| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-22页 |
| ·抗体库技术的发展历程 | 第8-9页 |
| ·噬菌体抗体库技术优越性 | 第9页 |
| ·噬菌体抗体 | 第9-10页 |
| ·噬菌体抗体库的表达载体 | 第10-11页 |
| ·λ噬菌体 | 第10页 |
| ·丝状噬菌体 | 第10-11页 |
| ·噬菌粒(Phagemid) | 第11页 |
| ·pComb3噬菌体载体系统的特点 | 第11-14页 |
| ·噬菌体抗体库筛选技术 | 第14-15页 |
| ·抗体库筛选方法 | 第14-15页 |
| ·结合抗体的回收 | 第15页 |
| ·噬菌体抗体库技术的应用 | 第15-19页 |
| ·制备人源化抗体 | 第15-17页 |
| ·应用抗体库技术改良抗体性能 | 第17-19页 |
| ·噬菌体抗体库技术的发展前景 | 第19-20页 |
| ·噬菌体抗体库技术面临的挑战 | 第20-22页 |
| 第2章 绪论 | 第22-23页 |
| 第3章 材料与方法 | 第23-32页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·抗原与单抗 | 第23-24页 |
| ·工具酶和试剂 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第25页 |
| ·引物 | 第25-26页 |
| ·抗禽流感病毒抗体基因的扩增与鉴定 | 第26-27页 |
| ·实验鸡的免疫 | 第26页 |
| ·外周血淋巴细胞分离 | 第26页 |
| ·总RNA提取 | 第26页 |
| ·逆转录cDNA第一链 | 第26-27页 |
| ·扩增抗体轻链基因和重链Fd基因 | 第27页 |
| ·抗禽流感病毒Fab噬菌体抗体库构建 | 第27-30页 |
| ·PCR产物纯化 | 第27-28页 |
| ·载体和PCR产物酶切片段的制备 | 第28页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第28页 |
| ·XLI-Blue电转化感受态菌的制备 | 第28页 |
| ·DNA片段与载体的连接 | 第28-29页 |
| ·抗体轻链基因的克隆 | 第29页 |
| ·Fab噬菌体抗体库的构建 | 第29页 |
| ·辅助噬菌体原种的制备和滴度测定 | 第29-30页 |
| ·抗禽流感病毒噬菌体抗体库的鉴定 | 第30-32页 |
| ·噬菌体抗体滴度的测定及酶切鉴定 | 第30页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第30页 |
| ·制备鸡抗禽流感病毒噬菌体单抗 | 第30-31页 |
| ·竞争ELISA法鉴定鸡抗禽流感病毒噬菌体单抗的特异性 | 第31页 |
| ·阳性克隆的基因序列分析 | 第31-32页 |
| 第4章 结果 | 第32-41页 |
| ·抗禽流感病毒抗体基因的扩增与鉴定 | 第32-34页 |
| ·免疫鸡外周血抗体检测结果 | 第32页 |
| ·RNA完整性及纯度和浓度鉴定 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增抗体Fab基因 | 第33-34页 |
| ·抗禽流感病毒Fab噬菌体抗体库构建 | 第34-37页 |
| ·辅助噬菌体原种的制备及滴定 | 第34页 |
| ·抗体轻链基因的克隆 | 第34-36页 |
| ·Fab噬菌体抗体库的构建 | 第36-37页 |
| ·抗禽流感病毒噬菌体抗体库的鉴定 | 第37-41页 |
| ·噬菌体抗体滴度的测定及酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第38-39页 |
| ·抗禽流感病毒单抗的特异性鉴定 | 第39页 |
| ·阳性克隆的基因序列分析 | 第39-41页 |
| 第5章 讨论 | 第41-46页 |
| ·抗禽流感病毒抗体基因的扩增与鉴定 | 第41-42页 |
| ·总RNA提取方法的探讨 | 第41页 |
| ·目的基因的引物设计 | 第41页 |
| ·RT-PCR反应条件的探讨 | 第41-42页 |
| ·抗禽流感病毒Fab噬菌体抗体库构建 | 第42页 |
| ·抗禽流感病毒噬菌体抗体库的鉴定 | 第42-46页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第42-44页 |
| ·筛选阳性克隆的序列分析 | 第44页 |
| ·抗禽流感病毒单抗的特异性鉴定 | 第44页 |
| ·本试验的意义及存在的问题 | 第44-46页 |
| 第6章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 发表文章及参加课题一览表 | 第55-56页 |
| 英文缩略词表 | 第56-58页 |
| 附录：试剂配方 | 第58-60页 |