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大田试验转基因杨树无性系的抗虫性研究

第一部分 文献综述第1-28页
 一、 林木基因工程研究第11-13页
 二、 转抗虫基因工程研究第13-18页
  1 蛋白酶抑制剂基因第13-15页
  2 苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白(Bt)基因第15-17页
  3 蛋白酶抑制剂基因和Bt基因的比较第17-18页
 三、 转基因植物的时空表达第18-22页
  1 外界环境条件与外源基因表达第18页
  2 生长发育与外源基因表达第18页
  3 外源基因整合第18-19页
  4 外源基因表达稳定性第19-20页
  5 转基因植物中外源基因的沉默第20-22页
   ·DNA-DNA相互作用引起的DNA甲基化第20-21页
   ·RNA介导的DNA甲基化第21页
   ·位置效应与DNA甲基化第21-22页
   ·转基因的特性与DNA甲基化第22页
  6 共抑制第22页
 四、 转基因树木环境释放的安全性第22-28页
  1 进入自然环境的基因工程树第23页
  2 基因工程树的生态危险第23-26页
   ·转基因林木稳定性第24页
   ·转基因林木的基因漂流(Gene flow)第24页
   ·对自然生态系统的影响第24-26页
  3 防止基因工程树对环境污染的对策第26-28页
下篇 研究报告第28-54页
 第一章 大田试验转基因杨树的分子检测第29-46页
  一. PCR检测第29-41页
   1 实验材料第29页
   ·菌株与质粒第29页
   ·植物材料第29页
   2 实验方法第29-33页
   ·植物总DNA提取第29-30页
     ·酚氯仿抽提第29-30页
     ·CTAB裂解-硅珠吸附法(Boom 1990,Matthias)第30页
     ·试剂盒提取第30页
   ·质粒DNA提取第30-31页
   ·PCR扩增第31-32页
     ·引物设计第31-32页
     ·PCR反应体系第32页
     ·提高PCR产物的方法第32页
   ·转CpTI基因杨树扩增产物的序列分析第32-33页
     ·转CpTI基因杨树扩增产物纯化第32页
     ·测序反应体系第32-33页
     ·测序反应产物的纯化的方法及测序仪器第33页
   3 结果与分析第33-41页
   ·纯化杨树DNA方法第33-34页
   ·杨树PCR检测第34-36页
     ·新疆杨的PCR条件第34-35页
     ·转Bt基因杨树PCR检测第35页
     ·转CpTI基因杨树的PCR检测第35-36页
     ·转CpTI基因的新疆杨与106杨的PCR结果比较第36页
   ·转CpTI基因杨树PCR扩增产物的序列分析第36-41页
     ·PCR产物切胶纯化第36-37页
     ·产物的序列分析第37页
     ·结论与讨论第37-41页
  二. ELISA分析第41-46页
   1 实验材料第41页
   ·植物样品第41页
   ·试剂及仪器第41页
   2 实验方法第41-42页
   3 结果与分析第42-46页
   ·Bt蛋白的标准曲线第42-43页
   ·杨树转基因植株中的Bt毒蛋白的表达第43-44页
   ·结论与讨论第44-46页
 第二章 转基因杨树的抗虫性测定第46-54页
  1 实验材料第46页
   ·供试杨树品种第46页
   ·供试虫源第46页
  2 实验方法第46-47页
   ·杀虫活性时间动态测定方法第46-47页
   ·对不同龄期幼虫的杀虫活性的测定方法第47页
   ·幼虫生长发育影响测定方法第47页
  3 结果与分析第47-51页
   ·转Bt基因杨树对杨小舟蛾不同世代种群的杀虫活性时间动态第47-49页
   ·转Bt基因杨树对杨小舟蛾不同龄期幼虫的杀虫活性第49-50页
   ·转Bt基因杨树对杨小舟蛾幼虫生长的影响第50-51页
     ·单体饲养毒力测定结果第50页
     ·对幼虫取食和体重增长的影响第50-51页
  4 结论与讨论第51-54页
第三部分 结论与展望第54-56页
参考文献第56-59页

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