 DNA-prime/MVA-boost混合免疫与单独免疫的比较 | 第72-76页 |
1 MVA boost对DNA疫苗体液免疫的影响 | 第72-73页 |
2 MVA boost对DNA疫苗CTL实验的影响 | 第73-74页 |
3 MVA boost对DNA疫苗ELISPOT实验的影响 | 第74页 |
4 小结 | 第74-76页 |
四 细胞因子对治疗性HBV疫苗免疫应答的影响 | 第76-88页 |
1 IL-2蛋白和质粒对治疗性HBV疫苗免疫应答的影响 | 第76-79页 |
2 不同细胞因子对治疗性HBV疫苗免疫应答的影响 | 第79-83页 |
3 联合GM-CSF和IL-2对治疗性HBV疫苗免疫应答的影响 | 第83-86页 |
4 小结 | 第86-88页 |
五 治疗性HBV疫苗对转基因小鼠的治疗作用 | 第88-95页 |
1 转基因小鼠血清中表面抗原浓度的检测 | 第88-89页 |
2 转基因小鼠血清中表面抗体浓度的检测 | 第89-90页 |
3 转基因小鼠血清中HBV DNA病毒滴度的检测 | 第90-91页 |
4 转基因小鼠肝功能指标—谷丙转氨酶检测 | 第91-92页 |
5 转基因小鼠的肝脏病理切片 | 第92-93页 |
6 CTL实验检测结果 | 第93-94页 |
7 小结 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
中文摘要 | 第107-111页 |
英文摘要 | 第111-117页 |
作者简历 | 第117页 |