| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 提要 | 第7-9页 |
| 第一部分 引言 | 第9-17页 |
| ·定向进化策略 | 第9-12页 |
| ·逆境条件下植物乙烯反应调控机理 | 第12-15页 |
| ·NtERF2 氨基酸保守性研究的状况和意义 | 第15-17页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第17-38页 |
| ·实验材料 | 第17-25页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| ·实验试剂 | 第18-20页 |
| ·主要溶液的配制 | 第20-25页 |
| ·计算机辅助工具 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-38页 |
| ·易错聚合酶链式反应(EP-PCR) | 第25-27页 |
| ·重组子质粒的构建 | 第27-29页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第29-31页 |
| ·DNA [γ-~32P] ATP 标记 | 第31-32页 |
| ·凝胶电泳阻滞分析(EMSA) | 第32-34页 |
| ·高通量筛选 | 第34-35页 |
| ·筛选到的突变型erebp2 测序 | 第35-37页 |
| ·氨基酸序列比对分析 | 第37-38页 |
| 第三部分 结果 | 第38-52页 |
| ·易错PCR 突变体基因文库的构建 | 第38页 |
| ·pET166::erebp2 重组子构建流程 | 第38-40页 |
| ·重组子中目的基因检测 | 第40-42页 |
| ·突变体蛋白的诱导和表达检验 | 第42页 |
| ·野生型NtERF2 的诱导、表达和纯化 | 第42-44页 |
| ·野生型NtERF2 与GCC box 结合和竞争性结合分析 | 第44-46页 |
| ·突变型NtERF2 与GCC box 凝胶电泳阻滞分析 | 第46页 |
| ·突变体文库筛选 | 第46-48页 |
| ·筛选突变体测序 | 第48-49页 |
| ·筛选突变体氨基酸序列比对 | 第49-52页 |
| 第四部分 讨论 | 第52-58页 |
| ·易错PCR 诱导突变erebp2 中突变率的影响分析 | 第52-53页 |
| ·不同来源的NtERF2 与GCC box 的凝胶电泳阻滞分析 | 第53-54页 |
| ·Southwestern blotting 的改进分析 | 第54-55页 |
| ·突变氨基酸对NtERF2 与GCC box 特异结合的影响 | 第55-56页 |
| ·定向进化技术在基因转录调控中的研究 | 第56-58页 |
| 第五部分 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 摘要 | 第64-65页 |
| ABSTRACT | 第65-66页 |
| 导师及作者简介 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-72页 |
