| 主要英文缩略词表 | 第1-10页 |
| Ⅰ前言 | 第10-11页 |
| Ⅱ文献综述 | 第11-24页 |
| 一 植物抗逆基因工程研究进展 | 第11-19页 |
| 1. 国内外研究现状 | 第11-13页 |
| 2. 国内外研究现状分析 | 第13-14页 |
| 3. rd29A 研究 | 第14-15页 |
| ·胁迫基因功能 | 第14页 |
| ·胁迫诱导基因的调控与表达 | 第14-15页 |
| 4. RNA 的发现、发展与应用 | 第15-18页 |
| 5. 抗除草剂 | 第18-19页 |
| 二 刺槐组织培养研究现状 | 第19-23页 |
| 1. 形成层的离体培养增殖法 | 第19页 |
| 2. 茎段离体培养增殖法 | 第19-20页 |
| ·嫩茎增殖法 | 第19-20页 |
| ·茎基愈伤组织增殖法 | 第20页 |
| ·玻璃化苗成苗 | 第20页 |
| 3. 叶片的离体培养增殖法 | 第20-21页 |
| 4. 胚培养增殖法 | 第21-22页 |
| 5. 原生质体培养法 | 第22页 |
| 6. 基因工程法 | 第22-23页 |
| 三 四倍体刺槐组织培养研究进展 | 第23页 |
| 四 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| Ⅲ实验技术路线 | 第24-25页 |
| Ⅳ实验部分 | 第25-59页 |
| 一 rd29A基因表达载体的构建 | 第25-41页 |
| (一) 实验材料与方法 | 第25-35页 |
| 1. 实验材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌种和质粒 | 第25页 |
| ·酶与试剂 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| 2. 方法 | 第26-35页 |
| ·质粒的制备 | 第26-29页 |
| ·大肠杆菌质粒的制备 | 第26-28页 |
| ·农杆菌质粒的制备 | 第28-29页 |
| ·基因克隆 | 第29-33页 |
| ·拟南芥rd29A 基因cDNA 的制备 | 第29-32页 |
| ·PCR 片段的回收 | 第32页 |
| ·rd29A cDNA 重组克隆的蓝白斑筛选 | 第32-33页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第33-35页 |
| (二) 实验结果与分析 | 第35-41页 |
| 1. 拟南芥rd29A 基因的克隆 | 第35-38页 |
| ·拟南芥叶片总RNA 的提取和琼脂糖凝胶电泳检测 | 第35页 |
| ·rd29A 基因cDNA 的RT-PCR 扩增 | 第35页 |
| ·rd29A 基因cDNA 的克隆及序列分析 | 第35-38页 |
| ·rd29A 基因cDNA 测序结果 | 第36-37页 |
| ·GENBANK BLAST 结果及分析 | 第37-38页 |
| 2. 载体构建 | 第38-40页 |
| ·中间表达载体构建及检测 | 第38-39页 |
| ·植物表达载体构建及检测 | 第39-40页 |
| 3 农杆菌的转化和转化菌的鉴定 | 第40-41页 |
| ·农杆菌的转化 | 第40页 |
| ·转化菌的鉴定 | 第40-41页 |
| 二、四倍体刺槐再生体系的建立 | 第41-59页 |
| 1 材料与方法 | 第41-45页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·植物激素 | 第41-42页 |
| ·基本培养基 | 第42页 |
| ·试验方法 | 第42-45页 |
| ·无菌外植体的获取 | 第42页 |
| ·培养环境 | 第42页 |
| ·评价指标 | 第42-43页 |
| ·试验设计 | 第43-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-59页 |
| ·愈伤组织的诱导和不定芽分化 | 第45-57页 |
| ·不同外植体材料诱导愈伤组织和植株再生频率的差异 | 第45-47页 |
| ·不同基本培养基对愈伤组织的诱导和芽分化的影响 | 第47-48页 |
| ·不同激素配比对茎叶愈伤组织诱导和芽分化的影响 | 第48-51页 |
| ·激素对根愈伤组织诱导及芽分化的影响 | 第51-55页 |
| ·不同暗培时间对愈伤组织诱导及分化的影响 | 第55-57页 |
| ·根的诱导 | 第57-59页 |
| ·不同无机盐质量浓度培养基对生根的影响 | 第57-58页 |
| ·不同NAA 浓度对生根的影响 | 第58页 |
| ·不同IBA 浓度对生根的影响 | 第58-59页 |
| ·不同NAA 与IBA 浓度配合对生根的影响 | 第59页 |
| ·植株的移栽 | 第59页 |
| Ⅴ讨论 | 第59-62页 |
| 1. 拟南芥rd29A 的克隆策略 | 第60页 |
| 2. 关于拟南芥rd29A 植物表达载体的构建策略 | 第60页 |
| 3. 关于连接反应 | 第60页 |
| 4. 关于直接法转化农杆菌 | 第60-61页 |
| 5. 关于转化农杆菌的鉴定方法 | 第61页 |
| 6. 四倍体刺槐遗传转化再生体系的建立 | 第61-62页 |
| Ⅵ结论 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 图片 | 第70-71页 |
| 人个简介 | 第71-72页 |
| 导师简介 | 第72-73页 |
| 独创性声明 | 第73页 |