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木霉β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化、性质和部分结构研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
1 前言第11-20页
   ·β-葡聚糖酶的来源和分类第11-14页
     ·微生物来源的β-葡聚糖酶第11-13页
     ·植物和动物来源的β-葡聚糖酶第13-14页
     ·β-葡聚糖酶的分类第14页
   ·β-葡聚糖酶的制备及分离纯化第14-15页
   ·β-葡聚糖酶的应用第15-19页
     ·在食品工业中的应用第15-17页
     ·在饲料工业中的应用第17页
     ·在植物抗真菌病基因工程中的应用第17-19页
       ·β-1,3-葡聚糖酶的独立抗病性第17-19页
       ·β-1,3-葡聚糖酶与其它防卫蛋白的协同抗病性第19页
   ·课题研究的目的及意义第19-20页
2 材料与方法第20-25页
   ·试验材料第20-21页
     ·试验材料第20页
     ·化学试剂第20-21页
     ·培养基和培养方法第21页
   ·主要仪器第21页
   ·试验方法第21-25页
     ·粗酶液的提取第21-22页
     ·β-1,3-葡聚糖酶活力的测定第22页
     ·蛋白质含量的测定第22页
     ·还原糖含量的测定第22页
     ·β-1,3-葡聚糖酶Native-PAGE的同工酶确定第22页
     ·Sephadex G-200凝胶柱层析第22页
     ·DEAE-Sepharose CL-6B层析分离第22-23页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的Native-PAGE纯度鉴定第23页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的分子量测定第23页
     ·β-1,3-葡聚糖酶等电点的测定第23页
     ·β-1,3-葡聚糖酶作用方式的确定第23-24页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的pH差光谱分析第24页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的圆二色谱分析第24页
     ·数据分析第24-25页
3 结果与分析第25-46页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化第25-31页
     ·沉淀方法对β-1,3-葡聚糖酶回收率和比活力的影响第25-28页
       ·(NH_4)_2SO_4盐析对β-1,3-葡聚糖酶回收率和比活力的影响第25页
       ·乙醇浓度对β-1,3-葡聚糖酶回收率和比活力的影响第25-26页
       ·丙酮浓度对β-1,3-葡聚糖酶回收率和比活力的影响第26-27页
       ·采用三种方法沉淀分离β-1,3-葡聚糖酶效果的比较第27-28页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的同工酶确定第28页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的Sephadex G-200层析分离第28页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的电泳纯度鉴定第28-29页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的DEAE-Sepharose CL-6B层析分离第29-30页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的电泳纯度鉴定第30-31页
     ·β-1,3-葡聚糖酶分离纯化的基本流程第31页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的酶学特性第31-42页
     ·β-1,3-葡聚糖酶最适反应pH值的确定第31-32页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的酸碱稳定性第32页
     ·β-1,3-葡聚糖酶最适反应温度的确定第32-33页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的热稳定性第33-34页
     ·β-1,3-葡聚糖酶反应条件的优化第34-35页
     ·反应时间对β-1,3-葡聚糖酶活力的影响第35-36页
     ·离子强度对β-1,3-葡聚糖酶活力的影响第36页
     ·抑制剂或激活剂对β-1,3-葡聚糖酶活力的影响第36-38页
       ·金属离子对β-1,3-葡聚糖酶活力的影响第36-37页
       ·其他化合物对β-1,3-葡聚糖酶活力的影响第37-38页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的底物专一性第38页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的动力学性质第38-40页
       ·β-1,3-葡聚糖酶的动力学常数的测定第38-39页
       ·β-1,3-葡聚糖酶的抑制动力学第39-40页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的分子量测定第40-41页
     ·β-1,3-葡聚糖酶等电点的测定第41页
     ·β-1,3-葡聚糖酶作用方式的确定第41-42页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的紫外pH差光谱第42-44页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的圆二色性第44-46页
     ·远紫外圆二色性分析β-1,3-葡聚糖酶的二级结构第44-45页
     ·远紫外圆二色数据辨认β-1,3-葡聚糖酶的三级结构第45-46页
4 讨论第46-49页
   ·β-1,3-葡聚糖酶纯化方法的比较第46页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的性质第46-48页
   ·本课题的后续工作第48-49页
5 结论第49-50页
参考文献第50-58页
致谢第58-59页
附录第59页

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